Тимохинон вокруг немедленного имплантата (Thymoquinone)

Немедленная установка зубных имплантатов приобрела популярность для замены удалённых зубов благодаря своим преимуществам, включая более короткое время лечения, лучшее сохранение объёма альвеолярной кости и улучшенные эстетические результаты. Однако успех немедленных имплантатов во многом зависит от достижения оптимальной остеоинтеграции, определяемой как прямая структурная и функциональная связь между живой костью и поверхностью имплантата, воспринимающего нагрузку. На этот процесс влияют такие факторы, как свойства поверхности имплантата, хирургические техники и специфические для пациента переменные, включая качество кости.

Обширные исследования были направлены на увеличение контакта кость-имплантат (BIC), ключевого фактора успешной остеоинтеграции. Стратегии включают модификацию морфологии поверхности имплантата и применение биоактивных агентов, оба направлены на улучшение BIC и поддержку долгосрочной интеграции имплантата.

Многие доклинические и клинические исследования задокументировали регенерацию горизонтальных щелей менее 2 мм в присутствии стабильного кровяного сгустка, но когда расстояние периимплантатной щели превышало 2 мм, для закрытия этого костного дефекта следует использовать костный трансплантат.

Травяная медицина привлекла внимание исследователей для лечения заболеваний полости рта и пародонта благодаря своим полезным, более безопасным, комплексным эффектам, сниженной стоимости и минимальным побочным эффектам. Nigella sativa (NS) известна как «чёрный тмин», цветок растения, произрастающего на Ближнем Востоке, в некоторых азиатских и средиземноморских странах.

Тимохинон (TQ) является одним из основных биоактивных компонентов NS, он обладает ценным терапевтическим эффектом благодаря своим антиоксидантным, противомикробным, анальгезирующим, противовоспалительным, антигипертензивным, антигистаминным, гипогликемическим, гепатопротекторным, антиканцерогенным и иммуностимулирующим свойствам. Учитывая противовоспалительные, противомикробные и антиоксидантные характеристики TQ, он может играть значительную роль в предотвращении возникновения, прогрессирования и лечении заболеваний пародонта.

NS и её активный ингредиент TQ использовались для лечения гипертонии, рака, ревматоидного артрита, диабета, бронхиальной астмы, гипертонии, ожирения, болезни Бехчета, повреждения печени и других метаболических и аутоиммунных расстройств. Было обнаружено, что TQ отвечает за терапевтический эффект NS.

NS и TQ продемонстрировали многочисленные терапевтические свойства при различных заболеваниях и состояниях полости рта, таких как кариес, внутриканальное лечение, язвы полости рта, мукозит, заживление ран, заживление кости после экстракции, рак полости рта, заболевания дёсен и пародонта. Влияние TQ на состояния, связанные с заболеваниями пародонта, и их механизмы действия с потенциальной пользой для пародонтальной терапии были исследованы в нескольких исследованиях. К ним относятся исследования in vitro, исследования in vivo (на животных) и клинические исследования (РКИ).

Механизм действия TQ при заболеваниях пародонта заключается в противовоспалительной и антиоксидантной активности путём подавления провоспалительных цитокинов (IL-1b, IL-6, TNF-α, PGE), активации IL-10 и подавления NO. Противобактериальные свойства через подавление бактериальной резистентности и разрушение бактериальных мембран. Модулирующий эффект на стволовые клетки через активацию миграции стволовых клеток и иммуномодуляции стволовых клеток и потенциально регенеративные механизмы этих богатых природных соединений.

Различные исследования оценивали влияние различных гелевых материалов вокруг немедленно установленных имплантатов, таких как гели мелатонина и гиалуроновой кислоты, местного витамина D вокруг немедленного имплантата и геля симвастатина.

Насколько нам известно, не существует исследований на людях, оценивающих влияние TQ на управление расстоянием щели вокруг немедленно установленного имплантата. Поэтому целью настоящего исследования была клиническая и рентгенологическая оценка влияния местного геля TQ вокруг немедленно установленных имплантатов.

Цель исследования Первичный исход: Оценить клиническое и рентгенологическое влияние гидрогеля TQ вокруг немедленно установленного имплантата.

Вторичный исход: Сравнить клиническое и рентгенологическое влияние гидрогеля TQ с костным трансплантатом по сравнению только с костным трансплантатом вокруг имплантата.

.

Пациенты и Методы

Дизайн исследования:

Это рандомизированное контролируемое клиническое исследование будет проведено на 44 пациентах. Все пациенты будут отобраны из клиники амбулаторных пациентов отделения оральной медицины, оральной диагностики и пародонтологии. Факультет стоматологии, Университет Минья.

