Nicht-chirurgische Parodontalbehandlung und Periostinspiegel

Die prospektive Beobachtungsstudie wurde entwickelt, um Periostinveränderungen im Laufe der Zeit nach nicht-chirurgischer Parodontalbehandlung in Serum und GCF in der Abteilung für Parodontologie der Fakultät für Zahnmedizin der Hatay Mustafa Kemal University, Hatay, Türkei, zu charakterisieren. Das Studienprotokoll wurde von der Ethikkommission für die Verwendung menschlicher Subjekte in der Forschung der Hatay Mustafa Kemal University genehmigt (Protokoll Nr.: 2019/118). Die Studie wurde in Übereinstimmung mit den Grundsätzen der Deklaration von Helsinki und gemäß den CONSORT-Richtlinien durchgeführt (Schulz, Altman & Moher, 2010). Dieses Studienprojekt wurde vom Koordinator für wissenschaftliche Forschungsprojekte der Hatay Mustafa Kemal University (19M051) finanziell unterstützt.

Personen wurden von Dezember 2019 bis August 2021 in die Studie aufgenommen. Vor der klinischen Parodontaluntersuchung wurde von jedem Teilnehmer eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt.

Studienpopulation

Achtundvierzig erwachsene Personen wurden in die Studie aufgenommen. Die Teilnehmer wurden in 2 geschlechtsspezifische Gruppen mit jeweils 24 Teilnehmern rekrutiert: parodontal gesunde (PH) und Parodontitis (P)-Gruppen. Entsprechend den demographischen Variablen der in die P-Gruppe eingeschlossenen Patienten wurden die Patienten in den PH-Gruppen eingeschlossen.

Parodontale Parameter

Parodontale klinische Parameter wurden von einem einzigen kalibrierten Untersucher (k = 0,95) erfasst (Autor AS). Für CAL wurde eine prüferinterne Vereinbarung festgestellt. Die Intra-Untersucher-Reproduzierbarkeit wurde durch wiederholte Untersuchungen von 10 Probanden im Abstand von einer Stunde bestimmt. Klinische Parodontalmessungen wurden anhand der folgenden Parodontalmessungen für die Parodontaldiagnose in beiden Gruppen und auch im 1. Monat, 3. Monat nach nicht-chirurgischer Parodontalbehandlung in der Parodontitis-Gruppe bewertet.

Die Messungen wurden mit einer Parodontalsonde von Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) durchgeführt und umfassten Sondierungstaschentiefe (PPD), klinisches Attachmentlevel (CAL), Plaqueindex (PI) (Silness & Loe, 1964) und Gingiva Index (GI) (Loe & Silness, 1963) und prozentuale Blutung beim Sondieren (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) an sechs Stellen pro Zahn (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual und disto -lingual) an jedem Zahn.

Die Diagnose parodontaler Erkrankungen und Zustände erfolgte gemäß den röntgenologischen und klinischen diagnostischen Kriterien, die vom World Workshop on Classification of Parodontal and Peri-implant Diseases and Conditions 2017 vorgeschlagen wurden (Caton et al., 2018). Personen mit BOP < 10 % ohne Attachmentverlust und röntgenologischem Knochenverlust galten als parodontal gesund (Tonetti & Sanz, 2019). Die Kriterien für Parodontitis schlossen Patienten mit CAL ≥ 5 mm an zwei oder mehr interproximalen Stellen und PPD ≥ 6 mm an einer oder mehreren interproximalen Stellen ein. Nur Stadium III-IV (schwere) Parodontitis wurde in die vorliegende Studie eingeschlossen (Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

Parodontale Intervention

Parodontitispatienten wurden mit einer einstufigen Vollmunddesinfektion behandelt. Die vollständige Munddesinfektion umfasste eine vollständige Zahnsteinentfernung und Wurzelplanungsverfahren innerhalb von 24 h in zwei Sitzungen. Jede Sitzung wurde an zwei aufeinanderfolgenden Tagen für 60 Minuten geübt. Subgingivale Spülung und Zungenbürsten wurden mit 1% CHX-Gel für 1 Minute durchgeführt. Mundspülungen mit 0,12 % CHX wurden für 30 Sekunden zu Beginn und am Ende jeder Sitzung und zweimal täglich für 2 Wochen durchgeführt (Quirynen et al., 1995).

