비수술적 치주 치료와 페리오스틴 수치

관찰 전향적 연구는 터키 Hatay의 Hatay Mustafa Kemal University 치과 학부의 치주학과에서 혈청 및 GCF의 비수술적 치주 치료 후 시간 경과에 따른 페리오스틴 변화를 특성화하기 위해 설계되었습니다. 연구 프로토콜은 Hatay Mustafa Kemal University 연구에서 인간 피험자 사용을 위한 윤리 위원회의 승인을 받았습니다(프로토콜 번호: 2019/118). 이 연구는 헬싱키 선언의 원칙에 따라 수행되었으며 CONSORT 지침에 따라 수행되었습니다(Schulz, Altman, & Moher, 2010). 이 연구 프로젝트는 Hatay Mustafa Kemal University Scientific Research Projects Coordinator(19M051)의 재정적 지원을 받았습니다.

개인은 2019년 12월부터 2021년 8월까지 연구에 포함되었습니다. 임상 치주 검사 전에 각 참가자로부터 서면 동의서를 얻었습니다.

연구 인구

48명의 성인 개인이 연구에 등록되었습니다. 참가자들은 치주 건강(PH) 그룹과 치주염(P) 그룹의 각각 24명의 참가자가 있는 2개의 성별 일치 그룹으로 모집되었습니다. P군에 포함된 환자들의 인구통계학적 변수에 따라 PH군 환자들이 포함되었다.

치주 매개변수

치주 임상 매개변수는 보정된 단일 검사자(k =0.95)(저자 AS)에 의해 기록되었습니다. CAL에 대해 심사관 내 합의가 결정되었습니다. 검사자 내 재현성은 피험자 10명을 1시간 간격으로 반복 검사하여 결정하였다. 치주염군에서 비수술적 치주치료 후 1개월, 3개월째 치주진단을 위해 다음과 같은 치주측정치를 이용하여 임상치주측정치를 평가하였다.

측정은 윌리엄스 치주 프로브(Hu-Friedy, Chicago, IL, USA)를 사용하여 수행되었으며 프로빙 포켓 깊이(PPD), 임상 부착 수준(CAL), 플라크 지수(PI)(Silness & Loe, 1964), 치은 지수(GI)(Loe & Silness, 1963) 및 치아당 6개 부위(mesio-buccal, buccal, disto-buccal, mesio-lingual, lingual 및 disto)에서 프로빙 시 출혈률(BOP)(Ainamo & Bay, 1975) -언어) 각 치아에.

치주 질환 및 상태의 진단은 2017 World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions(Caton et al., 2018)에서 제안한 방사선 및 임상 진단 기준에 따라 이루어졌습니다. 부착물 손실 및 방사선학적 뼈 손실이 없는 BOP < 10%인 개인은 치주 건강이 있는 것으로 간주되었습니다(Tonetti & Sanz, 2019). 치주염의 기준에는 2개 이상의 치간 부위에서 CAL ≥ 5 mm이고 하나 이상의 치간 부위에서 PPD ≥ 6 mm인 환자가 포함되었습니다. III-IV기(중증) 치주염만 본 연구에 포함되었습니다(Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

치주 개입

치주염 환자는 1단계 전 구강 소독으로 치료하였다. 전체 구강 소독에는 2회 세션에서 24시간 이내에 전체 구강 스케일링 및 치근 계획 절차가 포함되었습니다. 각 세션은 연속 2일 동안 60분 동안 연습되었습니다. 치은 연하 관개 및 혀 닦기는 1분 동안 1% CHX 겔로 이루어졌다. 0.12% CHX로 양치질을 시작과 끝에서 30초 동안, 하루에 두 번 2주 동안 시행하였다(Quirynen et al., 1995).

