Profil de micro-ARN dans le fluide du follicule ovarien des hommes transgenres

Fond:

Les microARN sont de petites molécules d'ARN qui contrôlent l'expression des gènes dans la cellule. les micro-ARN se trouvent également dans les fluides corporels dans des vésicules appelées exosomes qui interagissent avec les membranes cellulaires, libèrent leur contenu, donc responsables du contact de cellule à cellule.

Le liquide folliculaire ovarien contient diverses substances, dont des micro-ARN, qui sont sécrétées par les différentes cellules folliculaires et jouent un rôle important dans le développement et la maturation de l'ovocyte. Des études récentes ont montré que les micro-ARN présents dans le liquide folliculaire jouent un rôle important dans la maturation de l'ovocyte, la fécondation, la qualité de l'embryon et l'implantation.

Le transgenre est un terme générique décrivant les personnes dont l'identité et/ou l'expression de genre ne correspond pas à leur sexe assigné à la naissance. Un homme transgenre est un homme qui s'est vu attribuer une femme à la naissance. Les interventions médicales pour les hommes transgenres comprennent un traitement hormonal (testostérone) qui peut affecter négativement la fertilité, et la préservation de la fertilité est une option pour surmonter ces dommages potentiels. Les options de préservation de la fertilité pour les hommes trans comprennent la cryoconservation des ovocytes et des embryons. L'American Society for Reproductive Medicine (ASRM) recommande que : 1. Tous les patients transgenres seront conseillés sur les options de fertilité avant d'amorcer la transition médicale. 2. Les transgenres doivent conserver leurs gamètes (cryoconservation) avant de commencer l'hormonothérapie. 3. Les transgenres qui utilisent déjà un traitement hormonal de sexe croisé doivent arrêter le traitement hormonal pendant au moins 3 mois avant la préservation de la fertilité. L'objectif de l'étude actuelle est de comparer le profil de micro ARN du liquide folliculaire des patients FIV exposés à des niveaux élevés de testostérone avec des patients FIV ayant des niveaux normaux de testostérone et d'examiner l'association possible entre l'exposition à la testostérone et le potentiel de fertilité.

Objectifs spécifiques :

1. Caractériser le profil des ARN extracellulaires dans le liquide folliculaire des patients transgenres traités à la testostérone.
2. Déterminer l'association du profil d'ARN du liquide folliculaire chez ces patientes avec le nombre et la qualité des ovocytes, le potentiel de fécondation et la qualité des embryons.

Plan de recherche

Lieu de recherche :

Unité de FIV, Lis Maternity Hospital, The Tal Aviv Sourasky Medical Center (TASMC) Department of Reproductive Medicine, Division of Maternal Fetal Medicine, University of California, San Diego (UCSD)

Durée estimée : 5 ans

Taille de l'étude : 40 patients FIV : 10 hommes transgenres après la thérapie à la testostérone, 10 hommes transgenres avant la thérapie à la testostérone, 10 patients atteints du syndrome des ovaires polykystiques et de taux élevés de testostérone endogène, 10 donneuses d'ovules

Conception et méthodes de recherche

1. Les patients qui ont l'intention de participer à l'étude recevront une explication détaillée de l'étude et signeront un formulaire de consentement.
2. Les patients FIV inclus dans l'étude seront référés à tous les tests systématiquement requis avant la procédure de FIV, y compris les tests sanguins pour le profil hormonal et les niveaux de testostérone, et l'échographie pour le nombre de follicules antraux (AFC). Les niveaux de testostérone chez les patients transgenres seront testés avant et après l'arrêt du traitement à la testostérone.
3. Les patientes recevront un protocole de FIV comprenant une hormonothérapie qui sera suivie du prélèvement d'ovocytes.

4. Au cours du prélèvement d'ovocytes, des fluides folliculaires seront prélevés à partir de cycles de FIV de 10 patientes transgenres exposées à la testostérone et de 30 patientes témoins non exposées à la testostérone externe (10 hommes transgenres avant la thérapie à la testostérone, 10 patientes atteintes du syndrome des ovaires polykystiques et de taux élevés de testostérone endogène, 10 donneuses d'ovules). Ces biofluides seront des matériaux mis au rebut obtenus au cours des cycles cliniques de FIV.

   Les échantillons de liquide folliculaire seront soumis à des échantillons non reconnus avec un numéro courant, codé, éliminant ainsi toute possibilité d'établir un contact avec le patient particulier.

5. Le liquide folliculaire subira une centrifugation et le surnageant sera maintenu à -80 degrés dans l'unité de FIV, TASMC.
6. Liquide folliculaire des cycles cliniques de FIV des sujets transgenres inscrits et des témoins, ainsi que des informations non identifiables sur le patient associées à chaque échantillon de liquide folliculaire et de liquide de culture embryonnaire, y compris l'âge du patient, l'IMC, l'utilisation de testostérone, la cause du traitement de FIV, le nombre d'ovocytes, nombre d'ovocytes fécondés et la qualité des embryons, seront transférés du groupe Amir à TASMC au groupe Laurent à UCSD.
7. À l'UCSD, l'ARN extracellulaire sera isolé des échantillons de liquide folliculaire à l'aide des méthodes The Norgen et The ExoRNeasy (suivi d'une validation qRT-PCR) et soumis à une analyse de séquençage d'ARN à l'aide de plusieurs kits de préparation de bibliothèques NEBNext de petites bibliothèques RNAseq.
8. Les données RNAseq résultantes seront analysées pour identifier les changements dans l'expression des micro-ARN associés aux variables cliniques, y compris la cause de la FIV, le traitement à la testostérone et la qualité de l'embryon.

Les étapes 1 à 6, 8 seront exécutées dans TASMC. Les étapes 7 et 8 seront exécutées dans UCSD.

Critère d'intégration:

* Patients âgés de 18 ans et plus

Critère d'exclusion:

• Patients de moins de 18 ans
• Les patients qui n'ont pas répondu à l'hormonothérapie et le cycle de FIV a été interrompu.