Évaluation des effets cliniques, cellulaires et moléculaires de la Royalactine-Gelée Royale sur la cicatrisation des ulcères du pied diabétique de grade II de Wagner. (ROYALACIN)

Matériels et méthodes

Considérations éthiques L'étude a été menée conformément aux directives de Bonnes Pratiques Cliniques (BPC). Toutes les procédures ont respecté les normes éthiques du Comité de Recherche et de Bioéthique du XXXXXXXXXX, la Déclaration d'Helsinki et la Loi Générale sur la Santé. Les protocoles ont été strictement suivis, les données ont été traitées avec une confidentialité rigoureuse, et un consentement éclairé a été obtenu de tous les participants.

Critères d'inclusion Les patients adultes atteints de diabète sucré sous traitement pour des plaies du pied et de la cheville ont été inclus. Les critères d'éligibilité exigeaient des plaies de plus de 4 cm², avec plus de 80 % de tissu de granulation, impliquant la peau, la graisse ou les ligaments sans atteinte osseuse, et non infectées (Grade II de Wagner). Des exigences supplémentaires comprenaient une durée de plus de 2 mois, un index cheville-bras (ICB) supérieur à 0,5, la signature du formulaire de consentement éclairé, et la capacité à assister aux changements de pansement trois fois par semaine pendant 4 semaines.

Agents expérimentaux et randomisation Le laboratoire du Centre de Biotechnologie FEMSA a produit 20 tubes (50 ml) contenant des nanoparticules d'or et des émulsifiants. Dix tubes ont été formulés avec de la Royalactine à 0,2 g/L, tandis que les 10 autres servaient de témoin sans le peptide. Le laboratoire a randomisé, numéroté et apparié les tubes, fournissant une liste pour l'application appariée.

Protocole de traitement Des changements de pansement standardisés ont été effectués trois fois par semaine pendant 4 semaines au Centre des Plaies Chroniques, du Pied Diabétique et de Médecine Hyperbare de XXXXX. Chaque plaie a d'abord été irriguée avec de l'eau stérile et séchée avec une compresse stérile. La plaie a ensuite été divisée (ou la division a été marquée) à l'encre noire sur la peau, et une bande de 0,5 cm d'Hypafix (BSN medical GmbH, ESSITY) a été appliquée. Une étiquette circulaire a été placée sur la peau péri-lésionnelle pour identifier le numéro du tube (en bas), l'ID du patient (en haut à droite) et le numéro du changement de pansement (en haut à gauche).

Des photographies standards ont été prises (Application Camera+, iPhone 15 Pro Max). La zone a été doucement débridée trois fois avec une compresse stérile humidifiée avec de la Chlorhexidine à 0,12 % (Clorhexi-Clean®, PISA). Du gel de Kétansérine à 2 % (Sufrexal®, Janssen) a été appliqué des deux côtés, suivi de l'application du gel correspondant (Royalactine ou placebo) sur chaque section désignée de la plaie. Enfin, un pansement primaire d'hydrofibre de carboxyméthylcellulose sodique et de fibre de cellulose régénérée (Aquacell extra®, Convatec) a été appliqué, protégé par un pansement secondaire adhésif de gaze à bordure (Border gauze®, Medline).

Collecte de données et analyse histologique Lors des premier et dernier changements de pansement (séances 1 et 13), des photographies ont été prises pour mesurer la surface de chaque côté en cm² (Application IMITO measure, iPhone 15 Pro Max). De plus, des biopsies par emporte-pièce de 3 mm du tissu de granulation ont été prélevées sur le bord distal de chaque côté.

Les échantillons de biopsie ont été sectionnés, étiquetés et colorés à l'Hématoxyline et Éosine (H&E), au Trichrome de Masson, et par immunohistochimie (IHC) pour l'expression de :

• CD31 (Roche)
• Facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) (Biocare)
• Récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) (Cell Marque).

Analyse statistique et évaluation Les résultats des séances 1 et 13 ont été évalués. La taille de la plaie a été enregistrée en cm². L'épithélialisation, les polynucléaires neutrophiles (PMN), les fibroblastes, l'angiogenèse et le collagène ont été notés selon une échelle histologique semi-quantitative pour l'évaluation des plaies. Le pourcentage de tissu exprimant le VEGF et l'EGFR, ainsi que l'intensité de l'expression (notée de 0 à 3+), ont été rapportés séparément (Figure 1 G-I). Les données ont été comparées au départ et à quatre semaines, à la fois pour la cohorte totale et en comparant les groupes Témoin vs Royalactine ; les variables individuelles ont également été analysées.