Timoquinona Alrededor del Implante Inmediato (Thymoquinone)

La colocación inmediata de implantes dentales ha ganado popularidad para reemplazar dientes extraídos debido a sus ventajas, que incluyen un tiempo de tratamiento más corto, una mejor preservación del volumen del hueso alveolar y resultados estéticos mejorados. Sin embargo, el éxito de los implantes inmediatos depende en gran medida de lograr una osteointegración óptima, definida como la unión estructural y funcional directa entre el hueso vivo y la superficie de un implante de carga. Factores como las propiedades de la superficie del implante, las técnicas quirúrgicas y las variables específicas del paciente, incluida la calidad ósea, influyen en este proceso.

Investigaciones extensas han tenido como objetivo mejorar el contacto hueso-implante (BIC, por sus siglas en inglés), un factor clave para una osteointegración exitosa. Las estrategias incluyen modificar la morfología de la superficie del implante y aplicar agentes bioactivos, ambas destinadas a mejorar el BIC y apoyar la integración a largo plazo del implante.

Muchos estudios preclínicos y clínicos han documentado la regeneración de espacios horizontales menores de 2 mm en presencia de un coágulo sanguíneo estable, pero cuando la distancia del espacio periimplantario era superior a 2 mm, se debería utilizar un injerto óseo para sellar este defecto óseo.

La medicina herbal ha ganado la atención de los investigadores para el tratamiento de enfermedades orales y periodontales debido a sus efectos beneficiosos, más seguros, integrados, costos reducidos y efectos secundarios mínimos. Nigella sativa (NS) es conocida como "semilla negra", una flor de una planta que crece en el Medio Oriente, algunos países asiáticos y mediterráneos.

La timoquinona (TQ) es uno de los principales componentes bioactivos de la NS, tiene un valioso efecto terapéutico debido a sus propiedades antioxidantes, antimicrobianas, analgésicas, antiinflamatorias, antihipertensivas, antihistamínicas, hipoglucemiantes, hepatoprotectoras, anticancerígenas y activadoras del sistema inmunológico. Considerando las características antiinflamatorias, antimicrobianas y antioxidantes de la TQ, puede desempeñar un papel significativo en la prevención del inicio, la progresión y el tratamiento de las enfermedades periodontales.

La NS y su ingrediente activo TQ se han utilizado para el tratamiento de hipertensión, cáncer, artritis reumatoide, diabetes, asma bronquial, hipertensión, obesidad, enfermedad de Behcet, daño hepático y otros trastornos metabólicos y autoinmunes. Se encontró que la TQ es responsable del efecto terapéutico de la NS.

La NS y la TQ mostraron abundantes propiedades terapéuticas en diferentes enfermedades y afecciones orales, como caries dental, medicación intracanal, ulceraciones orales, mucositis, cicatrización de heridas, cicatrización ósea postextracción, cáncer oral, enfermedades gingivales y periodontales. Los efectos de la TQ en entornos asociados con enfermedades periodontales y sus modos de acción con posibles beneficios para la terapia periodontal han sido investigados en varios estudios. Estos incluyen estudios in vitro, estudios in vivo (animales) y estudios clínicos (ECR).

El modo de acción de la TQ en las enfermedades periodontales es la actividad antiinflamatoria y antioxidante mediante la supresión de citocinas inflamatorias (IL-1β, IL-6, TNF-α, PGE), la activación de IL-10 y la supresión de NO. Las propiedades antibacterianas mediante la supresión de la resistencia bacteriana y la desintegración de las membranas bacterianas. Efecto modulador de células madre mediante la activación de la migración de células madre y la inmunomodulación de células madre y potenciales mecanismos regenerativos de estos ricos compuestos naturales.

Diferentes estudios evaluaron el efecto de diferentes materiales de gel alrededor de la colocación inmediata de implantes, como geles de melatonina y ácido hialurónico, vitamina D tópica alrededor del implante inmediato y gel de simvastatina.

Hasta donde sabemos, no existe ningún estudio humano que evalúe el efecto de la TQ en el manejo de la distancia del espacio alrededor de la colocación inmediata de implantes. Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto del gel de TQ tópico alrededor de la colocación de implantes inmediatos tanto clínica como radiográficamente.

Objetivo del estudio Resultado primario: Evaluar el efecto del hidrogel de TQ alrededor de la colocación inmediata de implantes clínica y radiográficamente.

Resultado secundario: Comparar el efecto del hidrogel de TQ con injerto óseo en comparación con solo injerto óseo alrededor del implante clínica y radiográficamente.

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Pacientes y Métodos

Diseño del estudio:

Este ensayo clínico controlado aleatorizado se llevará a cabo en 44 pacientes. Todos los pacientes serán seleccionados de la clínica de pacientes externos del Departamento de Medicina Oral, Diagnóstico Oral y Periodoncia. Facultad de Odontología, Universidad de Minia.

