チモキノン周囲即時インプラント (Thymoquinone)

即時インプラント埋入は、治療期間の短縮、歯槽骨量の良好な保存、審美性の向上などの利点から、抜歯後の歯の置換法として人気を集めています。 しかし、即時インプラントの成功は、生体骨と負荷をかけるインプラント表面との間の直接的な構造的・機能的結合として定義される最適なオッセオインテグレーションの達成に大きく依存しています。 インプラント表面特性、外科的技術、骨質を含む患者固有の変数などの要因がこのプロセスに影響を与えます。

広範な研究は、成功したオッセオインテグレーションの重要な因子である骨-インプラント接触（BIC）を向上させることを目的としています。 戦略には、インプラント表面形態の改変やバイオ活性剤の適用が含まれ、いずれもBICの改善と長期的なインプラント統合の支援を意図しています。

多くの前臨床および臨床研究は、安定した血液凝固塊の存在下では2mm未満の水平ギャップの再生を記録していますが、インプラント周囲のギャップ距離が2mmを超える場合、この骨欠損を封鎖するために骨移植材を使用すべきであるとしています。

漢方薬は、その有益性、より安全な統合効果、コスト削減、最小限の副作用から、口腔および歯周疾患の治療として研究者の注目を集めています。ナツメグ（Nigella sativa, NS）は「黒種子」として知られ、中東、一部のアジアおよび地中海諸国で生育する植物の花です。

チモキノン（TQ）はNSの主要なバイオ活性成分の一つであり、その抗酸化、抗菌、鎮痛、抗炎症、降圧、抗ヒスタミン、血糖降下、肝保護、抗癌、免疫活性化特性のため、貴重な治療効果を持っています。 TQの抗炎症、抗菌、抗酸化特性を考慮すると、歯周疾患の開始、進行、治療の予防において重要な役割を果たす可能性があります。

NSとその有効成分TQは、高血圧、癌、関節リウマチ、糖尿病、気管支喘息、高血圧、肥満、ベーチェット病、肝障害、その他の代謝性および自己免疫疾患の治療に使用されてきました。 TQはNSの治療効果に寄与していることが明らかにされています。

NSとTQは、齲蝕、根管内薬剤、口腔潰瘍、粘膜炎、創傷治癒、抜歯後骨治癒、口腔癌、歯肉および歯周疾患など、様々な口腔疾患および状態に対して豊富な治療特性を示しました。 歯周疾患関連環境におけるTQの効果と、歯周治療に対する潜在的利益をもたらす作用機序は、いくつかの研究で調査されています。 これには、in vitro研究、in vivo（動物）研究、臨床研究（RCT）が含まれます。

歯周疾患におけるTQの作用機序は、炎症性サイトカイン（IL-1b、IL-6、TNF-α、PGE）の抑制、IL-10の活性化、NOの抑制を通じた抗炎症および抗酸化活性です。 抗菌特性は、細菌耐性の抑制と細菌膜の崩壊を通じてもたらされます。 幹細胞調節効果は、幹細胞遊走の活性化、幹細胞免疫調節、およびこれらの豊富な天然化合物の潜在的再生メカニズムを通じて発揮されます。

様々な研究が、メラトニンやヒアルロン酸ゲル、即時インプラント周囲の局所ビタミンD、シンバスタチンゲルなど、即時インプラント埋入周囲の異なるゲル材料の効果を評価しています。

私たちの知る限り、即時インプラント埋入周囲のギャップ距離の管理におけるTQの効果を評価したヒト研究はありません。 したがって、本研究の目的は、即時インプラント埋入周囲への局所TQゲルの効果を臨床的および放射線学的に評価することでした。

研究目的 主要評価項目：即時インプラント埋入周囲のTQハイドロゲルの効果を臨床的および放射線学的に評価する。

副次評価項目：インプラント周囲の骨移植材のみと比較して、TQハイドロゲルと骨移植材の効果を臨床的および放射線学的に比較する。

。

患者と方法

研究デザイン：

この無作為化比較臨床試験は、44名の患者を対象に実施されます。 全患者は、ミニア大学歯学部の口腔内科、口腔診断学、歯周病学部門の外来診療所から選出されます。

サンプルサイズ計算：

サンプルサイズは、G*Power（バージョン3.1.9.7）を使用して、1つの共変量を調整しながら2群を比較するANCOVA（固定効果、主効果と交互作用を含む）のために計算されました。 効果量f = 0.56（部分）、2群デザイン、有意水準（α）0.05、検出力（1-β）0.95を仮定すると、必要な総サンプルサイズは44名の参加者であり、群あたり22名に分解されます。 このサンプルサイズでは、分母の自由度は41（総N、群数、共変量数：44 - 2 - 1 = 41として計算）となります。 この設定により、共変量を考慮しながら効果を検出する十分な検出力が得られます。

