ワグナーグレードII糖尿病性足潰瘍の治癒におけるロイヤラクチン含有ローヤルゼリーの臨床的、細胞的、および分子的効果の評価。 (ROYALACIN)

材料と方法

倫理的考慮事項 本研究は、医薬品の臨床試験の実施に関する基準（GCP）ガイドラインに準拠して実施されました。すべての手順は、XXXXXXXXXXの研究・生命倫理委員会、ヘルシンキ宣言、および一般保健法の倫理基準に従いました。プロトコルは厳密に遵守され、データは厳格な機密性をもって取り扱われ、すべての参加者からインフォームドコンセントを取得しました。

対象基準 足および足首の創傷に対して治療を受けている糖尿病の成人患者が対象となりました。適格基準では、4 cm²以上の創傷で、80%以上の肉芽組織を有し、骨関与なく皮膚、脂肪、または靭帯を含み、非感染性（ワグナーグレードII）であることが求められました。追加要件として、2か月以上の経過、0.5以上の足関節上腕血圧比（ABI）、インフォームドコンセント文書への署名、および4週間にわたり週3回の創傷処置への参加が可能であることが含まれました。

実験薬剤とランダム化 FEMSAバイオテクノロジーセンターの研究室では、金ナノ粒子と乳化剤を含む20本（50 ml）のチューブを製造しました。10本は0.2 g/Lのロイヤラクチンで調製され、他の10本はペプチドを含まない対照として使用されました。研究室ではチューブをランダム化、番号付け、ペアリングし、ペアでの適用のためのリストを提供しました。

治療プロトコル 標準化された創傷処置は、XXXXXの慢性創傷・糖尿病足・高気圧酸素治療センターで、4週間にわたり週3回実施されました。各創傷は最初に滅菌水で洗浄し、滅菌ガーゼで乾燥させました。次に、創傷を皮膚に黒インクで分割（または分割を再マーキング）し、Hypafix（BSN medical GmbH, ESSITY）の0.5 cmストリップを適用しました。病変周囲皮膚に円形ラベルを貼り、チューブ番号（下部）、患者ID（右上）、創傷処置番号（左上）を識別しました。

標準写真を撮影しました（Camera+ App、iPhone 15 Pro Max）。0.12%クロルヘキシジン（Clorhexi-Clean®、PISA）で湿らせた滅菌ガーゼで3回優しくデブリードメントを行いました。両側に2%ケタンセリンゲル（Sufrexal®、Janssen）を適用し、その後、各指定創傷部分に対応するゲル（ロイヤラクチンまたはプラセボ）を適用しました。最後に、カルボキシメチルセルロースナトリウムハイドロファイバーおよび再生セルロースファイバー（Aquacell extra®、Convatec）の一次ドレッシングを適用し、二次粘着縁ガーゼドレッシング（Border gauze®、Medline）で保護しました。

データ収集と組織学的分析 最初と最後の創傷処置（セッション1および13）中に、各側の面積をcm²で測定するために写真を撮影しました（IMITO measure App、iPhone 15 Pro Max）。さらに、各側の遠位縁から肉芽組織の3 mmパンチ生検を採取しました。

生検サンプルは、切片化、標識化され、ヘマトキシリン・エオジン（H&E）、マッソン三色染色、および以下の発現に対する免疫組織化学（IHC）を用いて染色されました：

• CD31（Roche）
• 血管内皮増殖因子（VEGF）（Biocare）
• 上皮成長因子受容体（EGFR）（Cell Marque）。

統計分析と評価 セッション1および13の結果を評価しました。創傷サイズはcm²で記録しました。上皮化、多形核好中球（PMN）、線維芽細胞、血管新生、およびコラーゲンは、創傷評価のための半定量的組織学的スケールに従ってスコアリングされました。VEGFおよびEGFRを発現する組織の割合、および発現強度（0から3+でスコアリング）は別々に報告されました（図1 G-I）。データは、ベースライン時と4週間後で、全体コホートとして、および対照群とロイヤラクチン群を比較して比較され、個々の変数も分析されました。