Fava-pavun ja hunajan Chlorellan proteiinilaatu ihmisillä (Giant Leaps)

Tavoitteena on selvittää hunaja-chlorellasta ja fabapavun lihaanalogista saatavan proteiinin ravitsemuksellista laatua terveillä ihmisillä erityisesti proteiinien ja aminohappojen sulavuuden sekä typenpidätyksen kannalta. Sykkyräsuolen sulavuus määritetään sykkyräsuolen ruuansulatuksessa, joka on kerätty aterian jälkeen nenä-ileaaliputkella. Proteiinilähteet on leimattu luonnostaan ​​15N:llä, jotta voidaan seurata näytteiden ravinnon typpeä ja aminohappoja.

Eettiset ja sääntelylliset näkökohdat:

Protokolla on hyväksytty eettiselle komitealle ja valtuutettu Ranskan huume- ja terveysvirastolle. Henkilötietoja käsitellään henkilötietojen suoja-asetuksen ("asetus nro 2018-493 du 20 juin 2018") mukaisesti.

Ateria:

Ateria koostuu joko juomasta, joka sisältää 40 g hunaja-chlorellaa, tai seka-ateriaa, joka sisältää 80 g lihaanalogia, jolloin saadaan 20 g proteiinia. Aistinvaraiset testit toteutetaan aterian organoleptisten ominaisuuksien optimoimiseksi.

Vapaaehtoiset:

Tutkimukseen otetaan mukaan kuusitoista henkilöä. Tutkijat aikovat värvätä noin 40 vapaaehtoista vastaamaan tavallisiin 60 prosentin keskeyttäneisiin.

Neljä päivää ennen koetta vapaaehtoiset noudattavat normaalia ruokavaliota, joka on mukautettu heidän ruumiinpainoinsa proteiinin saannin kontrolloimiseksi (1,3 g proteiinia/kg ruumiinpainoa).

Vapaaehtoiset saapuvat Avicenne sairaalan ravitsemuskeskukseen koepäivää edeltävänä aamuna. Ne varustetaan kaksoisonteloputkella, jonka annetaan kulkea suolistossa 24 tunnin ajan. Yksi onteloista on läpikuultamaton, ja se toimii imeytymättömän valmistajan perfusoimiseksi suolistossa (hidas merkkimenetelmä). Toinen ontelo on omistettu jatkuvaan jätevesien imemiseen 15 cm perfuusiokohdan alapuolella. Jätevesien imeytymättömän merkkiaineen mittaus mahdollistaa jäteveden virtausnopeuden määrittämisen.

Kokeilupäivää edeltävänä iltana he nauttivat 3 oraalista annosta deuteroitua vettä 99-prosenttisesti saavuttaakseen 5 g/kg kehon kokonaisvettä, mikä merkitsee suoliston endogeeniset proteiinit.

Koepäivänä putken asento tarkistetaan radiografialla sen sijainnin varmistamiseksi sykkyräsuolen päässä. Katetri asetetaan kyynärvarren laskimoon verinäytteitä varten. Imeytymättömän markkerin PEG-4000 (20 g/l) perfuusio alkaa virtausnopeudella 1 ml/min. Suolen virtaus ja sykkyräsuolen tyvinäyte kerätään 30 minuutin ajan. Perusplasmanäyte otetaan näyte.

Sitten, t = 0, vapaaehtoiset juovat testiaterian. Kunnes t = 8 tuntia, suolen sisältöä kerätään jatkuvasti imemällä ja yhdistetään 30 minuutin välein. Verinäytteet otetaan 30 minuutin välein 4 tunnin ajan ja sen jälkeen tunnin välein. Virtsa kerätään 2 tunnin välein 8 tunnin ajan.

Mitat:

Iel digestassa:

PEG-4000 turbidimetrisellä menetelmällä, kokonais-N- ja 15N-rikastus EA-IRMS:llä, aminohappopitoisuudet UPLC:llä (happohydrolyysin jälkeen HCl 6N 110 °C:ssa 24 tuntia), 15 N aminohapporikastus GC-c-IRMS:llä (puhdistuksen jälkeen kationinvaihtohartsi ja derivatisointi), 2H-aminohapporikastus GC-c-IRMS:llä, mikrobiomianalyysi (DNA-sekvensointi), peptidianalyysi (LC-MS).

Plasmassa:

Glukoosi, urea (kolorimetriset menetelmät), insuliini (ELISA), aminohappopitoisuudet (UPLC), 15N-rikastus plasmaproteiinilla, urealla ja vapailla aminohapoilla (EA-IRMS, kationinvaihtohartsilla puhdistuksen ja derivatisoinnin jälkeen).

Virtsassa:

Urea (kolorimetrinen menetelmä) ja 15 N urea (EA-IRMS, kationinvaihtohartsilla puhdistuksen ja derivatisoinnin jälkeen).

Tärkeimmät tulokset ovat:

Proteiinin ja aminohappojen todellinen ileaalinen sulavuus (ruoansulatushäiriöt), aterian jälkeinen deaminaatio (aineenvaihduntahäviöt), aterian jälkeinen proteiinin nettokäyttö