Качество белка бобов фава и медовой хлореллы у человека (Giant Leaps)

Цель состоит в том, чтобы определить питательную ценность белка из меда, хлореллы и аналога мяса конских бобов у здоровых людей, особенно с точки зрения усвояемости белка и аминокислот, а также удержания азота. Перевариваемость подвздошной кишки определяют в дигесте подвздошной кишки, собранном после еды с помощью назо-подвздошной трубки. Источники белка помечены 15N для отслеживания пищевого азота и аминокислот в образцах.

Этические и нормативные аспекты:

Протокол был одобрен Комитетом по этике и авторизован Французским агентством по лекарствам и здоровью. Управление персональными данными будет осуществляться в соответствии с Положением о защите персональных данных («Постановление № 2018-493 от 20 июня 2018 г.»).

Еда:

Еда будет состоять либо из напитка, содержащего 40 г медовой хлореллы, либо из смешанной еды, содержащей 80 г аналога мяса, чтобы обеспечить 20 г белка. Будут проводиться сенсорные тесты для оптимизации органолептических свойств блюда.

Добровольцы:

В исследование будут включены шестнадцать субъектов. Следователи планируют набрать около 40 добровольцев, чтобы учесть обычные 60% отсева.

За четыре дня до эксперимента добровольцы будут соблюдать стандартную диету, адаптированную к их массе тела, чтобы контролировать потребление белка (1,3 г белка на кг массы тела).

Добровольцы прибудут в Исследовательский центр питания человека больницы Авиценны утром накануне дня эксперимента. Они будут оснащены двухпросветной кишечной трубкой, которая позволит продвигаться по кишечному тракту в течение 24 часов. Один из просветов рентгеноконтрастен и служит для перфузии нерассасывающегося продуцента в кишечнике (метод медленных маркеров). Другой просвет предназначен для непрерывной аспирации выделений, на 15 см ниже места перфузии. Измерение неабсорбируемого маркера в сточных водах позволяет определить скорость потока сточных вод.

Вечером накануне дня эксперимента они примут 3 пероральные дозы 99% дейтерированной воды, чтобы достичь общего содержания воды в организме 5 г/кг, чтобы пометить эндогенные белки кишечника.

В день эксперимента положение трубки будет проверено с помощью рентгенографии, чтобы подтвердить ее расположение в терминальном отделе подвздошной кишки. В вену предплечья введут катетер для забора крови. Перфузия нерассасывающегося маркера ПЭГ-4000 (20 г/л) начнется со скоростью потока 1 мл/мин. Кишечный поток и базальный образец подвздошной кишки будут собраны в течение 30 минут. Будет взят образец базальной плазмы.

Затем, в момент t=0, добровольцы выпьют тестовый обед. До момента t=8 часов содержимое кишечника будет непрерывно собираться путем аспирации и объединяться каждые 30 минут. Кровь будут брать каждые 30 минут в течение 4 часов, а затем каждый час. Мочу собирают каждые 2 часа в течение 8 часов.

Размеры:

В «Илель диджесте»:

ПЭГ-4000 турбидиметрическим методом, обогащение общим N и 15N методом EA-IRMS, концентрации аминокислот методом UPLC (после кислотного гидролиза HCl 6N при 110°C в течение 24 часов), обогащение аминокислотами 15N методом GC-c-IRMS (после очистки на катионообменная смола и дериватизация), обогащение аминокислотами 2H с помощью GC-c-IRMS, анализ микробиома (секвенирование ДНК), пептидный анализ (LC-MS).

В плазме:

Глюкоза, мочевина (колориметрические методы), инсулин (ИФА), концентрации аминокислот (UPLC), обогащение 15N белками плазмы, мочевиной и свободными аминокислотами (EA-IRMS, после очистки на катионообменной смоле и дериватизации).

В моче:

Мочевина (колориметрический метод) и 15N мочевина (ЭА-ИРМС, после очистки на катионите и дериватизации).

Основные результаты:

Реальная подвздошная усвояемость белка и аминокислот (потери при пищеварении), постпрандиальное дезаминирование (метаболические потери), чистое постпрандиальное использование белка