멕시코의 10개 풍토병 및 비병변 도시에서 뎅기열 및 면역 반응의 혈청학적 연구

뎅기열은 열대 및 아열대 국가에서 역학적으로 중요한 질병입니다. 미주 지역은 전 세계적으로 가장 큰 영향을 받는 지역 중 하나이며 거의 5억 명의 사람들이 4가지 뎅기열 바이러스 혈청형(DENV-1, DENV-2, DENV-3 및 DENV-4) 중 하나로부터 질병에 걸릴 위험이 있습니다. 주로 Aedes aegypty 모기에 물려 전염됩니다. 중증이 아닌 뎅기열의 가능성이 있는 경우, 경고 징후가 있는 뎅기열의 가능성이 있는 경우, 중증 뎅기열의 가능성이 있는 경우의 운영 정의에 따라 역학 감시 대상 질병입니다. 임상적 진단은 발병 5일까지의 발열기 동안 RT-qPCR을 통해 이루어지며 회복기에는 증상 발현일로부터 6-14일 후에 ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) IgM 또는 IgG. 역학 감시 시스템은 질병 설명 및 의사 결정을 위한 필수 도구이지만 질병 부담에 대한 과소 평가된 정보를 제공할 수 있다고 여겨져 왔습니다.

DENV 감염의 약 75%는 경미하거나 무증상이며 가장 흔한 임상 증상은 발열, 두통, 후안와 통증, 근육통, 관절통 및 메스꺼움입니다. 1차 감염은 6개월에서 1년 사이의 기간 동안 평생 동안 혈청형 특이적 면역 반응과 다른 DENV 혈청형에 대한 교차 반응을 일으킬 수 있지만(단기 이종 면역), 이 시간 이후에 생성되는 보호 프로필은 다음과 같이 알려져 있습니다. 단일형 반응인 경우, 중화 활성은 오직 하나의 혈청형에 대한 것입니다. 일반적으로 다른 혈청형에 의해 발생하는 두 번째 감염은 심각한 징후가 발생할 위험 증가와 관련이 있을 수 있습니다. 감염을 해결하는 사람들은 첫 번째 감염(항원 원죄)에서 생성된 것과 유사한 항체 프로필을 개발하지만 첫 번째 감염과 달리 결과적인 이종 교차 체액 면역 반응은 더 오래 지속됩니다. 일반적으로 무증상인 후기 감염이 수행되는 경우 다중 유형 반응 또는 2개 이상의 혈청형에 대한 항체의 프로파일을 강화합니다. 뎅기열 바이러스에 대한 보호 면역은 아직 연구 중이지만 바이러스의 여러 혈청형에 노출되어 발생하는 다중형 프로필은 질병에 대한 보호와 관련이 있는 것으로 간주되므로 백신 후보.

뎅기열 전염의 또 다른 관련 측면은 고풍병 상태가 발생하는 지역은 더 많은 혈청형의 순환에 의해서만 생성될 수 있기 때문에 다형 프로필이 더 자주 발견되어야 하는 지역이라는 것입니다. 한편, 하나의 혈청형 순환이 있는 군집 또는 하나 이상의 혈청형 순환이 시간적으로 광범위하게 분리되는 군집은 비풍토 군집을 구별하는 단일형 프로필을 가질 것입니다.

예방 조치에는 주로 건강 증진 및 매개체 제어와 관련된 조치가 포함됩니다. 하나의 백신이 등록되었으며(CYD-TDV, 황열병 키메라 17D-DENV) 다른 5개가 연구 중입니다. 세계보건기구(WHO)는 질병의 유병률에 대한 공공 정책을 알리고 의사 결정을 안내하는 핵심 도구로 혈청학적 조사를 실시할 것을 촉구했습니다. 이는 CYD-TDV 백신과 TAK-003 백신(DENV-DENV 키메라)이 혈청 음성 및 혈청 양성 피험자 간에 차별화된 행동을 보였고 CYD-TDV 백신이 풍토병 지역 및 지역에 독점 사용되도록 등록되었기 때문에 더 관련이 있습니다. 또한 9세 미만 인구에서 백신 접종 이력과 질병의 중증도 사이에 연관성이 보고되었습니다. 따라서 이 연령대의 체액성 면역반응을 아는 것이 중요하다. 혈청학적 조사는 전 세계적으로 질병의 유병률과 이질성에 대한 임상적, 사회적 및 환경적 요인의 역할에 대한 문서화를 용이하게 했습니다. 풍토병 지역의 뎅기열 유병률은 약 80%인 반면 비풍토병 지역에서는 30% 미만인 것으로 보고되었습니다. 연령도 멕시코에서 뎅기열의 유병률과 관련된 요인으로 기술되었으며, 5-9세 그룹에서 35.7%의 유병률이 보고되었으며, 10-14세 그룹에서 52.2%, 58.9%의 유병률이 보고되었습니다. 15~19세 그룹에서 %, 20~24세 그룹에서 74.1%, 25~29세 그룹에서 80%, 30세 그룹에서 90% 이상이었습니다. 인프라 및 사회적 요인도 뎅기열 풍토병의 결정 요인으로 문서화되었습니다.