Расчёт размера выборки:

Размер выборки был рассчитан с использованием G*Power (версия 3.1.9.7) для ANCOVA (фиксированные эффекты, включая основные эффекты и взаимодействия), который сравнивает две группы с поправкой на одну коварианту. Предполагая размер эффекта f = 0,56 (частичный), с дизайном двух групп, уровнем альфа (α) 0,05 и мощностью (1-β) 0,95, требуемый общий размер выборки составляет 44 участника, что разбивается на 22 участника на группу. При таком размере выборки степени свободы знаменателя составили бы 41 (рассчитано как общее N, количество групп, количество ковариант: 44 - 2 - 1 = 41). Эта настройка позволяет иметь достаточную мощность для обнаружения эффекта с учётом коварианты.

Полный план лечения будет объяснён всем пациентам, включая подробные шаги, риски и ожидаемые результаты, и их полное подписанное согласие будет получено до включения в исследование. Исследование будет соответствовать правилам, установленным Международной конференцией по гармонизации руководств по надлежащей клинической практике, Хельсинкской декларацией и комитетом по этике исследований факультета стоматологии Университета Минья.

Группы исследования и рандомизация Исследование будет включать 44 немедленных имплантата, заменяющих невосстанавливаемые задние зубы. Пациенты были случайным образом распределены в равных количествах в две группы с использованием http://www.randomizer.org Группа I (Контрольная): 22 имплантата будут установлены немедленно после удаления зубов с ксенотрансплантатом.

Группа II (Исследовательская): 22 имплантата будут установлены немедленно после удаления зубов, в комбинации с ксенотрансплантатом и гелем TQ.

Предоперационная фаза Клиническое обследование Персональные данные, включая имя, возраст, пол, род занятий и контактную информацию, будут собраны для каждого пациента.

Будет собран подробный медицинский и стоматологический анамнез, чтобы исключить тех, у кого есть состояния или привычки, которые могут негативно повлиять на стабильность имплантата.

Будет оценена гигиена полости рта, и пациенты будут направлены в отделение оральной медицины и пародонтологии для проведения скейлинга и полировки. Будет оценена окклюзия для обеспечения правильного выравнивания и контакта.

Хирургическая процедура и потенциальные осложнения (например, кровотечение, боль, отёк, отказ имплантата) будут объяснены каждому пациенту. Фотографии и контрольные рентгеновские снимки будут использоваться для документирования и мониторинга заживления. Эти данные будут собраны, чтобы убедиться, что каждый пациент соответствует критериям включения.

Приготовление геля TQ:

Ниосомы, нагруженные TQ, будут приготовлены с использованием метода инъекции этанола (Мостафа и др.). Формуляция состояла из Span 60, холестерина, PEG 4000 и TQ в весовом соотношении 90:35:5:10 соответственно. Для репрезентативной партии будут использованы 90 мг Span 60, 35 мг холестерина, 5 мг PEG 4000 и 20 мг TQ. Span 60 и холестерин будут растворены в 5 мл абсолютного этанола (органическая фаза) и осторожно нагреты на водяной бане при 60-70 °C с перемешиванием до получения прозрачного раствора. Тем временем, PEG 4000 будет растворён в 10 мл предварительно нагретого фосфатно-солевого буфера (PBS, pH 7,4) для приготовления водной фазы, которая будет поддерживаться при той же температуре, что и органическая фаза.

Этанольный липидный раствор будет медленно введён в водную фазу со скоростью приблизительно 0,5-1 мл в минуту при непрерывном магнитном перемешивании (800 об/мин), поддерживая температуру при 60-70 °C. Перемешивание будет продолжено в течение дополнительных 20 минут после завершения инъекции для обеспечения правильного формирования везикул. Остаточный этанол затем будет удалён роторным испарением под пониженным давлением до тех пор, пока не останется незначительное количество растворителя. Полученная ниосомная дисперсия затем будет подвергнута ультразвуковой обработке в ледяной бане с использованием ультразвуковой ванны в течение 2 минут для уменьшения размера частиц и достижения равномерного распределения. Тимохинон будет инкапсулирован в ниосомы с использованием подхода пост-инсерции. Вкратце, TQ (20 мг) будет растворён в 2 мл этанола и добавлен в предварительно сформированную ниосомную суспензию при перемешивании и инкубирован в течение 2 часов при 37 °C.

Неинкапсулированный тимохинон будет отделён ультрацентрифугированием при 15000 об/мин в течение 60 минут при 4 °C, и собранный ниосомный осадок будет ресуспендирован в PBS до исходного объёма. Очищенные тимохиноновые ниосомы будут храниться при 4 °C, защищённые от света, до дальнейшей характеризации.

Эффективность инкапсуляции (EE%) определялась путём количественного определения количества свободного тимохинона в супернатанте после очистки с использованием валидированного метода UV-VIS. Длина волны детектирования будет установлена на 254 нм. EE% будет рассчитан с использованием уравнения EE% = [(Wt - Wf) / Wt] × 100, где Wt - общее добавленное количество тимохинона, а Wf - количество свободного препарата, обнаруженного в супернатанте.