詳細な手順、リスク、期待される結果を含む完全な治療計画が全患者に説明され、研究参加前には完全な署名付き同意が得られます。 本研究は、国際調和会議（ICH）の医薬品の臨床試験の実施の基準（GCP）、ヘルシンキ宣言、およびミニア大学歯学部の研究倫理委員会の規則に準拠します。

研究群と無作為化 本研究は、修復不能な臼歯を置換する44本の即時インプラントを含みます。 患者は、http://www.randomizer.org を使用して等数で2群に無作為に割り当てられます。 群I（対照群）：22本のインプラントが抜歯直後に異種骨移植材とともに埋入されます。

群II（研究群）：22本のインプラントが抜歯直後に、異種骨移植材とTQゲルの併用で埋入されます。

術前フェーズ 臨床検査 各患者について、氏名、年齢、性別、職業、連絡先などの個人データが収集されます。

詳細な全身および歯科既往歴が採取され、インプラント安定性に悪影響を及ぼす可能性のある状態や習慣を持つ患者は除外されます。

口腔衛生状態が評価され、患者は口腔内科・歯周病学部門に紹介され、スケーリングとポリッシングを受けます。 咬合は、適切な配列と接触を確保するために評価されます。

外科的処置と潜在的な合併症（例：出血、疼痛、腫脹、インプラント失敗）が各患者に説明されます。 写真と経過観察用X線は、記録と治癒経過のモニタリングに使用されます。 これらのデータは、各患者が包含基準を満たすことを確認するために収集されます。

TQゲルの調製：

TQを内包したニオソームは、エタノール注入法（Mostafa et al.）を使用して調製されます。 処方は、重量比でそれぞれ90:35:5:10のSpan 60、コレステロール、PEG 4000、TQから構成されます。 代表的なバッチでは、90 mgのSpan 60、35 mgのコレステロール、5 mgのPEG 4000、20 mgのTQが使用されます。 Span 60とコレステロールは、5 mLの無水エタノール（有機相）に溶解し、60-70°Cの水浴中で攪拌しながら穏やかに加熱され、透明な溶液が得られるまで続けられます。 一方、PEG 4000は、10 mLの予熱したリン酸緩衝生理食塩水（PBS、pH 7.4）に溶解され、有機相と同じ温度に維持される水相が調製されます。

エタノール脂質溶液は、連続的な磁気攪拌（800 rpm）の下、温度を60-70°Cに維持しながら、約0.5-1 mL/分の速度で水相にゆっくりと注入されます。 攪拌は、注入完了後さらに20分間継続され、適切なベシクル形成を確保します。 残留エタノールは、減圧下での回転蒸発により、無視できる溶媒が残るまで除去されます。 得られたニオソーム分散液は、水浴式超音波処理器を用いて氷浴中で2分間超音波処理され、粒子サイズを減少させ均一な分布を達成します。 チモキノンは、後挿入アプローチを使用してニオソームに封入されます。 簡単に言えば、TQ（20 mg）を2 mLのエタノールに溶解し、既形成のニオソーム懸濁液に攪拌しながら添加し、37°Cで2時間インキュベートします。

未封入のチモキノンは、4°Cで15000 rpm、60分間の超遠心分離により分離され、回収されたニオソームペレットはPBSに再懸濁されて元の体積に戻されます。 精製されたチモキノンニオソームは、光から保護された状態で4°Cに保存され、さらなる特性評価まで保管されます。

封入効率（EE%）は、検証済みのUV-VIS法を使用して精製後の上清中の遊離チモキノン量を定量することで決定されました。 検出波長は254 nmに設定されます。 EE%は、EE% = [（Wt - Wf）/ Wt] × 100の式で計算されます。ここで、Wtは添加された総チモキノン量、Wfは上清で検出された遊離薬物量です。

