「セリアック病の早期診断を改善するために、HLA-DQ2 および DQ8 のスクリーニングに DNA 検査を追加」 (GLUTEN-GEN)
「オランダの青少年予防医療センター（グルテンゲン）におけるセリアック病の早期診断を改善するために、HLA-DQ2 および DQ8 のスクリーニングのための DNA 検査を追加」
調査の概要
詳細な説明
セリアック病 (CD) は、通常の食事からグルテンを含む穀物、特に小麦、ライ麦、大麦を摂取することによって引き起こされる免疫介在性の全身性疾患です。 この疾患は、グルテン依存性の臨床症状、CD 特異的抗体、ヒト白血球抗原 (HLA)-DQ2 または HLA-DQ8 ハプロタイプ、および小腸の慢性炎症のさまざまな組み合わせによって特徴付けられます[1、2]。 小腸の固有層の T 細胞は、抗原提示細胞上の HLA クラス II 特異性 DQ2 および/または DQ8 に結合すると、グルテン ペプチドを認識します。
CD は、生涯にわたる最も一般的な食物関連障害の 1 つです。一般人口における頻度は 1% です。これはオランダの 170,000 人に相当し、そのうち少なくとも 30,000 人は 子供[3-7]。 しかし、慢性下痢を伴う吸収不良、小児の発育不良、体重減少から、慢性疲労、骨粗鬆症/骨密度の低下、胃腸症状などの非特異的な徴候や症状に至るまで、臨床症状や症状が多様であることもあり、CDは認識されないことが多いです。または肝臓酵素の上昇[5、7、8]。 認識されておらず、したがって未診断かつ未治療の疾患は、思春期の遅れ、精神神経障害、関連する自己免疫疾患、流産、少子出産、骨粗鬆症、そしてまれに悪性腫瘍などの短期および長期の合併症を伴います。 CD は社会に多大な健康負担をもたらし、広範な経済的マイナス影響をもたらし、そのため現在および将来の医療システムにとって資源の課題となっています [9]。 診断されたら、グルテンフリー食事（GFD）による治療後に患者の健康状態は改善します。
CD のタイムリーな診断と治療は、積極的な症例検索によって達成できるということは、進行中の ZonMw 後援プロジェクト GLUTENSCREEN (531002001; www.glutenscreen.nl) の暫定結果を示しています。 2019 年 2 月に開始されたこの積極的な症例発見プロジェクトでは、ケネマーランド地域の予防青少年医療センター (YHCC) に通う 1 ～ 4 歳の子供全員が、定期診察中に毎年 10 件の CD 関連症状の評価を受けています。 お子様に 1 つ以上の症状がある場合は、お子様の保護者も参加するよう招待されます。 インフォームドコンセントの後、血液滴に含まれる組織トランスグルタミナーゼ (TGA) に対する CD 特異的抗体を評価するポイント オブ ケア テスト (POCT) が、YHCC の現場で実施されます。 POCT が陽性 (TGA 存在) の場合、CD が強く疑われ、子供は標準治療に従って診断を受けるためにライデン大学医療センター (LUMC) に紹介されます [1、2]。 GLUTENSCREEN の暫定結果は予想を超えています。YHCC に参加している 14,917 人の子供のうち、5,512 人 (37.0%) に 1 つ以上の CD 関連の症状がありました。
3,203 人 (58.1%) の子供の親は、POC テストについてインフォームドコンセントを与えました。 61 人 (1.9%) の子供で POC 検査が陽性でした。 当院での追加検査の後、55人の小児（検査を受けた小児の1.7％）でCDが確認され（血清IgA TGA >10xULNおよび筋内膜に対するIgA（EMA）陽性）、POC検査が疑わしい/陽性の5人の小児では除外された。 2人の小児はHLA-DQ2/8が陰性で、血清中のTGAは陰性（ELISA検査）で、3人の小児はTGAが10×ULN未満（ELISA検査）で、小腸生検でマーシュ1病変が認められた。 1 人の子供はまだ病院での診察が必要です (両親は今まで拒否しました) (www.glutenscreen.nl)。 GLUTENSCREEN に招待された保護者のうち、ほぼ 80% が、YHCC の定期訪問中に POCT を実施できるのであれば参加することに意欲的です。 すべての医療専門家は、症例発見による CD の早期発見が YHCC で提供する予防ケアの価値を高めると報告しました。
オランダの予防 YHCC における CD 症例発見プロジェクトのこれらの暫定結果は、予防 YHCC での CD の早期発見が実現可能であり、親や医療専門家に広く受け入れられていることを示しています。
GLUTENSCREEN では、症状のあるすべての子供が 4 歳になるまで予防 YHCC で毎年 CD 検査を受けます。 ケネマーランド地域では、GLUTENSCREEN がすでに定期ケアに導入されており、POCT は診察時に実施されます。 ただし、CD の発症には、一般人口の 40% に存在する遺伝的感受性が必要です。 この疾患は、ほとんどの場合、染色体 6 によって体系化されたヒト白血球抗原 (HLA)-DQ2 および/または HLA-DQ8 ハプロタイプを持つ個人に発生します。 HLA-DQ2/-DQ8 が存在しない場合、100% に近い確実性で CD の可能性または将来の発症が排除される可能性があります。 CD の発症に対する HLA タイピングの陰性的中率は高いため、HLA-DQ2/DQ8 陰性の人 (一般人口の 60%) では、繰り返しの CD 検査は不要になります [10]。
現在、HLA タイピングは GLUTENSCREEN の一部ではありません。現在の技術では、DNA 抽出が必要なため、YHCC のような予防医療環境のように、検査室が利用できない環境では重大な欠点が生じます。 DNA 抽出用の材料は通常、全血 (最小量 4 ～ 5 ml) または頬粘膜などの他の細胞から得られます。 しかし、YHCC では静脈穿刺は実行できず、小児の頬粘膜 DNA 抽出には時間がかかります。