멕시코에서 수행된 뎅기 혈청 유병률 연구는 풍토병 인구에 대한 관찰 연구였습니다. 풍토성 및 비풍토성 지역의 혈청 유병률에 대한 세계적 설명을 제공하는 국가 군집 무작위 연구는 단 하나뿐이며 혈청형 특이적 중화 체액 반응은 Amaya-Larios et al, 2014에 의해 평가되지 않았습니다. 따라서 풍토성 및 비풍토성 지역에서 발생하는 체액성 면역 반응 유형에 대한 지식이 부족합니다. 단일형 또는 다중형 프로필이 있는 도시의 일반적인 특성에 대한 지식을 통해 다양한 수준에서 중요한 정보를 제공할 수 있습니다. 제약 회사의 경우 국가 도시의 면역 상태를 알면 백신 후보의 효능과 안전성을 확립하기 위한 임상 연구를 수행할 수 있는 최상의 장소를 설정할 수 있습니다. 가능한 공공 예방 접종 정책을 수립하는 기관의 경우 면역 반응 프로필과 질병 발병률이 알려진 지역의 일반적인 특성을 알고 있으면 발생률만 알려진 지역에서 이 정보를 외삽할 수 있습니다. 국제 과학 커뮤니티의 경우, 제안된 프로젝트의 결과는 뎅기열의 풍토병 전파에 대한 인구 특성과 이 질병의 특징적인 풍토병-전염병 주기와의 관계에 대한 지식에 기여할 것입니다.

연구 질문: 멕시코의 저뎅기 및 고뎅기 유행 지역에서 DENV 혈청형에 의한 체액성 면역 반응의 분포 및 특성은 무엇입니까? 가설: 뎅기열 풍토병이 낮은 지역에서는 뎅기열에 대한 체액 반응이 주로 단형인 반면, 뎅기열 풍토병이 높은 지역에서는 주로 다형입니다.

목표 일반

● 뎅기열 발병률이 낮거나 높은 멕시코 도시에 거주하는 5~35세 사람들의 우세한 유형의 체액성 면역 반응을 특징짓습니다.

특정한

• 연구 모집단에서 DENV에 대한 항체(IgG)의 일반적인 유병률을 추정합니다.
• 연구 모집단에서 DENV-1, DENV-2, DENV-3 및 DENV-4에 대한 중화 항체 역가를 결정합니다.
• 고유성에 따라 도시에서 단형 및 다형 체액 반응 유형의 빈도를 결정합니다.

방법론 연구 설계: 전향적 데이터 수집을 통한 설명적 단면 관찰 연구.

대상 인구: 뎅기열 발병 및 비 발병 도시 지역의 거주 인구.

연구 모집단: 뎅기열 발병률이 높은 지역과 낮은 지역에 거주하는 5~35세 피험자.