Sammlung von GCF-Proben

GCF-Proben wurden nach 8 Stunden nächtlichem Fasten und eine Woche nach klinischen Parodontalmessungen zu Studienbeginn in zwei Gruppen und dann am 24., 48., 14. Tag, 1. Monat, 3. Monat nach nicht-chirurgischer Parodontalbehandlung (Akalin, Baltacioglu , Alver & Karabulut, 2007). Die Proben wurden von der Zahnseite mit PPDs ≥6 mm und BOP-positiven Patienten mit Parodontitis entnommen. Pro Teilnehmer wurden sechs GCF-Proben entnommen. Proben wurden von einer mesialen und einer distalen Stelle an jedem der drei Zähne (Schneidezähne, Prämolaren und Molaren) entnommen. Speichelkontamination wurde durch Isolierung mit Watterollen und sanfte Lufttrocknung des Probenbereichs verhindert. Mit Speichel oder Blut kontaminierte Proben wurden nicht eingeschlossen. Plaque wurde mit der parodontalen Kürette vorsichtig aus dem Probenbereich entfernt. Die Proben wurden innerhalb von 30 Sekunden mit standardisierten Papierstreifen (Periopaper; Oraflow Inc., Plainview, NY) nach der Öffnungsmethode gesammelt. (Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) Die Volumina wurden auf einem vorkalibrierten elektronischen Zahnfleischflüssigkeitsmessgerät (Oraflow Inc., Plainview, NY) gemessen|| (Chapple, Landini, Griffiths, Patel & Ward, 1999). Die Werte des elektronischen Geräts wurden auf eine Standardkurve bezogen und in ein tatsächliches Volumen (µl) umgewandelt. Alle Periopaper-Streifen wurden in Eppendorf-Mikrozentrifugenröhrchen aus Kunststoff gepoolt. Sie wurden bis zur biochemischen Analyse bei -80 °C gelagert.

Alle Proben wurden aufgetaut und 375 μl phosphatgepufferte Kochsalzlösung (pH: 7,00, 10 mM Na2PO4, 137 mM NaCl und 2,7 mM KCl) wurden in die Eppendorf-Röhrchen mit den Probenstreifen gegeben. Anschließend wurden Proben für 30 Minuten bei Raumtemperatur eluiert und (Chapple et al., 1997) bei 11000 × g für 15 Minuten bei 4 °C zentrifugiert. Die Messung von Periostin-, IL-1β- und FGF-Spiegeln wurde getestet.

Entnahme von Serumproben

Den Patienten wurden periphere venöse Blutproben entnommen. Das Serum wurde durch 10-minütige Zentrifugation bei 2000 U/min von den Zellen getrennt, wonach es bei –80°C gelagert wurde, bis die biochemische Analyse durchgeführt wurde.

Laboranalysen

Die Periostin-, IL-1β- und FGF-Spiegel wurden durch den enzymgebundenen Immunadsorptionstest (ELISA) unter Verwendung von im Handel erhältlichen Kits bei einer Wellenlänge von 450 nm in einem ELISA-Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland) gemessen.

Messung des Periostinspiegels in GCF-Proben

Die Periostinspiegel wurden mit ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2 (Kit Cat No: E-EL-H6113) gemessen. Die Testbereiche für das Periostin waren 3,13–200 ng/ml; Sensitivität, 1,88 ng/ml, Intra- und Inter-Assay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %.

Messung von IL-1β-Spiegeln in GCF-Proben

Die IL-1β-Spiegel wurden mit ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Cat No: E-EL-H0149) gemessen. Die Testbereiche für das IL-1β waren 7,81–500 pg/ml; Sensitivität, 4,69 pg/ml, Intra- und Inter-Assay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %.

Messung von FGF-Spiegeln in GCF-Proben

Die FGF-Spiegel wurden mit ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Cat No: E-EL-H0074) gemessen. Die Untersuchungsbereiche für den FGF waren 31,25–2000 pg/ml; Sensitivität, 18,75 pg/ml, Intra- und Inter-Assay-Varianzkoeffizienten (CV%) waren < 10 %.

Statistische Analyse

Die Normalverteilung der kontinuierlichen Variablen wurde mit dem Shapiro-Wilk-Test getestet. Deskriptive Statistiken wurden als Mittelwert und Standardabweichung (Mittelwert ± Standardabweichung) für parametrisch verteilte Variablen und Median (Interquartilbereich) für die nichtparametrisch verteilten Variablen dargestellt.

Der Chi-Quadrat-Test wurde verwendet, um die Assoziationen zwischen kategorialen Variablen zu analysieren. Der Student-t-Test für normalverteilte numerische Variablen und der Mann-Whitney-u-Test für nichtnormalverteilte numerische Variablen wurden durchgeführt, um zwei unabhängige Gruppen auf numerische Daten zu vergleichen. Der Freidman-Test wurde für verschiedene Zeitpunkte mit nichtparametrischen Variablen durchgeführt. Dunn-Mehrfachvergleichstests wurden für post-hoc-paarweise Mehrfachvergleichsanalysen durchgeführt.

Die statistische Analyse wurde mit SPSS für Windows Version 24.0 durchgeführt und der P-Wert < 0,05 wurde als statistisch signifikant akzeptiert.