ヒトにおけるソラマメとハチミツクロレラのタンパク質の品質 (Giant Leaps)

目的は、健康な人におけるハニークロレラとソラマメ肉類似体からのタンパク質の栄養品質、特にタンパク質とアミノ酸の消化率および窒素保持の観点から測定することです。 回腸の消化率は、食後に経鼻回腸チューブで採取された回腸消化物で測定されます。 サンプル中の食事性窒素とアミノ酸を追跡するために、タンパク質源は本質的に 15N でラベルされています。

倫理的および規制的側面:

このプロトコールは倫理委員会に承認され、フランス医薬品保健庁の認可を受けています。 個人データの管理は、個人データ保護に関する規則（「規則番号 2018-493 du 20 juin 2018」）に従って行われます。

食事：

食事は、40 gのハニークロレラを含むドリンク、または80 gの肉類似物を含む混合食事のいずれかで構成され、タンパク質20 gが摂取できます。 食事の官能特性を最適化するために、官能検査が実現されます。

ボランティア:

16 人の被験者が研究に含まれます。 研究者らは、通常の60％の脱落者に対応するために約40人のボランティアを募集する予定だ。

実験の 4 日前に、ボランティアは、タンパク質摂取量を制御するために、体重に合わせた標準的な食事に従います (体重 1 kg あたりタンパク質 1.3 g)。

ボランティアは実験前日の朝にアヴィセンヌ病院の人間栄養研究センターに到着します。 彼らには、腸管を24時間通過できる二重内腔腸管が装備されます。 内腔の 1 つは放射線不透過性であり、腸内の非吸収性マーカーを灌流するのに役立ちます (スローマーカー法)。 もう 1 つの内腔は、灌流部位の 15 cm 下の位置にあり、流出液の継続的な吸引に使用されます。 廃液中の非吸収性マーカーを測定することにより、廃液の流量を決定することができます。

実験日の前夜に、腸内因性タンパク質を標識するために、体内総水分量 5g/kg に達するように 99% の重水素水を 3 回経口摂取します。

実験当日、回腸末端におけるチューブの位置を確認するために、X線撮影によってチューブの位置がチェックされます。 採血のために前腕の静脈にカテーテルが挿入されます。 非吸収性マーカーである PEG-4000 (20g/l) の灌流は、1 ml/分の流速で開始されます。 腸の流れと回腸基底サンプルを 30 分間収集します。 基礎血漿サンプルが採取されます。

次に、t=0 で、ボランティアはテスト用の食事を飲みます。 t = 8 時間まで、腸内容物を吸引によって継続的に収集し、30 分ごとにプールします。 血液は、4 時間の間は 30 分ごとに、その後は 1 時間ごとに採取されます。 尿は 2 時間ごとに 8 時間採取されます。

測定値:

アイルランドのダイジェスタでは次のようになります。

比濁法による PEG-4000、EA-IRMS による総 N および 15N 濃縮、UPLC によるアミノ酸濃度 (HCl 6N、110℃で 24 時間の酸加水分解後)、GC-c-IRMS による 15N アミノ酸濃縮 (精製後)陽イオン交換樹脂と誘導体化）、GC-c-IRMS による 2H アミノ酸濃縮、マイクロバイオーム分析（DNA シークエンシング）、ペプチド分析（LC-MS）。

血漿中:

グルコース、尿素（比色法）、インスリン（ELISA）、アミノ酸濃度（UPLC）、血漿タンパク質、尿素および遊離アミノ酸の 15N 濃縮（EA-IRMS、陽イオン交換樹脂での精製および誘導体化後）。

尿中:

尿素（比色法）および 15N 尿素（EA-IRMS、陽イオン交換樹脂での精製および誘導体化後）。

主な成果は次のとおりです。

タンパク質とアミノ酸の実際の回腸消化率（消化損失）、食後の脱アミノ化（代謝損失）、食後の正味タンパク質利用率