Приготовленные ниосомы будут охарактеризованы по среднему размеру частиц, индексу полидисперсности (PDI) и дзета-потенциалу с использованием методов динамического и электрофоретического рассеяния света (DLS/ELS) при 25 °C. Образцы разбавляли в 20-100 раз в PBS перед измерением. Каждое измерение будет выполнено в трёхкратной повторности, и результаты будут выражены как среднее ± стандартное отклонение. Поверхностная морфология ниосом будет исследована с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM). Капля разбавленной ниосомной дисперсии будет помещена на алюминиевый штифт, высушена на воздухе под вакуумом, напылённым покрытием тонким слоем золота-палладия (≈5 нм) и сфотографирована при ускоряющем напряжении 5-15 кВ.

Будет проведено исследование светостойкости для оценки фотостабильности TQ в ниосомной системе. Аликвоты свободного препарата и ниосомной дисперсии (по 5 мл каждая) будут храниться в прозрачных стеклянных флаконах, подвергаемых воздействию УФ-света при 25 ± 2 °C, и анализы будут проводиться в заранее определённые временные интервалы для определения содержания препарата. Процент оставшегося TQ будет построен в зависимости от времени для оценки фотостабильности ниосом.

Хирургическая фаза:

1. Хирургические процедуры будут проводиться в соответствии со строгими протоколами контроля инфекции. Пациентам будет предписано полоскание 0,1% хлоргексидином (антисептический ополаскиватель для полости рта Hexitol, Arabian Drug Company (ADCO), Каир, Египет), а периоральные ткани будут продезинфицированы повидон-йодом (Betadine, Nile Co. for Pharma, Каир, Египет).
2. Местная анестезия будет введена с помощью техники инфильтрации или блокады нерва с использованием 4% гидрохлорида артикаина с 1:100 000 эпинефрином (Artinibsa, Inibsa Dental SLU, Испания).
3. Будут выполнены атравматичные удаления зубов с сохранением альвеолярной кости. Размеры лунки удаления и остаточной кости будут оценены с использованием пародонтального зонда, в дополнение к измерению ширины и длины корня удалённого зуба, чтобы обеспечить соответствующий выбор имплантата. Будут проведены измерения для подтверждения совместимости с запланированным размером имплантата и обеспечения правильной установки.
4. Сверление остеотомии следовало стандартизированному протоколу с использованием последовательных свёрл и адекватного крутящего момента и скорости под обильным орошением.
5. В контрольной группе ксенотрансплантат будет нанесён как на поверхность имплантата, так и на место остеотомии после установки имплантата.

В то время как в исследовательской группе, ксенотрансплантат, смешанный с гелем TQ, будет введён вокруг имплантата.

Послеоперационная фаза:- Послеоперационные инструкции После операции пациенты получат подробные инструкции по послеоперационному уходу и назначенные лекарства, включая таблетки Катафлам 50 мг (Диклофенак калия), нестероидный противовоспалительный препарат, принимаемый дважды в день в течение 4 дней, и ополаскиватель для рта Hexitol (Хлоргексидин HCl 0,12%), антисептический ополаскиватель для рта, используемый дважды в день, начиная со второго дня после операции в течение 7 дней.

Послеоперационная оценка Эксперты, проводящие клинические и рентгенологические оценки, будут ослеплены относительно распределения по группам. Последующие визиты будут запланированы в течение первой недели, а также через 3 месяца и 6 месяцев после операции. Во время каждого визита будут оценены следующие параметры:

1. Клинические оценки:

   Измерения глубины зондирования и индекса кровоточивости будут записаны на исходном уровне и через 6 месяцев для оценки заживления периимплантатных мягких тканей. Уровни боли будут оценены с использованием Визуальной аналоговой шкалы (ВАШ) на 1-й, 3-й и 7-й дни после операции.

2. Рентгенологическая оценка:

Конусно-лучевая компьютерная томография (КЛКТ) будет выполнена (на исходном уровне) перед немедленной установкой имплантата (IIP) для оценки толщины вестибулярной костной пластинки, и пациенты будут подвергнуты ещё одной КЛКТ через 6 месяцев после установки имплантата для оценки изменений толщины вестибулярной костной пластинки. Показания толщины кости будут измерены на трёх разных уровнях: платформа имплантата (T0), 2 мм (T1) и (T2) 4 мм, а также потери костной ткани в области гребня или краевые потери костной ткани. Статистический анализ Данные будут проанализированы и визуализированы с использованием статистического программного обеспечения SAS JMP версии 17.2. Описательная статистика будет представлена как среднее ± стандартное отклонение. Для сравнения исходов между контрольной и исследовательской группами в каждой отдельной временной точке будут выполнены независимые t-тесты Стьюдента. Каждая временная точка будет проанализирована.