Mikro-RNA-profil i ovariefollikelvæsken hos transkønnede mænd

Baggrund:

MikroRNA'er er små RNA-molekyler, der styrer genekspression i cellen. mikro-RNA'er findes også i kropsvæskerne i vesikler kendt som exosomer, der interagerer med cellulære membraner, frigiver deres indhold og er dermed ansvarlige for celle-til-celle kontakt.

Ovariefollikelvæsken indeholder forskellige stoffer, herunder mikro-RNA'er, som udskilles af de forskellige follikelceller og spiller en vigtig rolle i udviklingen og modningen af ​​oocytten. Nylige undersøgelser har fundet ud af, at mikro-RNA'er, der findes i follikelvæsken, spiller en vigtig rolle i modningen af ​​oocytten, befrugtning, embryokvalitet og implantation.

Transkønnethed er et paraplybegreb, der beskriver mennesker, hvis kønsidentitet og/eller udtryk ikke stemmer overens med deres køn tildelt ved fødslen. En transkønnet mand er en mand, der blev tildelt kvinde ved fødslen. De medicinske indgreb til transkønnede mænd omfatter hormonbehandling (testosteron), der kan påvirke fertiliteten negativt, og bevarelse af fertilitet er en mulighed for at overvinde denne potentielle skade. Fertilitetsbevarelsesmulighederne for transmænd omfatter oocyt- og embryokryokonservering. American Society for Reproductive Medicine (ASRM) anbefaler, at: 1. Alle transkønnede patienter vil blive rådgivet om fertilitetsmulighederne, inden den medicinske overgang påbegyndes. 2. Transkønnede skal bevare kønscellerne (kryokonservering), før de starter hormonbehandling. 3. Transkønnede, der allerede bruger hormonbehandling på tværs af køn, skal stoppe hormonbehandlingen i mindst 3 måneder før fertilitetsbevarelse. Formålet med det aktuelle studie er at sammenligne mikro-RNA-profilen af ​​follikelvæsken hos IVF-patienter udsat for høje testosteronniveauer med IVF-patienter med normale testosteronniveauer og undersøge den mulige sammenhæng mellem testosteroneksponering og fertilitetspotentiale.

Specifikke mål:

1. At karakterisere profilen af ​​ekstracellulære RNA'er i follikelvæsken hos transkønnede patienter behandlet med testosteron.
2. At bestemme sammenhængen mellem follikelvæske-RNA-profilen hos disse patienter med antallet og kvaliteten af ​​oocyt, befrugtningspotentiale og kvaliteten af ​​embryonerne.

Forskningsplan

Forskningssted:

IVF-enhed, Lis Maternity Hospital, Tal Aviv Sourasky Medical Center (TASMC) afdeling for reproduktiv medicin, afdelingen for maternal føtal medicin, University of California, San Diego (UCSD)

Estimeret varighed: 5 år

Studiestørrelse: 40 IVF-patienter: 10 transkønnede mænd efter testosteronbehandling, 10 transkønnede mænd før testosteronbehandling, 10 patienter med polycystisk ovariesyndrom og høje endogene testosteronniveauer, 10 ægdonorer

Forskningsdesign og metoder

1. Patienter, som har til hensigt at deltage i undersøgelsen, vil modtage en detaljeret forklaring af undersøgelsen og vil underskrive en samtykkeerklæring.
2. IVF-patienter, der er inkluderet i undersøgelsen, vil blive henvist til alle tests, der rutinemæssigt kræves forud for IVF-proceduren, inklusive blodprøver for hormonprofil og testosteronniveauer og ultralyd for antral follikeltælling (AFC). Testosteronniveauer hos transkønnede patienter vil blive testet før og efter testosteronbehandling er stoppet.
3. Patienterne vil få en IVF-protokol inklusive hormonbehandling, som vil blive efterfulgt af oocytudtagning.

4. Under oocytudvinding vil follikelvæsker blive opsamlet fra IVF-cyklusser af 10 transkønnede patienter, der er udsat for testosteron og 30 kontrolpatienter, der ikke er udsat for ekstern testosteron (10 transkønnede mænd før testosteronbehandling, 10 patienter med polycystisk ovariesyndrom og høje endogene testosteronniveauer, 10 ægdonorer). Disse biovæsker vil blive kasseret materialer opnået i løbet af kliniske IVF-cyklusser.

   Prøverne af follikulærvæsken vil blive udsat for ikke-genkendte prøver med et løbende nummer, kodet, hvilket eliminerer enhver mulighed for at etablere kontakt med den pågældende patient.

5. Follikulærvæsken vil gennemgå centrifugering, og supernatanten vil blive holdt ved -80 grader i IVF-enheden, TASMC.
6. Follikulær væske fra kliniske IVF-cyklusser fra indskrevne transpersoner og kontroller, sammen med ikke-identificerbare patientoplysninger forbundet med hver follikulær væske og embryokulturvæskeprøve, inklusive patientens alder, BMI, brug af testosteron, årsag til IVF-behandling, antal oocytter, antal befrugtede oocytter og kvaliteten af ​​embryoner, vil blive overført fra Amir-gruppen på TASMC til Laurent-gruppen på UCSD.
7. Ved UCSD vil ekstracellulært RNA blive isoleret fra follikelvæskeprøverne ved hjælp af The Norgen- og The ExoRNeasy-metoderne (efterfulgt af qRT-PCR-validering) og underkastet RNA-sekventeringsanalyse ved hjælp af NEBNext multiple små RNAseq-biblioteksforberedelseskit.
8. De resulterende RNAseq-data vil blive analyseret for at identificere ændringer i mikro-RNA-ekspression forbundet med kliniske variabler, herunder årsagen til IVF, testosteronbehandling og embryokvalitet.

Trin 1-6, 8 udføres i TASMC. Trin 7-8 udføres i UCSD.

Inklusionskriterier:

* Patienter på 18 år og derover

Ekskluderingskriterier:

• Patienter under 18 år
• Patienter, der ikke reagerede på hormonbehandling, og IVF-cyklussen blev afbrudt.