私たちはここで、予防YHCCのCDの早期検出のために、乾燥血液スポットから抽出されたHLAタイピングのためのDNA分離検査を検証し、実装することを提案します。
他のプロジェクトでは、乾燥血液サンプルから取得した DNA に対するリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) の使用が成功し、この設定で HLA-DQ2/DQ8 タイピングに簡単に適用できることが示されています [11]。
提案された設定では、CD の HLA タイピングが乾燥血斑でこれまで行われていなかったため、予防 YHCC での CD の症例発見戦略に HLA-DQ2/8 タイピングを追加することは革新的です。 さらに、この技術を組み込むことは、CD の積極的な症例発見への新しいアプローチとなり、その結果、予防 YHCC での早期診断による CD の二次予防が向上します。
提案された研究の結果は、YHCC における CD の積極的な症例発見手順に影響を与えるでしょう。 HLA-DQ2/8 陰性と検査された小児では CD の反復検査を省略することができ、これは対象集団の 60% に相当します。 この研究により、次のような結果が得られます。
- より効率的で、HLA-DQ2/8 陰性の子供の負担が軽減され、検査を受けなければならない子供が減ります。
- 幼児から親へのCDに対するHLAタイピングの受容性の明確さ。
子どもに対する不必要なフォローを減らすことでコストを削減します。 YHCC での症例発見設定にこの技術を組み込むために、一般人口の 95% 以上が YHCC を訪れるため、この検査は 0 ～ 4 歳の一般オランダ人人口のかなりの部分に提供されます。
- このドキュメントの最後にある参考文献を参照してください
研究の種類
入学 (推定)
連絡先と場所
研究場所
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South Holland
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Leiden、South Holland、オランダ、2333 ZA
- Leiden University Medical Centre (LUMC)
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 子
- 大人
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
フェーズ 1: LUMC 部門に通う 50 人の子供から 従来の HLA タイピングが標準治療の一部である CD の疑いのある小児科、または HLA タイピングがすでにわかっている CD と診断された小児の場合。 LUMC は、小児の CD に関するリファレンス センターです。 外来診療所では、6 か月あたり 90 人以上の子供が CD の疑いで受診し、毎年 500 人以上の子供が CD の追跡調査のためにクリニックを訪れます。これは、HLA の結果を検証するのに必要な数を意味します。現実的です。
フェーズ 2 : ケネマーランド地域の予防 YHCC を訪れる、症状のある 1 ～ 4 歳の子供の親全員に、この研究への参加を求めます。
説明
包含基準:
フェーズ 1:
- 1歳から18歳まで、
- CD（の疑い）についてLUMCで相談、
- 両親はオランダ語の十分な知識を持っており、
- 子供および/または親からの書面によるインフォームドコンセント
フェーズ2：
- 生後12ヶ月から4歳まで、
- CD関連の10の症状のうち少なくとも1つ
- CDと診断されていない、
- GFD ではなく、
- 両親はオランダ語の十分な知識を持っており、
- 親からの書面によるインフォームドコンセント
除外基準:
フェーズ 1 と 2:
- インフォームドコンセントがない、
- オランダ語の知識が不十分である、および/または提供された情報を理解できない、
- 出血性疾患。
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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フェーズ 1 コホート (HLA-DQ2/8 タイピングの検証)
CD（の疑い）のためにLUMCに相談に来る子供たち（1～18歳）
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フェーズ 1 および 2: 採血 (定期的なケアと組み合わせて) およびインフォームドコンセントの後、追加の指刺しによって得られた血滴 (フェーズ 1 およびフェーズ 2 では既存の指刺しからの追加の液滴のみ) が濾紙上に堆積されます。 S&S 903™ (シュライヒャー アンド シュエル)。
DNAは、この目的のために指定されたQIAamp法を使用して、乾燥血液スポット(Qiagen)から単離される。
乾燥血液スポットを使用した HLA-DQ2 および DQ8 型判定の結果は、従来の HLA 型判定の結果と比較されます。
材料の品質に影響を与える可能性のある要因は、検証プロセスで考慮されます。
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フェーズ 2 コホート (予防 YHCC での HLA-DQ2/8 タイピングの実施)
CD関連の10の症状のうち少なくとも1つを有し、CDと診断されておらず、GFDを受けていない小児（生後12か月から4歳）、
