A gasztrointesztinális mikrobiota és a válasz az immunterápiára áttétes malignus melanómában

Ez a prospektív, nem randomizált klinikai vizsgálat a gastrointestinalis mikrobiom prognosztikai és prediktív értékét értékeli első vonalban immunellenőrző pont gátlókkal (PD-1 gátlókkal és CTLA-4 gátlókkal) kezelt, metastatikus malignus melanomás betegekben. Bár az immunterápia javította a túlélést metastatikus melanomában, a klinikai eredmények továbbra is heterogének, és a betegek jelentős része immun-kapcsolt mellékhatásokkal, pszeudoprogresszióval vagy hiperprogresszióval szembesül. A választ és a toxicitást előrejelző biomarkerek azonosítása továbbra is klinikailag fontos.

A gastrointestinalis traktus magas koncentrációban tartalmaz mikroorganizmusokat és lymphoid szövetet, és az immunrendszer és a mikrobiom szoros kölcsönhatásban állnak. A gastrointestinalis mikrobiom a szisztémás immunválaszt befolyásolja citokintermelésen és T-sejt aktivitás szabályozáson keresztül. Korábbi tanulmányok azt sugallják, hogy a mikrobiom összetétele és diverzitása összefüggésben lehet a teljes túléléssel (OS), a progressziómentes túléléssel (PFS) és a kezelési válasszal immunellenőrző pont gátlókat kapó betegekben. Az antibiotikumok által indukált diszbiózis összefüggésbe hozható az immunterápia csökkent hatékonyságával, és a székleti mikrobiota transzplantációnak potenciálja mutatkozott a PD-1 gátlókra való rezisztencia leküzdésében.

A vizsgálat elsődleges célja annak meghatározása, hogy a gastrointestinalis mikrobiom uralkodó összetétele összefüggésben áll-e az objektív válasszal PD-1 és CTLA-4 gátlókra metastatikus malignus melanomás betegekben, iRECIST kritériumok szerint értékelve. Az elsődleges hipotézis, hogy egy specifikus mikrobiom profil összefüggésben áll a kezelési válasszal és a progressziómentes túléléssel (PFS).

Másodlagos célkitűzések közé tartozik a mikrobiom összetétel és az immun-kapcsolt mellékhatások, a kezelés alatti betegségprogresszió, valamint a perifériás vér immunsejt populációk (CD3+, CD4+, CD8+, CD4/CD8 arány és makrofágok) közötti összefüggés értékelése.

Összesen 132, első vonalban immunellenőrző pont gátlókkal kezelt beteget vettek fel a Ljubljanai Onkológiai Intézetben 2022 március és 2024 március között. A klinikai adatokat anonimizált formában gyűjtötték, és magukban foglalják a nemet, életkort, diagnózis dátumát, teljesítményállapotot a kezelés kezdetekor, laboratóriumi paramétereket (beleértve LDH-t és S100-at), melanoma lokalizációját, BRAF státuszt, kezelés időtartamát, radiológiai választ és immun-kapcsolt mellékhatásokat.

A szokásos kezelés mellett a résztvevők előre meghatározott ütemezés szerint vizsgálatspecifikus biológiai mintagyűjtésen estek át. Székletmintákat gyűjtöttek a kezelés megkezdése előtt, a 12. héten (+2 hét) és a 28. héten (+2 hét), gyanús progresszió/hiperprogresszió esetén, valamint immun-kapcsolt mellékhatások bekövetkeztekor. Ha a résztvevők antibiotikum terápiát kaptak, a székletgyűjtést elhalasztották, és azt az antibiotikumok befejezését követő három héttel végezték el. A mintákat a Ljubljanai Egyetem Biotechnológiai Karán elemezték 16S rRNA amplikon szekvenálással Illumina 16S/ITS Nextera kétlépcsős PCR és MiSeq 2x300 technológiával. Bioinformatikai és statisztikai elemzéseket végeztek az UPARSE folyamat, Silva NR SSU és LTP SSU adatbázisok, Mothur szoftvercsomag és az R csomag Phyloseq felhasználásával.

Perifériás vénás vérmintákat gyűjtöttek legfeljebb négy héttel a kezelés megkezdése előtt, a 12. héten (+2 hét) és a 28. héten (+2 hét), gyanús progresszió/hiperprogresszió esetén, valamint immun-kapcsolt mellékhatások bekövetkeztekor. További vérmintákat elemeztek a Ljubljanai Onkológiai Intézet Citológiai Osztályán áramlási citometriával az immunsejt populációk, beleértve CD3+, CD4+, CD8+, CD4/CD8 arányt és makrofágok meghatározására. A mintákat FACSCanto 10 és FACSDiva szoftverrel elemezték.

Radiológiai értékelést végeztek PET/CT vagy CT hármas (fej, mellkas, has) felhasználásával a kezelés megkezdése előtt négy héten belül, valamint a 12. héten (+2 hét) és a 28. héten (+2 hét). További képalkotást végeztek gyanús progresszió esetén vagy klinikai megítélés alapján. A kezelési választ iRECIST kritériumok szerint értékelték, és teljes válasz (CR), részleges válasz (PR), stabil betegség (SD) vagy progresszív betegség (PD) kategóriákba sorolták. A pszeudoprogressziót átmeneti radiológiai progresszióként definiálták klinikai romlás nélkül, amelyet a tumorterhelés későbbi csökkenése követ.