Vurdering av de kliniske, cellulære og molekylære effektene av Royalactin–bikongegele på helingen av Wagner Grad II diabetiske fotulcer. (ROYALACIN)

Materialer og metoder

Etiske hensyn Studiet ble utført i samsvar med retningslinjene for god klinisk praksis (GCP). Alle prosedyrer fulgte de etiske standardene til Forsknings- og bioetikkomiteen ved XXXXXXXXXX, Helsingfors-erklæringen og den generelle helseloven. Protokoller ble strengt fulgt, data ble håndtert med streng konfidensialitet, og informert samtykke ble innhentet fra alle deltakere.

Inklusjonskriterier Voksne pasienter med diabetes mellitus som ble behandlet for sår på fot og ankel ble inkludert. Kvalifikasjonskriteriene krevde sår større enn 4 cm², med mer enn 80% granuleringstvev, som involverte hud, fett eller ligamenter uten beninvolvering, og ikke infiserte (Wagner grad II). Ytterligere krav inkluderte en varighet på mer enn 2 måneder, en ankel-brakial indeks (ABI) større enn 0,5, signering av informert samtykkeskjema, og evne til å delta på forbindingbytte tre ganger per uke i 4 uker.

Eksperimentelle midler og randomisering FEMSA Biotechnology Center-laboratoriet produserte 20 tuber (50 ml) som inneholdt gullnanopartikler og emulgatorer. Ti tuber ble formulert med Royalactin på 0,2 g/L, mens de andre 10 tjente som kontroll uten peptidet. Laboratoriet randomiserte, nummererte og parret tubene, og ga en liste for parvis applikasjon.

Behandlingsprotokoll Standardiserte forbindingbytter ble utført tre ganger per uke i 4 uker ved Kronisk sår, diabetisk fot og hyperbarisk medisinsenter ved XXXXX. Hvert sår ble først irrigert med sterilt vann og tørket med sterilt gaz. Såret ble deretter delt (eller delingen ble merket) ved bruk av svart blekk på huden, og en 0,5 cm stripe Hypafix (BSN medical GmbH, ESSITY) ble påført. Et sirkulært merke ble plassert på perilesjonell hud for å identifisere tubenummer (bunn), pasient-ID (øverst til høyre) og forbindingbytte nummer (øverst til venstre).

Standardfotografier ble tatt (Camera+ App, iPhone 15 Pro Max). Området ble forsiktig debridert tre ganger med sterilt gaz fuktet med 0,12% Klorheksidin (Clorhexi-Clean®, PISA). Ketanserin 2% gel (Sufrexal®, Janssen) ble påført på begge sider, etterfulgt av påføring av den tilsvarende gelen (Royalactin eller placebo) til hver tilordnede sårseksjon. Til slutt ble en primærforsvaring av natriumkarboksymetylcellulose hydrofiber og regenerert cellulosefiber (Aquacell extra®, Convatec) påført, beskyttet av en sekundær adhesiv kantgazforsvaring (Border gauze®, Medline).

Datainnsamling og histologisk analyse Under første og siste forbindingbytte (økt 1 og 13) ble det tatt fotografier for å måle arealet av hver side i cm² (IMITO measure App, iPhone 15 Pro Max). I tillegg ble det tatt 3 mm punch-biopsier av granuleringstvevet fra den distale kanten av hver side.

Biopsiprøver ble snittet, merket og farget ved bruk av Hematoxylin og Eosin (H&E), Massons trikrom, og immunhistokjemi (IHC) for uttrykket av:

• CD31 (Roche)
• Vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF) (Biocare)
• Epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR) (Cell Marque).

Statistisk analyse og evaluering Resultater fra økt 1 og 13 ble evaluert. Sårstørrelse ble registrert i cm². Epitelialisering, polymorfonukleære neutrofile (PMN), fibroblaster, angiogenese og kollagen ble scoret i henhold til en semikvantitativ histologisk skala for sårvurdering. Prosentandelen av tvev som uttrykte VEGF og EGFR, samt intensiteten av uttrykket (scoret 0 til 3+), ble rapportert separat (Figur 1 G-I). Data ble sammenlignet ved baseline og etter fire uker, både som en total kohort og ved å sammenligne Kontroll vs. Royalactin-gruppene; individuelle variabler ble også analysert.