Mikro-RNA-Profil in der Ovarialfollikelflüssigkeit von Transgender-Männern

Hintergrund:

MicroRNAs sind kleine RNA-Moleküle, die die Genexpression in der Zelle steuern. Mikro-RNAs finden sich auch in den Körperflüssigkeiten in Vesikeln, die als Exosomen bekannt sind, die mit Zellmembranen interagieren, ihren Inhalt freisetzen und somit für den Kontakt von Zelle zu Zelle verantwortlich sind.

Die Ovarialfollikelflüssigkeit enthält verschiedene Substanzen, darunter Mikro-RNAs, die von den verschiedenen Follikelzellen ausgeschieden werden und eine wichtige Rolle bei der Entwicklung und Reifung der Eizelle spielen. Jüngste Studien haben herausgefunden, dass in der Follikelflüssigkeit gefundene Mikro-RNAs eine wichtige Rolle bei der Reifung der Eizelle, der Befruchtung, der Embryoqualität und der Implantation spielen.

Transgenderismus ist ein Oberbegriff, der Menschen beschreibt, deren Geschlechtsidentität und/oder -ausdruck nicht mit ihrem bei der Geburt zugewiesenen Geschlecht übereinstimmt. Ein Transgender-Mann ist ein Mann, dem bei der Geburt eine Frau zugewiesen wurde. Die medizinischen Eingriffe für Transgender-Männer umfassen eine Hormonbehandlung (Testosteron), die die Fruchtbarkeit negativ beeinflussen kann, und die Erhaltung der Fruchtbarkeit ist eine Option, um diesen potenziellen Schaden zu überwinden. Die Optionen zur Erhaltung der Fruchtbarkeit für Transmänner umfassen die Kryokonservierung von Eizellen und Embryonen. Die American Society for Reproductive Medicine (ASRM) empfiehlt Folgendes: 1. Alle Transgender-Patientinnen werden vor Beginn der medizinischen Umstellung bezüglich der Fruchtbarkeitsoptionen beraten. 2. Transgender müssen vor Beginn der Hormontherapie Gameten konservieren (Kryokonservierung). 3. Transgender, die bereits eine geschlechtsübergreifende Hormonbehandlung anwenden, müssen die Hormonbehandlung für mindestens 3 Monate absetzen, bevor die Fruchtbarkeit erhalten bleibt. Ziel der aktuellen Studie ist es, das Mikro-RNA-Profil der Follikelflüssigkeit von IVF-Patienten, die hohen Testosteronspiegeln ausgesetzt waren, mit IVF-Patienten mit normalen Testosteronspiegeln zu vergleichen und den möglichen Zusammenhang zwischen Testosteronexposition und Fruchtbarkeitspotenzial zu untersuchen.

Spezifische Ziele:

1. Charakterisierung des Profils extrazellulärer RNAs in der Follikelflüssigkeit von Transgender-Patienten, die mit Testosteron behandelt wurden.
2. Bestimmung der Assoziation des RNA-Profils der Follikelflüssigkeit bei diesen Patientinnen mit der Anzahl und Qualität der Eizelle, dem Befruchtungspotenzial und der Qualität der Embryonen.

Forschungsplan

Forschungsstandort:

IVF-Abteilung, Lis Maternity Hospital, The Tal Aviv Sourasky Medical Center (TASMC) Department of Reproductive Medicine, Division of Maternal Fetal Medicine, University of California, San Diego (UCSD)

Geschätzte Dauer: 5 Jahre

Studiengröße: 40 IVF-Patienten: 10 Transgender-Männer nach Testosterontherapie, 10 Transgender-Männer vor Testosterontherapie, 10 Patienten mit dem polyzystischen Ovarialsyndrom und hohen endogenen Testosteronspiegeln, 10 Eizellspenderinnen

Forschungsdesign und Methoden

1. Patienten, die an der Studie teilnehmen sollen, erhalten eine ausführliche Aufklärung über die Studie und unterschreiben eine Einverständniserklärung.
2. IVF-Patienten, die in die Studie aufgenommen werden, werden zu allen Tests überwiesen, die routinemäßig vor dem IVF-Verfahren erforderlich sind, einschließlich Bluttests für das Hormonprofil und den Testosteronspiegel und Ultraschall für die Antralfollikelzahl (AFC). Der Testosteronspiegel bei Transgender-Patienten wird vor und nach Beendigung der Testosterontherapie getestet.
3. Die Patientinnen erhalten ein IVF-Protokoll, einschließlich einer Hormontherapie, auf die die Eizellenentnahme folgt.

4. Während der Oozytenentnahme werden Follikelflüssigkeiten aus IVF-Zyklen von 10 Transgender-Patienten, die Testosteron ausgesetzt waren, und 30 Kontrollpatienten, die keinem externen Testosteron ausgesetzt waren, entnommen (10 Transgender-Männer vor der Testosterontherapie, 10 Patienten mit dem polyzystischen Ovarialsyndrom und hohen endogenen Testosteronspiegeln, 10 Eizellspender). Bei diesen Bioflüssigkeiten handelt es sich um verworfene Materialien, die im Verlauf klinischer IVF-Zyklen gewonnen werden.

   Die Proben der Follikelflüssigkeit werden bei unerkannten Proben mit einer laufenden Nummer codiert, wodurch eine Kontaktaufnahme mit dem jeweiligen Patienten ausgeschlossen wird.

5. Die Follikelflüssigkeit wird zentrifugiert und der Überstand wird bei -80 Grad in der IVF-Einheit TASMC gehalten.
6. Follikelflüssigkeit aus klinischen IVF-Zyklen von eingeschriebenen Transgender-Probanden und Kontrollpersonen, zusammen mit nicht identifizierbaren Patienteninformationen, die mit jeder Follikelflüssigkeits- und Embryokulturflüssigkeitsprobe verbunden sind, einschließlich Patientenalter, BMI, Verwendung von Testosteron, Ursache der IVF-Behandlung, Anzahl der Eizellen, Anzahl der befruchteten Eizellen und die Qualität der Embryonen, werden von der Amir-Gruppe am TASMC an die Laurent-Gruppe an der UCSD übertragen.
7. An der UCSD wird extrazelluläre RNA aus den Follikelflüssigkeitsproben mit den Methoden The Norgen und The ExoRNeasy (gefolgt von qRT-PCR-Validierung) isoliert und einer RNA-Sequenzanalyse mit NEBNext Multiple Small RNAseq Library Preparation Kits unterzogen.
8. Die resultierenden RNAseq-Daten werden analysiert, um Veränderungen in der Mikro-RNA-Expression zu identifizieren, die mit klinischen Variablen, einschließlich der Ursache der IVF, der Testosteronbehandlung und der Embryoqualität, zusammenhängen.

Die Schritte 1-6, 8 werden in TASMC durchgeführt. Die Schritte 7-8 werden in UCSD durchgeführt.

Einschlusskriterien:

* Patienten ab 18 Jahren

Ausschlusskriterien:

• Patienten unter 18 Jahren
• Patienten, die nicht auf die Hormontherapie ansprachen und der IVF-Zyklus wurde abgebrochen.