Нехирургическое пародонтологическое лечение и уровни периостина

Обсервационное проспективное исследование было разработано для характеристики изменений периостина с течением времени после нехирургического лечения пародонта в сыворотке и GCF на кафедре пародонтологии стоматологического факультета Университета Хатай Мустафа Кемаль, Хатай, Турция. Протокол исследования был одобрен Комитетом по этике использования людей в исследованиях Университета Хатая Мустафы Кемаля (Протокол №: 2019/118). Исследование проводилось в соответствии с положениями Хельсинкской декларации и в соответствии с рекомендациями CONSORT (Schulz, Altman, & Moher, 2010). Этот исследовательский проект финансировался координатором научно-исследовательских проектов Университета Хатая Мустафы Кемаля (19M051).

Люди были включены в исследование с декабря 2019 года по август 2021 года. Письменное информированное согласие было получено от каждого участника до клинического пародонтологического осмотра.

Исследуемая популяция

В исследовании приняли участие 48 взрослых людей. Участники были набраны в 2 сопоставимые по полу группы по 24 участника в каждой: группы здоровых пародонтов (PH) и пародонтитов (P). В соответствии с демографическими переменными пациентов, включенных в группу П, были включены пациенты в группы ЛГ.

Пародонтальные параметры

Клинические параметры пародонта регистрировались одним калиброванным экспертом (k = 0,95) (автор А.С.). Согласие между экспертами было определено для CAL. Внутриэкспертная воспроизводимость определялась путем повторных обследований 10 испытуемых с часовым интервалом. Клинические параметры пародонта оценивались с использованием следующих параметров пародонта для диагностики пародонта в обеих группах, а также в 1-й месяц, 3-й месяц после нехирургического лечения пародонта в группе пародонтита.

Измерения проводились с использованием пародонтального зонда Williams (Hu-Friedy, Чикаго, Иллинойс, США) и включали зондирование глубины кармана (PPD), уровня клинического прикрепления (CAL), индекса зубного налета (PI) (Silness & Loe, 1964), десневого индекс (GI) (Loe & Silness, 1963) и процент кровоточивости при зондировании (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) в шести местах на зуб (мезио-щечный, щечный, дисто-щечный, мезио-лингвальный, язычный и дистальный). -лингвальные) на каждый зуб.

Диагностика заболеваний и состояний пародонта проводилась в соответствии с рентгенологическими и клиническими диагностическими критериями, предложенными Всемирным семинаром по классификации пародонтальных и периимплантационных заболеваний и состояний 2017 г. (Caton et al., 2018). Считалось, что люди с BOP <10% без потери прикрепления и рентгенологической потери кости имеют здоровье пародонта (Tonetti & Sanz, 2019). Критерии пародонтита включали пациентов с CAL ≥ 5 мм в двух или более интерпроксимальных участках и PPD ≥ 6 мм в одном или более интерпроксимальных участках. В настоящее исследование была включена только стадия III-IV (тяжелая) пародонтита (Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

Пародонтальное вмешательство

Больных пародонтитом лечили одноэтапной полной дезинфекцией полости рта. Полная дезинфекция полости рта включала полное удаление зубного камня и процедуры планирования корня в течение 24 часов в два сеанса. Каждый сеанс практиковался в течение 60 минут два дня подряд. Поддесневое орошение и чистку языка проводили 1% гелем CHX в течение 1 мин. Полоскания рта 0,12% хлоргексидина проводились в течение 30 с в начале и в конце каждого сеанса и два раза в день в течение 2 недель (Quirynen et al., 1995).