Cálculo del tamaño de la muestra:

El tamaño de la muestra se calculó utilizando G*Power (versión 3.1.9.7) para un ANCOVA (efectos fijos, incluyendo efectos principales e interacciones) que compara dos grupos mientras ajusta por una covariable. Suponiendo un tamaño del efecto de f = 0.56 (parcial), con un diseño de dos grupos, un nivel alfa (α) de 0.05 y una potencia (1-β) de 0.95, el tamaño total de muestra requerido es de 44 participantes, que se desglosa en 22 participantes por grupo. Con este tamaño de muestra, los grados de libertad del denominador serían 41 (calculados como N total, número de grupos, número de covariables: 44 - 2 - 1 = 41). Esta configuración permite una potencia suficiente para detectar un efecto mientras se tiene en cuenta la covariable.

El plan de tratamiento completo se explicará a todos los pacientes, incluyendo pasos detallados, riesgos y resultados esperados, y se obtendrá su consentimiento firmado completo antes de ingresar al estudio. El estudio cumplirá con las normas establecidas por la Conferencia Internacional sobre Armonización de las Buenas Prácticas Clínicas, la Declaración de Helsinki y el comité de ética de investigación de la Facultad de Odontología de la Universidad de Minia.

Grupos de estudio y aleatorización El estudio incluirá 44 implantes inmediatos que reemplazarán dientes posteriores no restaurables. Los pacientes fueron asignados aleatoriamente en números iguales a dos grupos utilizando http://www.randomizer.org Grupo I (Control): 22 implantes se colocarán inmediatamente después de la extracción dental con xenoinjerto.

Grupo II (Estudio): 22 implantes se colocarán inmediatamente después de la extracción dental, combinando xenoinjerto y gel de TQ.

Fase preoperatoria Examen clínico Se recopilarán datos personales, incluidos nombre, edad, género, ocupación e información de contacto, para cada paciente.

Se tomará un historial médico y dental detallado para excluir a aquellos con condiciones o hábitos que podrían afectar negativamente la estabilidad del implante.

Se evaluará la higiene oral y los pacientes serán referidos al Departamento de Medicina Oral y Periodoncia para raspado y pulido. Se evaluará la oclusión para asegurar una alineación y contacto adecuados.

El procedimiento quirúrgico y las posibles complicaciones (por ejemplo, sangrado, dolor, hinchazón, fallo del implante) se explicarán a cada paciente. Se utilizarán fotografías y radiografías de seguimiento para la documentación y el monitoreo de la cicatrización. Estos datos se recopilarán para asegurar que cada paciente cumpla con los criterios de inclusión.

Preparación del gel de TQ:

Los niosomas cargados con TQ se prepararán utilizando el método de inyección de etanol (Mostafa et. al.). La formulación consistió en Span 60, colesterol, PEG 4000 y TQ en una proporción en peso de 90:35:5:10, respectivamente. Para un lote representativo, se utilizarán 90 mg de Span 60, 35 mg de colesterol, 5 mg de PEG 4000 y 20 mg de TQ. El Span 60 y el colesterol se disolverán en 5 mL de etanol absoluto (fase orgánica) y se calentarán suavemente en un baño de agua a 60-70 °C con agitación hasta que se obtenga una solución clara. Mientras tanto, el PEG 4000 se disolverá en 10 mL de solución tampón fosfato (PBS, pH 7.4) precalentada para preparar la fase acuosa, que se mantendrá a la misma temperatura que la fase orgánica.

La solución lipídica etanólica se inyectará lentamente en la fase acuosa a una velocidad de aproximadamente 0.5-1 mL por minuto bajo agitación magnética continua (800 rpm) mientras se mantiene la temperatura a 60-70 °C. La agitación continuará durante 20 minutos adicionales después de que se complete la inyección para asegurar una formación adecuada de vesículas. El etanol residual se eliminará entonces por evaporación rotatoria a presión reducida hasta que quede una cantidad insignificante de solvente. La dispersión niosómica resultante se sonificará luego en un baño de hielo usando un sonicador de baño de agua durante 2 min para reducir el tamaño de partícula y lograr una distribución uniforme. La timoquinona se encapsulará en los niosomas utilizando el enfoque de inserción posterior. Brevemente, la TQ (20 mg) se disolverá en 2 ml de etanol y se agregará a la suspensión niosómica preformada bajo agitación y se incubará durante 2 horas a 37 °C.

La timoquinona no encapsulada se separará por ultracentrifugación a 15000 rpm durante 60 minutos a 4 °C, y el pellet niosómico recolectado se resuspenderá en PBS hasta el volumen original. Los niosomas de timoquinona purificados se almacenarán a 4 °C, protegidos de la luz, hasta su posterior caracterización.

La eficiencia de encapsulación (EE%) se determinó cuantificando la cantidad de timoquinona libre en el sobrenadante después de la purificación utilizando un método UV-VIS validado. La longitud de onda de detección se establecerá en 254 nm. El EE% se calculará usando la ecuación EE% = [(Wt - Wf) / Wt] × 100, donde Wt es la timoquinona total añadida y Wf es la cantidad de fármaco libre detectada en el sobrenadante.

