Evaluación de los efectos clínicos, celulares y moleculares de la Royalactina-Jalea Real en la cicatrización de úlceras del pie diabético de Grado II de Wagner. (ROYALACIN)

Materiales y métodos

Consideraciones éticas El estudio se realizó cumpliendo con las directrices de la Buena Práctica Clínica (BPC). Todos los procedimientos se adhirieron a los estándares éticos del Comité de Investigación y Bioética de XXXXXXXXXX, la Declaración de Helsinki y la Ley General de Salud. Los protocolos se siguieron estrictamente, los datos se manejaron con rigurosa confidencialidad y se obtuvo el consentimiento informado de todos los participantes.

Criterios de inclusión Se incluyeron pacientes adultos con Diabetes Mellitus en tratamiento por heridas en pie y tobillo. Los criterios de elegibilidad requerían heridas mayores de 4 cm², con más del 80% de tejido de granulación, que involucraran piel, grasa o ligamentos sin afectación ósea, y no infectadas (Grado II de Wagner). Requisitos adicionales incluían una duración de más de 2 meses, un índice tobillo-brazo (ITB) superior a 0,5, la firma del formulario de consentimiento informado y la capacidad de asistir a cambios de apósito tres veces por semana durante 4 semanas.

Agentes experimentales y aleatorización El laboratorio del Centro de Biotecnología FEMSA produjo 20 tubos (50 ml) que contenían nanopartículas de oro y emulsionantes. Diez tubos se formularon con Royalactina a 0,2 g/L, mientras que los otros 10 sirvieron como control sin el péptido. El laboratorio aleatorizó, numeró y emparejó los tubos, proporcionando una lista para aplicación emparejada.

Protocolo de tratamiento Se realizaron cambios de apósito estandarizados tres veces por semana durante 4 semanas en el Centro de Heridas Crónicas, Pie Diabético y Medicina Hiperbárica de XXXXX. Cada herida se irrigó primero con agua estéril y se secó con gasa estéril. Luego se dividió (o se remarcó la división) usando tinta negra sobre la piel, y se aplicó una tira de 0,5 cm de Hypafix (BSN medical GmbH, ESSITY). Se colocó una etiqueta circular en la piel perilesional para identificar el número de tubo (abajo), ID del paciente (arriba-derecha) y número de cambio de apósito (arriba-izquierda).

Se tomaron fotografías estándar (App Camera+, iPhone 15 Pro Max). El área se desbridó suavemente tres veces con gasa estéril humedecida con Clorhexidina al 0,12% (Clorhexi-Clean®, PISA). Se aplicó gel de Ketanserina al 2% (Sufrexal®, Janssen) en ambos lados, seguido de la aplicación del gel correspondiente (Royalactina o placebo) a cada sección designada de la herida. Finalmente, se aplicó un apósito primario de hidrofibra de carboximetilcelulosa sódica y fibra de celulosa regenerada (Aquacell extra®, Convatec), protegido por un apósito secundario de gasa adhesiva periférica (Border gauze®, Medline).

Recolección de datos y análisis histológico Durante el primer y último cambio de apósito (sesiones 1 y 13), se tomaron fotografías para medir el área de cada lado en cm² (App IMITO measure, iPhone 15 Pro Max). Adicionalmente, se obtuvieron biopsias por punción de 3 mm del tejido de granulación del borde distal de cada lado.

Las muestras de biopsia se seccionaron, etiquetaron y tiñeron usando Hematoxilina y Eosina (H&E), Tricrómico de Masson e inmunohistoquímica (IHC) para la expresión de:

• CD31 (Roche)
• Factor de Crecimiento Endotelial Vascular (VEGF) (Biocare)
• Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) (Cell Marque).

Análisis estadístico y evaluación Se evaluaron los resultados de las sesiones 1 y 13. El tamaño de la herida se registró en cm². La epitelización, neutrófilos polimorfonucleares (PMN), fibroblastos, angiogénesis y colágeno se puntuaron según una escala histológica semicuantitativa para evaluación de heridas. El porcentaje de tejido que expresa VEGF y EGFR, así como la intensidad de expresión (puntuada de 0 a 3+), se reportaron por separado (Figura 1 G-I). Los datos se compararon al inicio y a las cuatro semanas, tanto como cohorte total como comparando los grupos Control vs. Royalactina; también se analizaron variables individuales.