Коллекция образцов ГКМ

Образцы GCF были собраны после 8-часового ночного голодания и через одну неделю после клинических измерений пародонта исходно в двух группах, а затем на 24-й, 48-й, 14-й день, 1-й месяц, 3-й месяц после нехирургического лечения пародонта (Akalin, Baltacioglu). , Алвер и Карабулут, 2007 г.). Образцы были взяты со стороны зубов с PPD ≥6 мм и положительным BOP у пациентов с пародонтитом. На одного участника было взято шесть проб ЗКФ. Образцы брали с мезиального и дистального участка каждого из трех зубов (резцов, премоляров и моляров). Загрязнение слюной предотвращали изоляцией ватными тампонами и осторожной сушкой воздухом области отбора проб. Образцы, загрязненные слюной или кровью, не включались. Зубной налет осторожно удаляли из области отбора проб пародонтальной кюреткой. Образцы собирали в течение 30 секунд с помощью стандартных бумажных полосок (Periopaper; Oraflow Inc., Плейнвью, Нью-Йорк) методом отверстия (Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) Объемы измеряли на предварительно откалиброванном электронном устройстве для измерения десневой жидкости (Oraflow Inc., Plainview, NY) || (Чаппл, Ландини, Гриффитс, Патель и Уорд, 1999). Значения электронного устройства были привязаны к стандартной кривой и преобразованы в фактический объем (мкл). Все полоски Periopaper помещали в пластиковые микроцентрифужные пробирки Eppendorf. Их хранили при температуре -80 °С до проведения биохимического анализа.

Все образцы размораживали и добавляли 375 мкл фосфатно-солевого буфера (рН: 7,00, 10 мМ Na2PO4, 137 мМ NaCl и 2,7 мМ KCl) в пробирки Эппендорфа, содержащие полоски для образцов. Затем образцы элюировали в течение 30 минут при комнатной температуре и (Chapple et al., 1997) центрифугировали при 11000×g в течение 15 минут при 4 °C. Измеряли уровни периостина, IL-1β и FGF.

Сбор образцов сыворотки

У больных брали образцы периферической венозной крови. Сыворотку отделяли от клеток центрифугированием при 2000 об/мин в течение 10 мин, после чего хранили при -80°С до проведения биохимического анализа.

Лабораторные анализы

Уровни периостина, IL-1β и FGF измеряли с помощью твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием имеющихся в продаже наборов при длине волны 450 нм в ELISA Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland).

Измерение уровней периостина в образцах GCF

Уровни периостина измеряли с помощью ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2 (номер по каталогу набора: E-EL-H6113). Диапазоны анализа для периостина составляли 3,13-200 нг/мл; чувствительность 1,88 нг/мл, внутри- и межаналитические коэффициенты дисперсии (CV%) были < 10%.

Измерение уровней IL-1β в образцах GCF

Уровни IL-1β измеряли с помощью ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Cat No: E-EL-H0149). Диапазоны анализа для IL-1β составляли 7,81–500 пг/мл; чувствительность 4,69 пг/мл, внутри- и межаналитические коэффициенты дисперсии (CV%) < 10%.

Измерение уровней FGF в образцах GCF

Уровни FGF измеряли с помощью ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Cat No: E-EL-H0074). Диапазоны анализа FGF: 31,25–2000. пг/мл; чувствительность 18,75 пг/мл, коэффициенты дисперсии внутри и между анализами (CV%) были < 10%.

Статистический анализ

Нормальность распределения непрерывных переменных проверялась тестом Шапиро-Уилка. Описательная статистика была представлена ​​в виде среднего значения и стандартного отклонения (среднее ± стандартное отклонение) для параметрических распределенных переменных и медианы (межквартильный размах) для непараметрических распределенных переменных.

Тест хи-квадрат использовался для анализа ассоциаций между категориальными переменными. Критерий Стьюдента для нормально распределенных числовых переменных и u-критерий Манна-Уитни для ненормально распределенных числовых переменных были выполнены для сравнения 2 независимых групп числовых данных. Критерий Фрейдмана проводился для разных моментов времени с непараметрическими переменными. Критерии множественных сравнений Данна были выполнены для апостериорного попарного анализа множественных сравнений.

Статистический анализ был выполнен с помощью SPSS для Windows версии 24.0, и значение P <0,05 было принято как статистически значимое.