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フェーズ 1 および 2: 採血 (定期的なケアと組み合わせて) およびインフォームドコンセントの後、追加の指刺しによって得られた血滴 (フェーズ 1 およびフェーズ 2 では既存の指刺しからの追加の液滴のみ) が濾紙上に堆積されます。 S&S 903™ (シュライヒャー アンド シュエル)。
DNAは、この目的のために指定されたQIAamp法を使用して、乾燥血液スポット(Qiagen)から単離される。
乾燥血液スポットを使用した HLA-DQ2 および DQ8 型判定の結果は、従来の HLA 型判定の結果と比較されます。
材料の品質に影響を与える可能性のある要因は、検証プロセスで考慮されます。
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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乾燥血液斑における HLA 検査の感度と特異度が計算されます (フェーズ 1)
時間枠：6 か月目から 9 か月目 (総研究期間: 18 か月)
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乾燥血液スポットを使用した HLA-DQ2 および DQ8 型判定の結果は、従来の HLA 型判定の結果と比較されます。
乾燥血痕からの HLA-DQ タイピングのための DNA 抽出は、QIAamp 法を使用して実行されます [12-15]。
DNA を単離するためのプロトコールが開発されており、熟練した実験室分析者であれば誰でも単離を実行できます。
1 サンプルあたりの DNA 抽出には約 15 分かかり、複数のサンプルを同時に測定することが可能です。
機器と光学技術はすでに LUMC に存在しています。
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6 か月目から 9 か月目 (総研究期間: 18 か月)
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一般集団（フェーズ 2）集団（親）および医療従事者における HLA-DQ2/8 の有病率。（フェーズ 2）
時間枠：9 か月目から 12 か月目 (検証フェーズ 1 後)
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HLA-DQ2/8 タイピングが陽性の小児 (n/%)、HLA-DQ2/8 タイピングが陰性の小児 (n/%)、検査に不合格となった小児 (理由を含む)、HLA の受容と影響の評価-オランダ人（親）と医療専門家によるCDのタイピング HLA-DQタイピングには、血液1～2滴に相当する約15μLが必要です。
インフォームドコンセントの後、GLUTENSCREEN で行われるように、TGA 測定のための POCT を実行する際に、指刺しによる新規 HLA-DQ2/8 タイピング用の追加の血液滴が収集されます。
ろ紙は YHCC で室温で安全に保管されます。
週に一度、乾燥した血液スポットが付着した収集された濾紙はすべて、特別にマークされた封筒に入れて免疫科に送られます。
DNA 分離後、HLA-DQ タイピングと解釈が行われます。
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9 か月目から 12 か月目 (検証フェーズ 1 後)
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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治験戦略の費用対効果 (YHCC の医療スタッフおよび看護スタッフによる時間投資 (秒)、治験戦略のコスト (時間、材料) (ユーロ))
時間枠：月9から月12まで
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HLA-DQ2/8 タイピングを使用した場合と使用しない場合の症例検索の費用対効果を評価します。
研究のこの部分は医療経済学者によって行われます。
含まれる要素には、新しい遺伝子検査、YHCC および研究室の医療専門家、遺伝子検査用材料の保管と輸送のコストが含まれます。
これらのコストは、GLUTENSCREEN で行われた HLA-DQ2/8 検査を行わない状況でのコストと比較されます。
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月9から月12まで
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協力者と研究者
捜査官
- 主任研究者：Caroline R Meijer-Boekel, PhD、Leiden University Medical Center
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- Damschroder LJ, Aron DC, Keith RE, Kirsh SR, Alexander JA, Lowery JC. Fostering implementation of health services research findings into practice: a consolidated framework for advancing implementation science. Implement Sci. 2009 Aug 7;4:50. doi: 10.1186/1748-5908-4-50.
