転移性悪性黒色腫における免疫療法への反応と消化管マイクロバイオーム

この前向き非無作為化臨床試験は、一次治療として免疫チェックポイント阻害薬（PD-1阻害薬およびCTLA-4阻害薬）で治療された転移性悪性黒色腫患者における消化管マイクロバイオームの予後的・予測的価値を評価します。 免疫療法は転移性黒色腫の生存率を改善しましたが、臨床転帰は依然として不均一であり、相当数の患者が免疫関連有害事象、偽進行、または過剰進行を経験します。 反応と毒性を予測するバイオマーカーの同定は、臨床的に重要です。

消化管は微生物とリンパ組織が高濃度に存在し、免疫系とマイクロバイオームは密接に相互作用しています。 消化管マイクロバイオームは、サイトカイン産生とT細胞活性の調節を通じて全身性免疫応答に影響を与えます。 先行研究では、マイクロバイオームの構成と多様性が、免疫チェックポイント阻害薬を受ける患者の全生存期間（OS）、無増悪生存期間（PFS）、および治療反応と関連する可能性が示唆されています。 抗生物質誘発性ディスバイオーシスは免疫療法の有効性低下と関連し、糞便微生物移植はPD-1阻害薬への抵抗性克服の可能性を示しています。

本研究の主要目的は、転移性悪性黒色腫患者における消化管マイクロバイオームの主要構成が、iRECIST基準に基づき評価されたPD-1およびCTLA-4阻害薬への客観的奏効と関連するか否かを判定することです。 主要仮説は、特定のマイクロバイオームプロファイルが治療反応と無増悪生存期間（PFS）と関連するというものです。

副次目的には、マイクロバイオーム構成と免疫関連有害事象、治療中の疾患進行、末梢血免疫細胞集団（CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8比、マクロファージ）との関連性評価を含みます。

2022年3月から2024年3月の間にリュブリャナ腫瘍学研究所で一次治療として免疫チェックポイント阻害薬で治療された合計132名の患者が登録されました。 臨床データは匿名化形式で収集され、性別、年齢、診断日、治療開始時のperformance status、検査値（LDHおよびS100含む）、黒色腫局在、BRAF状態、治療期間、放射線学的反応、免疫関連有害事象を含みます。

標準治療に加えて、参加者は事前定義されたスケジュールに従い研究固有の生体サンプル収集を受けました。 糞便サンプルは治療開始前、12週（±2週間）および28週（±2週間）、疑わしい進行/過剰進行時、免疫関連有害事象発生時に収集されました。 参加者が抗菌薬療法を受けた場合、糞便収集は延期され抗菌薬終了3週間後に実施されました。 サンプルはリュブリャナ大学バイオ工学部で、Illumina 16S/ITS Nextera 2段階PCRおよびMiSeq 2×300技術を用いた16S rRNAアンプリコンシーケンシングにより解析されました。 バイオインフォマティクスおよび統計解析は、UPARSEパイプライン、Silva NR SSUおよびLTP SSUデータベース、Mothurソフトウェアパッケージ、RパッケージPhyloseqを使用して実施されました。

末梢静脈血サンプルは、治療開始前4週間以内、12週（±2週間）および28週（±2週間）、疑わしい進行/過剰進行時、免疫関連有害事象発生時に収集されました。 追加血液サンプルはリュブリャナ腫瘍学研究所細胞診部門でフローサイトメトリーを用いて解析され、CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8比、マクロファージを含む免疫細胞集団が測定されました。 サンプルはFACSCanto 10およびFACSDivaソフトウェアで解析されました。

放射線学的評価は、治療開始前4週間以内、12週（±2週間）および28週（±2週間）にPET/CTまたはCTトリプレット（頭部、胸部、腹部）を用いて実施されました。 追加画像検査は疑わしい進行時または臨床判断に基づいて実施されました。 治療反応はiRECIST基準に従って評価され、完全奏効（CR）、部分奏効（PR）、疾患安定（SD）、または疾患進行（PD）に分類されました。 偽進行は、臨床的悪化を伴わない一時的な放射線学的進行で、その後腫瘍負荷が減少するものと定義されました。