와그너 등급 II 당뇨병성 발궤양의 치유에 대한 로얄락틴-로얄젤리의 임상적, 세포적 및 분자적 효과 평가 (ROYALACIN)

재료 및 방법

윤리적 고려사항 이 연구는 임상시험 관리기준(GCP) 가이드라인을 준수하여 수행되었습니다. 모든 절차는 XXXXXXXXXX 연구 및 생명윤리위원회의 윤리 기준, 헬싱키 선언 및 일반 건강법을 준수했습니다. 프로토콜은 엄격히 준수되었으며, 데이터는 엄격한 기밀성으로 처리되었고, 모든 참가자로부터 사전 동의서를 획득했습니다.

포함 기준 당뇨병을 앓고 있는 성인 환자 중 발과 발목 상처 치료를 받는 환자가 포함되었습니다. 적격 기준에는 4cm² 이상의 상처, 80% 이상의 육아 조직, 피부, 지방 또는 인대를 포함하지만 골 침범은 없으며, 감염되지 않은 상처(Wagner 등급 II)가 요구되었습니다. 추가 요구 사항으로는 2개월 이상의 지속 기간, 0.5 이상의 발목-상완 지수(ABI), 사전 동의서 서명, 그리고 4주 동안 주 3회 드레싱 교체에 참석할 수 있는 능력이 포함되었습니다.

실험 물질 및 무작위 배정 FEMSA 생명공학 센터 실험실에서 금 나노입자와 유화제를 함유한 20튜브(50ml)를 제조했습니다. 10튜브는 0.2g/L의 로얄락틴으로 제형화되었으며, 다른 10튜브는 펩타이드 없이 대조군으로 사용되었습니다. 실험실은 튜브를 무작위로 배정하고 번호를 매기고 쌍을 이루어, 쌍별 적용을 위한 목록을 제공했습니다.

치료 프로토콜 표준화된 드레싱 교체는 XXXXX의 만성 상처, 당뇨병성 발 및 고압 산소 의학 센터에서 4주 동안 주 3회 수행되었습니다. 각 상처는 먼저 멸균수로 세척하고 멸균 거즈로 건조시켰습니다. 그런 다음 상처를 검정 잉크로 피부에 분할(또는 분할을 표시)하고, 0.5cm 너비의 하이파픽스(BSN medical GmbH, ESSITY) 스트립을 적용했습니다. 상처 주변 피부에 원형 라벨을 부착하여 튜브 번호(하단), 환자 ID(우상단), 드레싱 교체 번호(좌상단)를 식별했습니다.

표준 사진을 촬영했습니다(Camera+ 앱, iPhone 15 Pro Max). 해당 부위는 0.12% 클로르헥시딘(Clorhexi-Clean®, PISA)으로 적신 멸균 거즈로 세 번 부드럽게 괴사 조직을 제거했습니다. 양측에 케탄세린 2% 젤(Sufrexal®, Janssen)을 도포한 후, 각 지정된 상처 구역에 해당하는 젤(로얄락틴 또는 위약)을 적용했습니다. 마지막으로, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스 하이드로파이버 및 재생 셀룰로오스 섬유(Aquacell extra®, Convatec)로 된 1차 드레싱을 적용하고, 2차 접착성 경계 거즈 드레싱(Border gauze®, Medline)으로 보호했습니다.

데이터 수집 및 조직학적 분석 첫 번째 및 마지막 드레싱 교체(1회차 및 13회차) 동안, 각 측면의 면적을 cm² 단위로 측정하기 위해 사진을 촬영했습니다(IMITO measure 앱, iPhone 15 Pro Max). 또한, 각 측면의 원위 가장자리에서 육아 조직의 3mm 펀치 생검을 시행했습니다.

생검 샘플은 Hematoxylin and Eosin(H&E), Masson's Trichrome 및 다음에 대한 면역조직화학염색(IHC)을 사용하여 절편을 만들고, 라벨을 부착하고, 염색했습니다:

• CD31 (Roche)
• 혈관 내피 성장 인자(VEGF) (Biocare)
• 표피 성장 인자 수용체(EGFR) (Cell Marque).

통계 분석 및 평가 1회차 및 13회차의 결과를 평가했습니다. 상처 크기는 cm²로 기록했습니다. 상피화, 다형핵 호중구(PMN), 섬유아세포, 혈관 신생 및 콜라겐은 상처 평가를 위한 반정량적 조직학적 척도에 따라 점수를 매겼습니다. VEGF와 EGFR을 발현하는 조직의 백분율 및 발현 강도(0에서 3+까지 점수화)는 별도로 보고되었습니다(그림 1 G-I). 데이터는 기준 시점과 4주 후에 총 코호트로 비교하고, 대조군 대 로얄락틴 군을 비교하여 분석했으며, 개별 변수도 분석했습니다.