Mikro-RNA-profil i ovariefollikkelvæsken til transkjønnede menn

Bakgrunn:

MikroRNA er små RNA-molekyler som kontrollerer genuttrykk i cellen. mikro-RNA finnes også i kroppsvæskene i vesikler kjent som eksosomer som samhandler med cellulære membraner, frigjør innholdet, og dermed ansvarlig for celle-til-celle-kontakt.

Ovariefollikkelvæsken inneholder ulike stoffer, inkludert mikro-RNA, som skilles ut av de ulike follikkelcellene og spiller en viktig rolle i utviklingen og modningen av oocytten. Nyere studier har funnet at mikro-RNA som finnes i follikkelvæsken spiller en viktig rolle i modningen av oocytten, befruktning, embryokvalitet og implantasjon.

Transgenderisme er et paraplybegrep som beskriver mennesker hvis kjønnsidentitet og/eller uttrykk ikke stemmer overens med kjønnet som ble tildelt ved fødselen. En transkjønnet mann er en mann som ble tildelt kvinne ved fødselen. De medisinske intervensjonene for transkjønnede menn inkluderer hormonell (testosteron) behandling som kan påvirke fruktbarheten negativt, og fruktbarhetsbevaring er et alternativ for å overvinne denne potensielle skaden. Alternativene for bevaring av fruktbarhet for transmenn inkluderer kryokonservering av oocytter og embryoer. American Society for Reproductive Medicine (ASRM) anbefaler at: 1. Alle transkjønnede pasienter vil bli veiledet angående fertilitetsalternativene før den medisinske overgangen starter. 2. Transpersoner må bevare kjønnsceller (kryokonservering) før du starter hormonbehandling. 3. Transpersoner som allerede bruker hormonbehandling på tvers av kjønn må stoppe hormonbehandling i minst 3 måneder før fruktbarhetsbevaring. Målet med denne studien er å sammenligne mikro-RNA-profilen til follikkelvæsken til IVF-pasienter utsatt for høye testosteronnivåer med IVF-pasienter med normale testosteronnivåer og undersøke den mulige sammenhengen mellom testosteroneksponering og fruktbarhetspotensial.

Spesifikke mål:

1. Å karakterisere profilen til ekstracellulære RNA i follikkelvæsken til transpersoner behandlet med testosteron.
2. For å bestemme assosiasjonen av follikkelvæske-RNA-profilen hos disse pasientene med antall og kvalitet på oocytter, befruktningspotensial og kvaliteten på embryoene.

Forskningsplan

Forskningssted:

IVF-enhet, Lis Maternity Hospital, The Tal Aviv Sourasky Medical Center (TASMC) Department of Reproductive Medicine, Division of Maternal Fetal Medicine, University of California, San Diego (UCSD)

Estimert varighet: 5 år

Studiestørrelse: 40 IVF-pasienter: 10 transkjønnede menn etter testosteronbehandling, 10 transkjønnede menn før testosteronterapi, 10 pasienter med polycystisk ovariesyndrom og høye endogene testosteronnivåer, 10 eggdonorer

Forskningsdesign og metoder

1. Pasienter som er ment å delta i studien vil motta en detaljert forklaring på studien og signere et samtykkeskjema.
2. IVF-pasienter inkludert i studien vil bli henvist til alle tester som rutinemessig er nødvendige før IVF-prosedyren, inkludert blodprøver for hormonprofil og testosteronnivåer, og ultralyd for antral follikkeltelling (AFC). Testosteronnivået hos transpersoner vil bli testet før og etter at testosteronbehandlingen er stoppet.
3. Pasienter vil få en IVF-protokoll inkludert hormonbehandling som vil bli fulgt av oocytthenting.

4. Under uthenting av oocytter vil follikkelvæsker samles opp fra IVF-sykluser av 10 transkjønnede pasienter eksponert for testosteron og 30 kontrollpasienter som ikke er eksponert for eksternt testosteron (10 transkjønnede menn før testosteronbehandling, 10 pasienter med polycystisk ovariesyndrom og høye endogene testosteronnivåer, 10 eggdonorer). Disse biovæskene vil bli kassert materialer oppnådd i løpet av kliniske IVF-sykluser.

   Prøvene av follikkelvæsken vil bli utsatt for ukjente prøver med et løpende nummer, kodet, og eliminerer dermed enhver mulighet for å etablere kontakt med den aktuelle pasienten.

5. Follikkelvæsken vil gjennomgå sentrifugering og supernatanten vil holdes ved -80 grader i IVF-enheten, TASMC.
6. Follikkelvæske fra kliniske IVF-sykluser fra påmeldte transpersoner og kontroller, sammen med ikke-identifiserbar pasientinformasjon knyttet til hver follikulærvæske og embryokulturvæskeprøve, inkludert pasientens alder, BMI, bruk av testosteron, årsak til IVF-behandling, antall oocytter, antall befruktede oocytter og kvaliteten på embryoer, vil bli overført fra Amir-gruppen ved TASMC til Laurent-gruppen ved UCSD.
7. Ved UCSD vil ekstracellulært RNA isoleres fra follikkelvæskeprøvene ved å bruke The Norgen og The ExoRNeasy-metodene (etterfulgt av qRT-PCR-validering) og underkastes RNA-sekvenseringsanalyse ved bruk av NEBNext flere små RNAseq bibliotek forberedelsessett.
8. De resulterende RNAseq-dataene vil bli analysert for å identifisere endringer i mikro-RNA-ekspresjon assosiert med kliniske variabler, inkludert årsaken til IVF, testosteronbehandling og embryokvalitet.

Trinn 1-6, 8 vil bli utført i TASMC. Trinn 7-8 vil bli utført i UCSD.

Inklusjonskriterier:

* Pasienter 18 år og eldre

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter under 18 år
• Pasienter som ikke responderte på hormonbehandling og IVF-syklusen ble avbrutt.