Bewertung der klinischen, zellulären und molekularen Auswirkungen von Royalactin-Königinnenfuttersaft auf die Heilung von Wagner-Grad-II-diabetischen Fußulzera. (ROYALACIN)

Materialien und Methoden

Ethische Erwägungen Die Studie wurde in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Guten Klinischen Praxis (GCP) durchgeführt. Alle Verfahren hielten sich an die ethischen Standards des Forschungs- und Bioethikausschusses des XXXXXXXXXX, der Deklaration von Helsinki und dem Allgemeinen Gesundheitsgesetz. Die Protokolle wurden strikt eingehalten, Daten wurden mit strenger Vertraulichkeit behandelt, und von allen Teilnehmern wurde eine informierte Einwilligung eingeholt.

Einschlusskriterien Eingeschlossen wurden erwachsene Patienten mit Diabetes Mellitus, die wegen Fuß- und Knöchelwunden behandelt wurden. Die Zulassungskriterien erforderten Wunden größer als 4 cm², mit mehr als 80 % Granulationsgewebe, die Haut, Fett oder Bänder ohne Knochenbeteiligung betrafen und nicht infiziert waren (Wagner-Grad II). Zusätzliche Anforderungen umfassten eine Dauer von mehr als 2 Monaten, einen Knöchel-Arm-Index (ABI) größer als 0,5, die Unterzeichnung des Einwilligungsformulars und die Fähigkeit, dreimal pro Woche für 4 Wochen zu Verbändewechseln zu erscheinen.

Experimentelle Wirkstoffe und Randomisierung Das FEMSA Biotechnology Center Labor stellte 20 Röhrchen (50 ml) mit Goldnanopartikeln und Emulgatoren her. Zehn Röhrchen wurden mit Royalactin bei 0,2 g/L formuliert, während die anderen 10 als Kontrolle ohne das Peptid dienten. Das Labor randomisierte, nummerierte und paarte die Röhrchen und stellte eine Liste für die gepaarte Anwendung bereit.

Behandlungsprotokoll Standardisierte Verbändewechsel wurden dreimal pro Woche für 4 Wochen im Chronischen Wunden, Diabetischer Fuß und Hyperbare Medizin Zentrum von XXXXX durchgeführt. Jede Wunde wurde zunächst mit sterilem Wasser gespült und mit steriler Gaze getrocknet. Die Wunde wurde dann (oder die Teilung wurde markiert) mit schwarzer Tinte auf der Haut unterteilt, und ein 0,5 cm breiter Streifen Hypafix (BSN medical GmbH, ESSITY) wurde aufgetragen. Ein kreisförmiges Etikett wurde auf die periläsionale Haut geklebt, um die Röhrchennummer (unten), die Patienten-ID (oben rechts) und die Nummer des Verbändewechsels (oben links) zu identifizieren.

Standardfotografien wurden aufgenommen (Camera+ App, iPhone 15 Pro Max). Der Bereich wurde dreimal sanft mit steriler Gaze, die mit 0,12 % Chlorhexidin (Clorhexi-Clean®, PISA) befeuchtet war, debridiert. Ketanserin 2 % Gel (Sufrexal®, Janssen) wurde auf beide Seiten aufgetragen, gefolgt von der Applikation des entsprechenden Gels (Royalactin oder Placebo) auf jeden zugewiesenen Wundabschnitt. Schließlich wurde ein Primärverband aus Natriumcarboxymethylcellulose-Hydrofaser und regenerierter Cellulosefaser (Aquacell extra®, Convatec) aufgetragen, geschützt durch einen sekundären adhäsiven Randgazeverband (Border gauze®, Medline).

Datenerhebung und histologische Analyse Während des ersten und letzten Verbändewechsels (Sitzungen 1 und 13) wurden Fotografien aufgenommen, um die Fläche jeder Seite in cm² zu messen (IMITO measure App, iPhone 15 Pro Max). Zusätzlich wurden 3 mm Stanzbiopsien des Granulationsgewebes vom distalen Rand jeder Seite entnommen.

Biopsieproben wurden geschnitten, beschriftet und mit Hämatoxylin und Eosin (H&E), Masson-Trichrom und Immunhistochemie (IHC) für die Expression von gefärbt:

• CD31 (Roche)
• Vaskulärer endothelialer Wachstumsfaktor (VEGF) (Biocare)
• Epidermaler Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) (Cell Marque).

Statistische Analyse und Auswertung Ergebnisse aus den Sitzungen 1 und 13 wurden ausgewertet. Die Wundgröße wurde in cm² aufgezeichnet. Epithelialisierung, polymorphkernige Neutrophile (PMN), Fibroblasten, Angiogenese und Kollagen wurden gemäß einer semiquantitativen histologischen Skala zur Wundbeurteilung bewertet. Der Prozentsatz des Gewebes, das VEGF und EGFR exprimiert, sowie die Intensität der Expression (bewertet 0 bis 3+) wurden separat berichtet (Abbildung 1 G-I). Daten wurden sowohl als Gesamtkohorte als auch durch Vergleich der Kontroll- vs. Royalactin-Gruppen zu Beginn und nach vier Wochen verglichen; einzelne Variablen wurden ebenfalls analysiert.