트랜스젠더 남성의 난소 난포액 내 마이크로 RNA 프로파일

배경:

MicroRNA는 세포에서 유전자 발현을 조절하는 작은 RNA 분자입니다. 마이크로 RNA는 세포막과 상호 작용하고 내용물을 방출하여 세포 간 접촉을 담당하는 엑소좀으로 알려진 소포의 체액에서도 발견됩니다.

난포액은 마이크로 RNA를 비롯한 다양한 물질을 함유하고 있으며, 이는 다양한 난포세포에서 분비되며 난모세포의 발달과 성숙에 중요한 역할을 합니다. 최근 연구에 따르면 난포액에서 발견되는 마이크로 RNA가 난모세포의 성숙, 수정, 배아의 질 및 착상에 중요한 역할을 한다는 것이 밝혀졌습니다.

트랜스젠더리즘은 성별 정체성 및/또는 표현이 출생 시 지정된 성별과 일치하지 않는 사람들을 설명하는 포괄적인 용어입니다. 트랜스젠더 남성은 태어날 때 여성으로 지정된 남성입니다. 트랜스젠더 남성을 위한 의료 개입에는 생식력에 부정적인 영향을 미칠 수 있는 호르몬(테스토스테론) 치료가 포함되며, 생식력 보존은 이러한 잠재적 손상을 극복하기 위한 옵션입니다. 트랜스맨의 생식력 보존 옵션에는 난모세포 및 배아 동결보존이 포함됩니다. 미국 생식 의학 협회(ASRM)는 다음을 권장합니다. 1. 모든 트랜스젠더 환자는 의학적 전환을 시작하기 전에 불임 옵션에 대해 상담을 받습니다. 2. 트랜스젠더는 호르몬 치료를 시작하기 전에 배우자를 보존(냉동 보존)해야 합니다. 3. 이미 교차 성 호르몬 치료를 받고 있는 트랜스젠더는 가임력을 보존하기 전에 최소 3개월 동안 호르몬 치료를 중단해야 합니다. 현재 연구의 목적은 높은 테스토스테론 수치에 노출된 IVF 환자의 난포액의 마이크로 RNA 프로파일을 정상 테스토스테론 수치를 가진 IVF 환자와 비교하고 테스토스테론 노출과 생식 가능성 사이의 가능한 연관성을 조사하는 것입니다.

구체적인 목표:

1. 테스토스테론으로 치료받은 트랜스젠더 환자의 난포액에서 세포외 RNA의 프로필을 특성화합니다.
2. 이들 환자의 난포액 RNA 프로파일과 난모세포의 수 및 질, 수정 가능성 및 배아의 질과의 연관성을 결정합니다.

연구 계획

연구 위치:

IVF 유닛, Lis Maternity Hospital, The Tal Aviv Sourasky Medical Center(TASMC) 생식 의학과, 샌디에고 UCSD(University of California, San Diego) 산모 태아 의학과

예상 기간: 5년

연구 규모: IVF 환자 40명: 테스토스테론 치료 후 남성 트랜스젠더 10명, 테스토스테론 치료 전 남성 트랜스젠더 10명, 내인성 테스토스테론 수치가 높은 다낭성 난소 증후군 환자 10명, 난자 기증자 10명

연구 설계 및 방법

1. 연구에 참여하고자 하는 환자는 연구에 대한 자세한 설명을 듣고 동의서에 서명하게 됩니다.
2. 연구에 포함된 IVF 환자는 호르몬 프로필 및 테스토스테론 수치에 대한 혈액 검사, 전정부 여포 수(AFC)에 대한 초음파 검사를 포함하여 IVF 시술 전에 일상적으로 필요한 모든 검사를 받게 됩니다. 트랜스젠더 환자의 테스토스테론 수치는 테스토스테론 요법을 중단하기 전과 중단한 후에 검사합니다.
3. 환자는 호르몬 요법을 포함한 IVF 프로토콜을 받고 난자 회수가 뒤따를 것입니다.

4. 난모세포 채취 동안 테스토스테론에 노출된 10명의 트랜스젠더 환자와 외부 테스토스테론에 노출되지 않은 30명의 대조군 환자(테스토스테론 치료 전 10명의 트랜스젠더 남성, 10명의 다낭성 난소 증후군 및 높은 내인성 테스토스테론 수치, 10 계란 기증자). 이러한 생체 유체는 임상 IVF 주기 과정에서 얻은 폐기된 물질입니다.

   난포액의 샘플은 인식되지 않는 샘플의 실행 번호와 함께 인코딩되어 특정 환자와의 접촉 가능성을 제거합니다.

5. 난포액은 원심분리되고 상청액은 IVF 장치인 TASMC에서 -80도에서 유지됩니다.
6. 등록된 트랜스젠더 피험자 및 대조군의 임상 IVF 주기에서 얻은 난포액, 환자 연령, BMI, 테스토스테론 사용, IVF 치료 원인, 난모세포 수, 수정된 난모세포의 수와 배아의 품질은 TASMC의 Amir 그룹에서 UCSD의 Laurent 그룹으로 이전됩니다.
7. UCSD에서는 The Norgen 및 The ExoRNeasy 방법(다음에 qRT-PCR 검증)을 사용하여 난포액 샘플에서 세포외 RNA를 분리하고 NEBNext 다중 소형 RNAseq 라이브러리 준비 키트를 사용하여 RNA 시퀀싱 분석을 수행합니다.
8. 결과 RNAseq 데이터를 분석하여 IVF의 원인, 테스토스테론 치료 및 배아 품질을 포함한 임상 변수와 관련된 마이크로 RNA 발현의 변화를 식별합니다.

1-6, 8단계는 TASMC에서 수행됩니다. 7-8단계는 UCSD에서 수행됩니다.

포함 기준:

* 만 18세 이상 환자

제외 기준:

• 18세 미만 환자
• 호르몬 요법과 IVF 주기에 반응하지 않는 환자는 중단되었습니다.