Proteinkvalitet af Fava-bønne- og honningchlorella hos mennesker (Giant Leaps)

Målet er at bestemme den ernæringsmæssige kvalitet af protein fra honning chlorella og faba bønner kødanaloger hos raske mennesker, især hvad angår protein- og aminosyrefordøjelighed samt nitrogenretention. Ileal fordøjelighed bestemmes i ileal digesta opsamlet postprandialt med et naso-ileal rør. Proteinkilderne er iboende mærket i 15N for at spore diætisk nitrogen og aminosyrer i prøverne.

Etiske og regulatoriske aspekter:

Protokollen er blevet godkendt af den etiske komité og godkendt det franske agentur for narkotika og sundhed. Håndteringen af ​​personoplysninger vil være i overensstemmelse med forordningen om beskyttelse af personoplysninger ( "forordning nr. 2018-493 du 20. juni 2018").

Måltid:

Måltidet vil bestå af enten en drink indeholdende 40 g honningchlorella eller et blandet måltid indeholdende 80 g kødanalog for at give 20 g protein. Sensoriske tests vil blive realiseret for at optimere måltidets organoleptiske egenskaber.

Frivillige:

Seksten emner vil blive inkluderet i undersøgelsen. Efterforskerne planlægger at rekruttere omkring 40 frivillige til at imødekomme de sædvanlige 60 % frafald.

Fire dage før forsøget vil de frivillige følge en standarddiæt tilpasset deres kropsvægt for at kontrollere deres proteinindtag (1,3 g protein/kg kropsvægt).

De frivillige vil ankomme til Human Nutrition Research Center på Avicenne Hospital om morgenen før dagen for eksperimentet. De vil blive udstyret med et dobbelt lumen tarmrør, der får lov til at bevæge sig gennem tarmkanalen i 24 timer. Et af lumenerne er radiougennemsigtigt og tjener til at perfundere en ikke-absorberbar maker i tarmen (langsom markørmetode). Det andet lumen er dedikeret til den kontinuerlige aspiration af spildevandet, 15 cm under perfusionsstedet. Målingen af ​​den ikke-absorberbare markør i spildevandet tillader bestemmelse af spildevandsstrømningshastigheden.

Aftenen før forsøgsdagen vil de indtage 3 orale doser deutereret vand 99 % for at nå 5g/kg kropsvand i alt, for at mærke de intestinale endogene proteiner.

På dagen for forsøget vil rørets position blive kontrolleret ved radiografi for at verificere dets placering ved den terminale ileum. Et kateter vil blive indsat i underarmsvenen til blodprøvetagning. Perfusionen af ​​den ikke-absorberbare markør, PEG-4000 (20g/l), starter ved en flowhastighed på 1ml/min. Tarmstrømmen og den basale ileale prøve vil blive opsamlet i løbet af 30 min. Basal plasmaprøve vil blive udtaget.

Derefter, ved t=0, vil de frivillige drikke testmåltidet. Indtil t=8h vil tarmindholdet løbende blive opsamlet ved aspiration og samlet hvert 30. minut. Der tages blodprøver hvert 30. minut i løbet af 4 timer og derefter hver time. Urinen vil blive opsamlet hver anden time i 8 timer.

Mål:

I ilel digesta:

PEG-4000 ved turbidimetrisk metode, total N og 15N berigelse med EA-IRMS, aminosyrekoncentrationer ved UPLC (efter syrehydrolyse HCl 6N ved 110°C i 24 timer), 15N aminosyreberigelse ved GC-c-IRMS (efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering), 2H aminosyreberigelse ved GC-c-IRMS, mikrobiomanalyse (DNA-sekventering), peptidanalyse (LC-MS).

I plasma:

Glukose, urinstof (kolorimetriske metoder), insulin (ELISA), aminosyrekoncentrationer (UPLC), 15N berigelse i plasmaprotein, urinstof og frie aminosyrer (EA-IRMS, efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering).

I urinen:

Urinstof (kolorimetrisk metode) og 15N urinstof (EA-IRMS, efter oprensning på kationbytterharpiks og derivatisering).

Hovedresultater er:

Reel ileal fordøjelighed af protein og aminosyrer (fordøjelsestab), postprandial deaminering (metaboliske tab), netto postprandial proteinudnyttelse