Ikke-kirurgisk periodontal behandling og periostinniveauer

Det observationelle prospektive studie var designet til at karakterisere periostin-ændringer over tid efter ikke-kirurgisk parodontal behandling i serum og GCF i afdelingen for periodontologi på Det Odontologiske Fakultet ved Hatay Mustafa Kemal University, Hatay, Tyrkiet. Studieprotokollen blev godkendt af den etiske komité for brug af menneskelige emner i forskning ved Hatay Mustafa Kemal University (protokol nr.: 2019/118). Undersøgelsen blev udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen og udført i CONSORT-retningslinjer (Schulz, Altman, & Moher, 2010). Dette studieprojekt blev økonomisk støttet af Hatay Mustafa Kemal Universitys videnskabelige forskningsprojektkoordinator (19M051).

Individer blev inkluderet i undersøgelsen fra december 2019 til august 2021. Der blev indhentet skriftligt informeret samtykke fra hver deltager før den kliniske parodontale undersøgelse.

Studiebefolkning

48 voksne individer blev indskrevet i undersøgelsen. Deltagerne blev rekrutteret til 2 kønsmatchede grupper med 24 deltagere i hver: periodontalt raske (PH) og parodontitis (P) grupper. I overensstemmelse med de demografiske variabler for patienterne inkluderet i P-gruppen, blev patienterne i PH-grupperne inkluderet.

Parodontale parametre

Periodontale kliniske parametre blev registreret af en enkelt kalibreret undersøger (k = 0,95) (forfatter AS). Intra-eksaminator aftale blev fastsat for CAL. Reproducerbarheden af ​​intra-eksaminator blev bestemt ved gentagne undersøgelser af 10 forsøgspersoner med en times interval. Kliniske parodontale målinger blev vurderet ved hjælp af følgende parodontale målinger til parodontal diagnose i begge grupper og også ved 1. måned, 3. måned efter ikke-kirurgisk parodontal behandling i parodontitis-gruppen.

Målingerne blev udført ved hjælp af en Williams parodontal probe (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) og omfattede sonderingslommedybde (PPD), klinisk tilknytningsniveau (CAL), plakindeks (PI) (Silness & Loe, 1964), tandkød. indeks (GI) (Loe & Silness, 1963) og procentvis blødning ved sondering (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) på seks steder pr. tand (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual og disto -sproget) på hver tand.

Diagnose af periodontale sygdomme og tilstande blev stillet i henhold til de radiografiske og kliniske diagnostiske kriterier foreslået af 2017 World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions (Caton et al., 2018). Personer med BOP < 10 % uden tilknytningstab og radiografisk knogletab blev anset for at have periodontal sundhed (Tonetti & Sanz, 2019). Kriterierne for parodontitis inkluderede patienter med CAL ≥ 5 mm på to eller flere interproksimale steder og PPD ≥ 6 mm på et eller flere interproksimale steder. Kun stadium III-IV (alvorlig) paradentose blev inkluderet i denne undersøgelse (Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

Periodontal intervention

Paradentosepatienter blev behandlet ved et-trins fuldmunddesinfektion. Fuld mund desinfektion omfattede fuld mund afskalning og rodplanlægningsprocedurer inden for 24 timer i to sessioner. Hver session blev øvet i 60 minutter på to på hinanden følgende dage. Subgingival irrigation og tungebørstning blev lavet med 1% CHX gel i 1 min. Mundskylninger med 0,12 % CHX blev udført i 30 s i begyndelsen og slutningen af ​​hver session og to gange om dagen i 2 uger (Quirynen et al., 1995).

Indsamling af GCF-prøver

GCF-prøver blev indsamlet efter 8 timers nattefaste og en uge efter kliniske parodontale målinger ved baseline i to grupper og derefter på den 24. time, 48. time, 14. dag 1. måned, 3. måned efter ikke-kirurgisk parodontal behandling (Akalin, Baltacioglu , Alver, & Karabulut, 2007). Prøverne blev indsamlet fra tandsiden med PPD'er ≥6 mm og BOP-positive hos patienter med paradentose. Seks GCF prøver blev taget pr. deltager. Prøver blev indsamlet fra et mesialt og et distalt sted på hver af tre tænder (fortænder, præmolarer og kindtænder). Spytkontaminering blev forhindret ved at isolere med bomuldsruller og forsigtigt lufttørre prøveudtagningsområdet. