Beoordeling van de klinische, cellulaire en moleculaire effecten van Royalactin-Royal Jelly op de genezing van Wagner graad II diabetische voetzweren. (ROYALACIN)

Materialen en methoden

Ethische overwegingen De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen voor Goede Klinische Praktijk (GCP). Alle procedures volgden de ethische normen van de Onderzoeks- en Bio-ethiekcommissie van de XXXXXXXXXX, de Verklaring van Helsinki en de Algemene Gezondheidswet. Protocollen werden strikt gevolgd, gegevens werden met strikte vertrouwelijkheid behandeld en van alle deelnemers werd geïnformeerde toestemming verkregen.

Inclusiecriteria Volwassen patiënten met Diabetes Mellitus die behandeling ondergingen voor voet- en enkelwonden werden geïncludeerd. Geschiktheidscriteria vereisten wonden groter dan 4 cm², met meer dan 80% granulatieweefsel, waarbij huid, vet of ligamenten betrokken waren zonder botbetrokkenheid, en niet-geïnfecteerd (Wagner Graad II). Aanvullende vereisten waren een duur van meer dan 2 maanden, een enkel-arm index (ABI) groter dan 0,5, het ondertekenen van het geïnformeerde toestemmingsformulier en de mogelijkheid om drie keer per week gedurende 4 weken verbandwisselingen bij te wonen.

Experimentele middelen en randomisatie Het FEMSA Biotechnologie Centrum laboratorium produceerde 20 tubes (50 ml) met goudnanodeeltjes en emulgatoren. Tien tubes werden geformuleerd met Royalactin bij 0,2 g/L, terwijl de andere 10 als controle dienden zonder het peptide. Het laboratorium randomiseerde, nummerde en paarde de tubes, en verstrekte een lijst voor gepaarde toepassing.

Behandelprotocol Gestandaardiseerde verbandwisselingen werden drie keer per week gedurende 4 weken uitgevoerd in het Chronische Wonden, Diabetische Voet en Hyperbare Geneeskunde Centrum van XXXXX. Elke wond werd eerst gespoeld met steriel water en gedroogd met steriel gaas. De wond werd vervolgens verdeeld (of de verdeling werd opnieuw gemarkeerd) met zwarte inkt op de huid, en een 0,5 cm strook Hypafix (BSN medical GmbH, ESSITY) werd aangebracht. Een rond label werd geplaatst op de perilesionale huid om het buisnummer (onder), patiënt-ID (rechtsboven) en verbandwisselnummer (linksboven) te identificeren.

Standaardfoto's werden genomen (Camera+ App, iPhone 15 Pro Max). Het gebied werd voorzichtig drie keer gedebrideerd met steriel gaas bevochtigd met 0,12% Chloorhexidine (Clorhexi-Clean®, PISA). Ketanserine 2% gel (Sufrexal®, Janssen) werd aangebracht op beide zijden, gevolgd door de toepassing van de overeenkomstige gel (Royalactin of placebo) op elk aangewezen wondgedeelte. Ten slotte werd een primair verband van natriumcarboxymethylcellulose hydrofiber en geregenereerde cellulosevezel (Aquacell extra®, Convatec) aangebracht, beschermd door een secundair hechtrand gaasverband (Border gauze®, Medline).

Gegevensverzameling en histologische analyse Tijdens de eerste en laatste verbandwisselingen (sessies 1 en 13) werden foto's genomen om het gebied van elke zijde in cm² te meten (IMITO measure App, iPhone 15 Pro Max). Daarnaast werden 3 mm punchbiopten van het granulatieweefsel verkregen van de distale rand van elke zijde.

Bioptenmonsters werden gesneden, gelabeld en gekleurd met Hematoxyline en Eosine (H&E), Masson's Trichroom en immunohistochemie (IHC) voor de expressie van:

• CD31 (Roche)
• Vasculaire Endotheliale Groeifactor (VEGF) (Biocare)
• Epidermale Groeifactor Receptor (EGFR) (Cell Marque).

Statistische analyse en evaluatie Resultaten van sessies 1 en 13 werden geëvalueerd. Wondgrootte werd geregistreerd in cm². Epithelialisatie, polymorfonucleaire neutrofielen (PMN), fibroblasten, angiogenese en collageen werden gescoord volgens een semi-kwantitatieve histologische schaal voor wondbeoordeling. Het percentage weefsel dat VEGF en EGFR tot expressie bracht, evenals de intensiteit van expressie (gescoord 0 tot 3+), werden afzonderlijk gerapporteerd (Figuur 1 G-I). Gegevens werden vergeleken bij aanvang en na vier weken, zowel als totale cohort als door de Controle vs. Royalactin groepen te vergelijken; individuele variabelen werden ook geanalyseerd.