Proteinqualität von Ackerbohnen und Honigchlorella beim Menschen (Giant Leaps)

Ziel ist es, die Nährwertqualität von Protein aus Honig-Chlorella und Ackerbohnenfleischanalogon bei gesunden Menschen zu bestimmen, insbesondere im Hinblick auf die Protein- und Aminosäureverdaulichkeit sowie die Stickstoffretention. Die Ileumverdaulichkeit wird anhand des Ileumdiges bestimmt, das postprandial mit einem Naso-Ileum-Röhrchen entnommen wird. Die Proteinquellen sind intrinsisch mit 15N markiert, um den Stickstoff- und Aminosäuregehalt der Nahrung in den Proben zu verfolgen.

Ethische und regulatorische Aspekte:

Das Protokoll wurde von der Ethikkommission genehmigt und von der französischen Arzneimittel- und Gesundheitsbehörde genehmigt. Die Verwaltung personenbezogener Daten erfolgt im Einklang mit der Verordnung zum Schutz personenbezogener Daten („Verordnung Nr. 2018-493 vom 20. Juni 2018“).

Mahlzeit:

Die Mahlzeit besteht entweder aus einem Getränk mit 40 g Honig-Chlorella oder einer gemischten Mahlzeit mit 80 g Fleischanalogon, um 20 g Protein bereitzustellen. Es werden sensorische Tests durchgeführt, um die organoleptischen Eigenschaften der Mahlzeit zu optimieren.

Freiwillige:

Sechzehn Probanden werden in die Studie einbezogen. Die Ermittler planen, rund 40 Freiwillige zu rekrutieren, um den üblichen 60 % der Studienabbrecher Rechnung zu tragen.

Vier Tage vor dem Experiment befolgen die Freiwilligen eine an ihr Körpergewicht angepasste Standarddiät, um ihre Proteinaufnahme zu kontrollieren (1,3 g Protein/kg Körpergewicht).

Die Freiwilligen werden am Morgen vor dem Tag des Experiments im Human Nutrition Research Center des Avicenne Hospital eintreffen. Sie werden mit einem doppellumigen Darmschlauch ausgestattet, der 24 Stunden lang durch den Darmtrakt wandern kann. Eines der Lumen ist strahlenundurchlässig und dient der Perfusion eines nicht resorbierbaren Stoffes im Darm (langsame Markermethode). Das andere Lumen dient der kontinuierlichen Absaugung der Abflüsse, 15 cm unterhalb der Perfusionsstelle. Die Messung des nicht resorbierbaren Markers im Abwasser ermöglicht die Bestimmung der Abwasserflussrate.

Am Abend vor dem Versuchstag nehmen sie 3 orale Dosen 99 % deuteriertes Wasser ein, um 5 g/kg Gesamtkörperwasser zu erreichen, um die endogenen Darmproteine ​​zu markieren.

Am Tag des Experiments wird die Position des Schlauchs durch Röntgenaufnahmen überprüft, um seine Lage am terminalen Ileum zu verifizieren. Zur Blutentnahme wird ein Katheter in die Unterarmvene eingeführt. Die Perfusion des nicht resorbierbaren Markers PEG-4000 (20 g/l) beginnt mit einer Flussrate von 1 ml/min. Der Darmfluss und die basale Ileumprobe werden 30 Minuten lang gesammelt. Es wird eine Basalplasmaprobe entnommen.

Dann, bei t=0, trinken die Freiwilligen die Testmahlzeit. Bis t=8h wird der Darminhalt kontinuierlich durch Absaugen gesammelt und alle 30 Minuten gepoolt. Die Blutentnahme erfolgt 4 Stunden lang alle 30 Minuten und danach stündlich. Der Urin wird 8 Stunden lang alle 2 Stunden gesammelt.

Messungen:

Im Ilel Digesta:

PEG-4000 durch turbidimetrische Methode, Gesamt-N- und 15N-Anreicherung durch EA-IRMS, Aminosäurekonzentrationen durch UPLC (nach Säurehydrolyse HCl 6N bei 110 °C für 24 Stunden), 15N-Aminosäureanreicherung durch GC-c-IRMS (nach Reinigung am Kationenaustauscherharz und Derivatisierung), 2H-Aminosäureanreicherung durch GC-c-IRMS, Mikrobiomanalyse (DNA-Sequenzierung), Peptidanalyse (LC-MS).

Im Plasma:

Glucose, Harnstoff (kolorimetrische Methoden), Insulin (ELISA), Aminosäurekonzentrationen (UPLC), 15N-Anreicherung in Plasmaprotein, Harnstoff und freien Aminosäuren (EA-IRMS, nach Reinigung auf Kationenaustauscherharz und Derivatisierung).

Im Urin:

Harnstoff (kolorimetrische Methode) und 15 N Harnstoff (EA-IRMS, nach Reinigung auf Kationenaustauscherharz und Derivatisierung).

Die wichtigsten Ergebnisse sind:

Echte ileale Verdaulichkeit von Proteinen und Aminosäuren (Verdauungsverluste), postprandiale Desaminierung (Stoffwechselverluste), postprandiale Nettoproteinverwertung