調製されたニオソームは、平均粒子サイズ、多分散指数（PDI）、ゼータ電位について、25°Cでの動的光散乱および電気泳動光散乱技術（DLS/ELS）を使用して特性評価されます。 サンプルは測定前にPBSで20-100倍に希釈されます。 各測定は三重複で行われ、結果は平均±標準偏差として表されます。 ニオソームの表面形態は走査型電子顕微鏡（SEM）で観察されます。 希釈したニオソーム分散液の一滴をアルミニウムスタブに置き、真空下で空気乾燥し、金-パラジウムの薄層（約5 nm）をスパッタコーティングし、加速電圧5-15 kVでイメージングされます。

光安定性試験は、ニオソーム系内のTQの光安定性を評価するために実施されます。 遊離薬物とニオソーム分散液のアリコート（各5 mL）を透明ガラス瓶に入れ、25±2°CでUV光に曝露し、薬物含有量について所定の時間間隔で分析が行われます。 残留TQの割合を時間に対してプロットし、ニオソームの光安定性を評価します。

外科的フェーズ：

1. 外科的処置は、厳格な感染管理プロトコルに従って実施されます。 患者は0.1%クロルヘキシジン（Hexitol消毒マウスウォッシュ、Arabian Drug Company (ADCO)、カイロ、エジプト）でうがいをするよう指示され、口周組織はポビドンヨード（ベタジン、Nile Co. for Pharma、カイロ、エジプト）で消毒されます。
2. 局所麻酔は、4%塩酸アルチカインと1:100,000エピネフリン（Artinibsa、Inibsa Dental SLU、スペイン）を使用した浸潤または神経ブロック法により注射されます。
3. 歯槽骨を保存した非外傷性抜歯が行われます。 抜歯窩および残存骨の寸法は、歯周プローブを使用して評価されるほか、抜歯した歯根の幅と長さを測定し、適切なインプラント選択を確保します。 計画されたインプラントサイズとの適合性を確認し、適切な埋入を確保するために測定が行われます。
4. 骨切りドリリングは、標準化されたプロトコルに従い、連続ドリルと十分なトルクおよび速度を用い、十分な灌流下で行われます。
5. 対照群では、インプラント埋入後、インプラント表面と骨切り部位の両方に異種骨移植材が適用されます。

一方、研究群では、TQゲルと混合した異種骨移植材がインプラント周囲に挿入されます。

術後フェーズ：- 術後指示 手術後、患者は詳細な術後ケア指示と処方薬（非ステロイド性抗炎症薬であるカタフラム50 mg錠（ジクロフェナクカリウム）を1日2回4日間、消毒マウスウォッシュであるヘキシトールマウスウォッシュ（塩酸クロルヘキシジン0.12%）を手術翌日から1日2回7日間使用）を受け取ります。

術後評価 臨床的および放射線学的評価を行う検査者は、群の割り当てについて盲検化されます。 経過観察の予約は、術後1週間、3ヶ月、6ヶ月にスケジュールされます。 各訪問時に、以下のパラメータが評価されます：

1. 臨床的評価：

   プロービング深さと出血指数の測定は、ベースライン時および6ヶ月時に記録され、インプラント周囲軟組織の治癒を評価します。 疼痛レベルは、術後1日目、3日目、7日目に視覚的アナログスケール（VAS）を使用して評価されます。

2. 放射線学的評価：

コーンビームCT（CBCT）は、即時インプラント埋入（IIP）前（ベースライン）に撮影され、唇側骨板の厚さを評価し、患者はインプラント埋入6ヶ月後に別のCBCTに曝露され、唇側骨板の厚さの変化を評価します。 骨厚の測定値は、インプラントプラットフォーム（T0）、2mm（T1）、4mm（T2）の3つの異なるレベルで測定され、また歯槽頂骨喪失または辺縁骨喪失も評価されます。 統計解析 データはSAS JMP統計ソフトウェアバージョン17.2を使用して解析および可視化されます。 記述統計は平均±標準偏差として提示されます。 各時点における対照群と研究群のアウトカムを比較するために、独立したStudentのt検定が実施されます。 各時点が分析されます。