Los niosomas preparados se caracterizarán por su tamaño medio de partícula, índice de polidispersidad (PDI) y potencial zeta utilizando técnicas de dispersión de luz dinámica y electroforética (DLS/ELS) a 25 °C. Las muestras se diluyeron de 20 a 100 veces en PBS antes de la medición. Cada medición se realizará por triplicado, y los resultados se expresarán como media ± DE. La morfología superficial de los niosomas se examinará mediante microscopía electrónica de barrido (SEM). Se colocará una gota de dispersión niosómica diluida en un portaobjetos de aluminio, se secará al aire al vacío, se recubrirá con una capa delgada de oro-paladio (≈5 nm) y se tomarán imágenes a un voltaje de aceleración de 5-15 kV.

Se realizará el estudio de estabilidad a la luz para evaluar la fotostabilidad de la TQ dentro del sistema niosómico. Alícuotas de fármaco libre y dispersión niosómica (5 mL cada una) se almacenarán en viales de vidrio transparente expuestos a luz UV a 25 ± 2 °C, y se realizarán análisis en intervalos de tiempo predeterminados para el contenido de fármaco. El porcentaje de TQ restante se graficará contra el tiempo para evaluar la fotostabilidad de los niosomas.

Fase quirúrgica:

1. Los procedimientos quirúrgicos se llevarán a cabo siguiendo estrictos protocolos de control de infecciones. Se instruirá a los pacientes para que se enjuaguen con clorhexidina al 0.1% (enjuague bucal antiséptico Hexitol, Arabian Drug Company (ADCO), El Cairo, Egipto) y los tejidos peri-orales se desinfectarán con povidona yodada (Betadine, Nile Co. for Pharma, El Cairo, Egipto).
2. Se inyectará anestesia local mediante la técnica de infiltración o bloqueo nervioso usando clorhidrato de articaína al 4% con epinefrina 1:100,000 (Artinibsa, Inibsa Dental SLU, España).
3. Se realizarán extracciones dentales atraumáticas, preservando el hueso alveolar. Las dimensiones del alvéolo de extracción y el hueso residual se evaluarán usando una sonda periodontal, además de medir el ancho y la longitud de la raíz del diente extraído, para asegurar la selección adecuada del implante. Se tomarán medidas para confirmar la compatibilidad con el tamaño planificado del implante y asegurar una colocación adecuada.
4. La perforación de la osteotomía siguió un protocolo estandarizado, utilizando fresas secuenciales y un par y velocidad adecuados bajo irrigación copiosa.
5. En el grupo control, se aplicará xenoinjerto tanto a la superficie del implante como al sitio de osteotomía después de la colocación del implante.

Mientras que en el grupo de estudio, se insertará xenoinjerto mezclado con gel de TQ alrededor del implante.

Fase postquirúrgica:- Instrucciones postquirúrgicas Después de la cirugía, los pacientes recibirán instrucciones detalladas de cuidado postoperatorio y medicamentos recetados, incluyendo tabletas de Cataflam 50 mg (diclofenaco potásico), un fármaco antiinflamatorio no esteroideo tomado dos veces al día durante 4 días, y enjuague bucal Hexitol (clorhexidina HCL 0.12%), un enjuague bucal antiséptico usado dos veces al día comenzando el segundo día después de la cirugía durante 7 días.

Evaluación postoperatoria Los examinadores que realicen las evaluaciones clínicas y radiográficas estarán cegados a las asignaciones de grupo. Se programarán citas de seguimiento durante la primera semana, así como a los 3 meses y 6 meses postoperatoriamente. Durante cada visita, se evaluarán los siguientes parámetros:

1. Evaluaciones Clínicas:

   Se registrarán mediciones de profundidad de sondaje e índice de sangrado al inicio y a los 6 meses para evaluar la cicatrización de los tejidos blandos periimplantarios. Los niveles de dolor se evaluarán utilizando una Escala Visual Analógica (EVA) en el 1º, 3º y 7º día postoperatoriamente.

2. Evaluación Radiográfica:

Se tomará una tomografía computarizada de haz cónico (CBCT) al inicio (antes de la colocación inmediata del implante (IIP)) para evaluar el grosor de la placa ósea labial, y los pacientes serán expuestos a otra CBCT después de 6 meses de la colocación del implante para evaluar los cambios en el grosor de la placa ósea labial. Las lecturas del grosor óseo se medirán en tres niveles diferentes: plataforma del implante (T0), 2 mm (T1) y (T2) 4 mm, y pérdida ósea crestal o pérdida ósea marginal. Análisis estadístico Los datos se analizarán y visualizarán utilizando el software estadístico SAS JMP versión 17.2. Las estadísticas descriptivas se presentarán como media ± desviación estándar. Para comparar los resultados entre los grupos control y de estudio en cada punto de tiempo individual, se realizarán pruebas T de Student independientes. Cada punto de tiempo se analizará.