- Husby S, Koletzko S, Korponay-Szabo IR, Mearin ML, Phillips A, Shamir R, Troncone R, Giersiepen K, Branski D, Catassi C, Lelgeman M, Maki M, Ribes-Koninckx C, Ventura A, Zimmer KP; ESPGHAN Working Group on Coeliac Disease Diagnosis; ESPGHAN Gastroenterology Committee; European Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition. European Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition guidelines for the diagnosis of coeliac disease. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2012 Jan;54(1):136-60. doi: 10.1097/MPG.0b013e31821a23d0. Erratum In: J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2012 Apr;54(4):572.
- Jansson-Knodell CL, Hujoel IA, West CP, Taneja V, Prokop LJ, Rubio-Tapia A, Murray JA. Sex Difference in Celiac Disease in Undiagnosed Populations: A Systematic Review and Meta-analysis. Clin Gastroenterol Hepatol. 2019 Sep;17(10):1954-1968.e13. doi: 10.1016/j.cgh.2018.11.013. Epub 2018 Nov 16.
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- Lindfors K, Ciacci C, Kurppa K, Lundin KEA, Makharia GK, Mearin ML, Murray JA, Verdu EF, Kaukinen K. Coeliac disease. Nat Rev Dis Primers. 2019 Jan 10;5(1):3. doi: 10.1038/s41572-018-0054-z.
- Jansen M, van Zelm M, Groeneweg M, Jaddoe V, Dik W, Schreurs M, Hooijkaas H, Moll H, Escher J. The identification of celiac disease in asymptomatic children: the Generation R Study. J Gastroenterol. 2018 Mar;53(3):377-386. doi: 10.1007/s00535-017-1354-x. Epub 2017 Jun 6.
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- Ruiz-Ortiz E, Montraveta M, Cabre E, Herrero-Mata MJ, Pujol-Borrell R, Palou E, Faner R. HLA-DQ2/DQ8 and HLA-DQB1*02 homozygosity typing by real-time polymerase chain reaction for the assessment of celiac disease genetic risk: evaluation of a Spanish celiac population. Tissue Antigens. 2014 Dec;84(6):545-53. doi: 10.1111/tan.12472.
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- Meijer CR, Auricchio R, Putter H, Castillejo G, Crespo P, Gyimesi J, Hartman C, Kolacek S, Koletzko S, Korponay-Szabo I, Ojinaga EM, Polanco I, Ribes-Koninckx C, Shamir R, Szajewska H, Troncone R, Villanacci V, Werkstetter K, Mearin ML. Prediction Models for Celiac Disease Development in Children From High-Risk Families: Data From the PreventCD Cohort. Gastroenterology. 2022 Aug;163(2):426-436. doi: 10.1053/j.gastro.2022.04.030. Epub 2022 Apr 26.
- Wessels MM, Vriezinga SL, Koletzko S, Werkstetter K, Castillejo-De Villasante G, Shamir R, Hartman C, Putter H, van der Pal SM, Wijmenga C, Bravi E, Mearin ML; PreventCD Study Group. Impact on parents of HLA-DQ2/DQ8 genotyping in healthy children from coeliac families. Eur J Hum Genet. 2015 Mar;23(3):405-8. doi: 10.1038/ejhg.2014.113. Epub 2014 Jun 11.
- Roy A, Pallai M, Lebwohl B, Taylor AK, Green PH. Attitudes Toward Genetic Testing for Celiac Disease. J Genet Couns. 2016 Apr;25(2):270-8. doi: 10.1007/s10897-015-9867-z. Epub 2015 Aug 2.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (推定)
研究の完了 (推定)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (推定)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (推定)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- P23.025 (METC LDD)
- 05550402110016 (その他の助成金/資金番号：ZonMw ("Preventie Vroege opsporing" program))
個々の参加者データ (IPD) の計画
個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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