GCF 샘플 수집

GCF 샘플은 8시간의 야간 금식과 임상적 치주 측정 후 1주 후에 두 그룹으로 기준선에서 수집한 다음 비수술적 치주 치료(Akalin, Baltacioglu, Akalin, Baltacioglu , Alver, & Karabulut, 2007). PPD가 6mm 이상이고 치주염 환자에서 BOP 양성인 치아 쪽에서 샘플을 채취했습니다. 참가자당 6개의 GCF 샘플을 채취했습니다. 3개 치아(절치, 소구치 및 대구치) 각각의 근심 및 원위 부위에서 샘플을 채취했습니다. 면봉으로 격리하고 샘플링 영역을 부드럽게 공기 건조하여 타액 오염을 방지했습니다. 타액이나 혈액으로 오염된 샘플은 포함되지 않았습니다. 플라크는 치주 큐렛에 의해 샘플링 영역에서 부드럽게 제거되었습니다. 시료는 오리피스법(Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) 사전 보정된 전자 치은액 측정 장치(Oraflow Inc., Plainview, NY)에서 부피를 측정했습니다|| (Chapple, Landini, Griffiths, Patel, & Ward, 1999). 전자 장치의 값은 표준 곡선을 참조하여 실제 부피(µl)로 변환되었습니다. 모든 Periopaper 스트립을 플라스틱 Eppendorf 마이크로원심분리기 튜브에 모았습니다. 생화학적 분석 전까지 -80 °C에 보관하였다.

모든 샘플을 해동하고 375μl의 인산염 완충 식염수(pH:7.00, 10mM Na2PO4, 137mM NaCl 및 2.7mM KCl)를 샘플 스트립이 들어 있는 에펜도르프 튜브에 첨가했습니다. 이어서, 샘플을 실온에서 30분 동안 용출시키고(Chapple et al., 1997) 11000×g에서 15분 동안 4℃에서 원심분리하였다. 페리오스틴, IL-1β 및 FGF 수준의 측정을 검정하였다.

혈청 샘플 수집

말초 정맥혈 샘플을 환자에게서 채취했습니다. 혈청은 2000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 세포에서 분리한 후 생화학적 분석을 수행할 때까지 -80°C에서 보관하였다.

실험실 분석

페리오스틴, IL-1β 및 FGF 수준은 ELISA 판독기(Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland)에서 450nm 파장에서 상업적으로 이용 가능한 키트를 사용하여 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA)에 의해 측정되었습니다.

GCF 샘플의 페리오스틴 수치 측정

페리오스틴 수치는 ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2(키트 카탈로그 번호: E-EL-H6113)로 측정했습니다. 페리오스틴에 대한 검정 범위는 3.13-200ng/ml이고; 민감도, 1.88 ng/ml, 분석 내 및 분석 간 분산 계수(CV%)는 < 10%였습니다.

GCF 샘플에서 IL-1β 수준 측정

IL-1β 수준은 ELABSCIENCE Human IL-1β(키트 카탈로그 번호: E-EL-H0149)로 측정했습니다. IL-1β에 대한 검정 범위는 7.81-500pg/ml이고; 민감도, 4.69 pg/ml, 분석 내 및 분석 간 분산 계수(CV%)는 < 10%였습니다.

GCF 샘플에서 FGF 수준 측정

FGF 수준은 ELABSCIENCE Human FGF21(키트 카탈로그 번호: E-EL-H0074)로 측정했습니다. FGF에 대한 분석 범위는 31.25-2000이었습니다. pg/ml; 민감도, 18.75 pg/ml, 분석 내 및 분석 간 분산 계수(CV%)는 < 10%였습니다.

통계 분석

연속 변수 분포의 정규성은 Shapiro-Wilk 테스트로 테스트되었습니다. 기술통계는 파라메트릭 분산변수의 경우 평균 및 표준편차(평균±SD)로, 비모수분포변수의 경우 중앙값(사분위수 범위)으로 표시하였다.

범주형 변수 간의 연관성을 분석하기 위해 카이제곱 검정을 사용했습니다. 정규 분포 수치 변수에 대한 Student t-test와 비정규 분포 수치 변수에 대한 Mann Whitney u 검정을 수행하여 수치 데이터에 대해 2개의 독립적인 그룹을 비교했습니다. 비모수 변수를 사용하여 여러 시점에 대해 Freidman 테스트를 수행했습니다. Dunn 다중 비교 테스트는 post hoc pairwise 다중 비교 분석을 위해 수행되었습니다.

통계 분석은 SPSS for Windows 버전 24.0으로 수행되었으며 P 값 <0.05는 통계적으로 유의한 것으로 인정되었습니다.