포함 및 제외 기준: 적격성으로 아래에 설명됨

샘플 크기 계산: OpenEpi 프로그램 버전 3에서 이전 연구에서 보고된 유병률을 고려하고 일부 도시에서 뎅기열 발병 정도에 대한 정보를 사용할 수 있는 정보가 없는 지역에 대해 추정하여 수행했습니다( 16, 20 -21) 샘플 크기 계산 공식은 다음과 같습니다.

n = [DEFF * Np (1-p)] / [(d2 / Z21-α / 2 * (N-1) + p * (1-p)] 총 2,421 명이 샘플링되어야 합니다. 참가자 선정은 각 연구 위치에 대해 2단계 샘플링(2단계 클러스터 기준)으로 수행됩니다. 첫 번째 단계에서는 각 지역에서 블록(n = 50)이 무작위로 선택되고 이후 두 번째 단계에서는 블록의 북동쪽 모서리에 있는 첫 번째 집부터 시작하여 각 블록 내에서 집이 선택됩니다. 집에서 수락하지 않는 경우 커뮤니티 워커는 선택 기준을 충족하는 가구 중 최소 한 사람이 참여에 동의할 때까지 오른쪽으로 계속 진행합니다.

혈청 유병률 추정을 위한 간접 IgG ELISA: Panbio E-DEN 01 G 제조업체의 지침에 따라 간접 IgG ELISA로 혈청 양성을 평가할 것이며, 특이도는 98%이고 민감도는 100%입니다.

중화항체 역가 혈청형 특이적 : 선정된 도시가 나타내는 체액성 면역의 종류를 정립하기 위하여 용균반의 수를 50%(PRNT50%)로 감소시키는 중화시험을 통하여 중화항체 역가의 측정을 실시하고, Vero 세포 및 각 혈청형에 대한 다음 참조 균주 사용: DENV-1(HAWAI), DENV-2(NEW GUINEA), DENV-3(H-887) 및 DENV-4(H-24).

체액성 면역의 종류는 단일 DENV 혈청형에 대한 항체만 검출되는 경우 단형면역반응과 하나 이상의 단일 DENV 혈청형에 대한 항체가 검출되는 경우 다형면역반응으로 분류된다.

정보 수집 및 관리 : 정보는 표준 형식으로 수집됩니다. 설문 조사는 작성 지침에 따라 면접관(프로젝트 직원)이 작성합니다. 정보는 인쇄된 설문 조사에 캡처되고 이 목적을 위해 설계된 전자 데이터베이스에서 훈련된 데이터 로거에 의해 관리됩니다.

실험실 테스트 결과는 각 참가자에게 할당된 Folio로만 관리되며 결과는 실험실 직원이 Excel®로 만든 데이터베이스에 입력됩니다. 데이터베이스에는 Folio, 결과 날짜 및 결과가 포함됩니다. 설문조사의 명목 정보는 나머지 정보와 분리되어 폴리오 번호로만 개인을 식별하고 신원을 보호합니다.

정성적 변수는 절대빈도와 상대빈도로, 정량적 변수는 각 변수의 분포를 고려하여 중심경향과 산포도를 측정하여 설명한다. DENV에 대한 IgG의 유병률은 전체 연구 모집단뿐만 아니라 각 지역, 연령 그룹 및 성별에 대해 각각 95% 신뢰 구간(95% CI)으로 결정됩니다. 유사하게, 특정 혈청형에 대한 중화 항체의 유병률 및 이러한 동일한 하위 그룹에서의 단일형 및 다중형 반응의 빈도가 결정될 것이다.

윤리적 고려 사항: 이 연구는 자발적으로 참여하는 데 동의한 피험자만 고려되는 최소한의 위험이 있는 조사입니다. 법적 연령에 해당하는 피험자의 경우 자발적인 참여가 인정되는 정보에 입각한 동의서에 서명해야 합니다. 미성년자의 경우 부모 또는 보호자의 사전동의서명을 요구하며, 7세 이상 17세 미만의 경우 사전동의서의 서명을 요구합니다.

데이터 보안 프로세스는 설문조사의 명목 정보를 나머지 정보와 분리하는 것으로 구성되며, 이는 사람들의 신원을 보호하기 위해 공통 식별 키로 식별되는 두 개의 테이블에 저장됩니다.

생물안전 고려사항: 감염성 생물학적 유해 폐기물의 관리는 이 문서에 명시되어 있습니다. 일반적으로 바이러스나 혈액 또는 그 파생물과 접촉한 물질은 5% 차아염소산나트륨 용액으로 30분 동안 염소 처리한 후 빨간 봉투에 넣어 폐기합니다. 바늘은 지역 지침 NOM-087을 준수하는 날카로운 물건 용기에 보관됩니다.