Eiwitkwaliteit van Fava Bean en Honey Chlorella bij mensen (Giant Leaps)

Het doel is om de voedingskwaliteit van eiwitten uit honingchlorella en bonenvleesanaloog bij gezonde mensen te bepalen, vooral in termen van verteerbaarheid van eiwitten en aminozuren en stikstofretentie. De ileale verteerbaarheid wordt bepaald in ileale digesta die postprandiaal worden verzameld met een naso-ileale buis. De eiwitbronnen zijn intrinsiek gelabeld in 15N om voedingsstikstof en aminozuren in de monsters te volgen.

Ethische en regelgevende aspecten:

Het protocol is goedgekeurd door de Ethische Commissie en goedgekeurd door het Franse Agentschap voor Drugs en Gezondheid. Het beheer van de persoonsgegevens zal in overeenstemming zijn met de verordening inzake de bescherming van persoonsgegevens ("verordening nr. 2018-493 van 20 juni 2018").

Maaltijd:

De maaltijd zal bestaan ​​uit een drankje met 40 g honingchlorella of een gemengde maaltijd met 80 g vleesanaloog, om 20 g eiwit te verkrijgen. Er zullen sensorische tests worden uitgevoerd om de organoleptische eigenschappen van de maaltijd te optimaliseren.

Vrijwilligers:

Er zullen zestien onderwerpen in het onderzoek worden betrokken. De onderzoekers zijn van plan ongeveer 40 vrijwilligers te werven om de gebruikelijke 60% schooluitval op te vangen.

Vier dagen vóór het experiment zullen de vrijwilligers een standaarddieet volgen dat is aangepast aan hun lichaamsgewicht om hun eiwitinname (1,3 g eiwit/kg lichaamsgewicht) onder controle te houden.

De vrijwilligers arriveren de ochtend vóór de dag van het experiment in het Human Nutrition Research Center van het Avicenne-ziekenhuis. Ze zullen worden uitgerust met een darmbuis met dubbel lumen die 24 uur lang door het darmkanaal kan worden gevoerd. Eén van de lumen is radio-ondoorzichtig en dient om een ​​niet-absorbeerbare maker in de darm te perfuseren (langzame markermethode). Het andere lumen is bestemd voor de continue aspiratie van het afvalwater, 15 cm onder de perfusieplaats. Door het meten van de niet-absorbeerbare marker in de effluenten kan het effluentdebiet worden bepaald.

Op de avond vóór de experimentele dag zullen ze 3 orale doses gedeutereerd water 99% innemen om 5 g/kg totaal lichaamswater te bereiken, om de endogene eiwitten in de darm te labelen.

Op de dag van het experiment wordt de positie van de buis gecontroleerd door middel van radiografie om de locatie ervan in het terminale ileum te verifiëren. Voor bloedafname wordt een katheter in de ader van de onderarm ingebracht. De perfusie van de niet-absorbeerbare marker, PEG-4000 (20 g/l), begint bij een stroomsnelheid van 1 ml/min. De darmstroom en het basale ileale monster zullen gedurende 30 minuten worden verzameld. Er zal een basaal plasmamonster worden bemonsterd.

Vervolgens drinken de vrijwilligers op t=0 de proefmaaltijd. Tot t=8u wordt de darminhoud continu verzameld door aspiratie en elke 30 minuten samengevoegd. Er wordt elke 30 minuten bloed afgenomen gedurende 4 uur en daarna elk uur. De urine wordt gedurende 8 uur elke 2 uur verzameld.

Afmetingen:

In de ilel-digesta:

PEG-4000 via turbidimetrische methode, totale N- en 15N-verrijking door EA-IRMS, aminozuurconcentraties door UPLC (na zure hydrolyse HCl 6N bij 110°C gedurende 24 uur), 15N-aminozuurverrijking door GC-c-IRMS (na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering), 2H aminozuurverrijking door GC-c-IRMS, microbioomanalyse (DNA-sequencing), peptideanalyse (LC-MS).

In het plasma:

Glucose, ureum (colorimetrische methoden), insuline (ELISA), aminozuurconcentraties (UPLC), 15N-verrijking in plasma-eiwit, ureum en vrije aminozuren (EA-IRMS, na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering).

In de urine:

Ureum (colorimetrische methode) en 15N ureum (EA-IRMS, na zuivering op kationenuitwisselingshars en derivatisering).

Belangrijkste uitkomsten zijn:

Werkelijke ileale verteerbaarheid van eiwitten en aminozuren (verteringsverliezen), postprandiale deaminatie (metabolische verliezen), netto postprandiale eiwitgebruik