Proteinkvaliteten til Fava-bønne- og honningchlorella hos mennesker (Giant Leaps)

Målet er å bestemme den ernæringsmessige kvaliteten til protein fra honningchlorella og fababønnekjøttanaloger hos friske mennesker, spesielt når det gjelder protein- og aminosyrefordøyelighet samt nitrogenretensjon. Ileal fordøyelighet bestemmes i ileal digesta oppsamlet postprandialt med en naso-ileal tube. Proteinkildene er iboende merket i 15N for å spore diettnitrogen og aminosyrer i prøvene.

Etiske og regulatoriske aspekter:

Protokollen er godkjent av den etiske komiteen og autorisert det franske byrået for narkotika og helse. Håndteringen av personopplysninger vil være i samsvar med forskriften om beskyttelse av personopplysninger («forordning nr. 2018-493 du 20. juni 2018»).

Måltid:

Måltidet vil bestå av enten en drink som inneholder 40 g honningchlorella eller et blandet måltid med 80 g kjøttanalog, for å gi 20 g protein. Sensoriske tester vil bli realisert for å optimalisere de organoleptiske egenskapene til måltidet.

Frivillige:

Seksten emner vil bli inkludert i studien. Etterforskerne planlegger å rekruttere rundt 40 frivillige for å imøtekomme de vanlige 60 % frafallene.

Fire dager før forsøket vil de frivillige følge en standard diett tilpasset kroppsvekten for å kontrollere proteininntaket (1,3 g protein/kg kroppsvekt).

De frivillige vil ankomme Human Nutrition Research Center ved Avicenne Hospital om morgenen før dagen for eksperimentet. De vil være utstyrt med et tarmrør med dobbel lumen som får bevege seg gjennom tarmkanalen i 24 timer. En av lumen er radiougjennomsiktig og tjener til å perfuse en ikke-absorberbar maker i tarmen (langsom markørmetode). Det andre lumenet er dedikert til kontinuerlig aspirasjon av avløpene, 15 cm under perfusjonsstedet. Målingen av den ikke-absorberbare markøren i avløpet gjør det mulig å bestemme strømningshastigheten for avløpet.

Kvelden før forsøksdagen vil de innta 3 orale doser deuterert vann 99 % for å nå 5g/kg totalt kroppsvann, for å merke de intestinale endogene proteinene.

På eksperimentdagen vil posisjonen til røret bli kontrollert ved hjelp av radiografi for å bekrefte plasseringen ved terminal ileum. Et kateter vil bli satt inn i underarmsvenen for blodprøvetaking. Perfusjonen av den ikke-absorberbare markøren, PEG-4000 (20g/l), starter med en strømningshastighet på 1ml/min. Tarmstrømmen og den basale ileale prøven vil bli samlet i løpet av 30 min. Basal plasmaprøve vil bli tatt.

Deretter, ved t=0, vil de frivillige drikke testmåltidet. Inntil t=8t vil tarminnholdet kontinuerlig samles opp ved aspirasjon og samles hvert 30. minutt. Blodprøver vil bli tatt hvert 30. minutt i løpet av 4 timer og deretter hver time. Urinen vil bli samlet hver 2. time i 8 timer.

Målinger:

I ilel digesta:

PEG-4000 ved turbidimetrisk metode, total N- og 15N-anrikning med EA-IRMS, aminosyrekonsentrasjoner ved UPLC (etter syrehydrolyse HCl 6N ved 110°C i 24 timer), 15N aminosyreanrikning ved GC-c-IRMS (etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering), 2H aminosyreanriking ved GC-c-IRMS, mikrobiomanalyse (DNA-sekvensering), peptidanalyse (LC-MS).

I plasma:

Glukose, urea (kolorimetriske metoder), insulin (ELISA), aminosyrekonsentrasjoner (UPLC), 15N anrikning i plasmaprotein, urea og frie aminosyrer (EA-IRMS, etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering).

I urinen:

Urea (kolorimetrisk metode) og 15N urea (EA-IRMS, etter rensing på kationbytterharpiks og derivatisering).

Hovedresultatene er:

Virkelig ileal fordøyelighet av protein og aminosyrer (tap fordøyelse), postprandial deaminering (metabolske tap), netto postprandial proteinutnyttelse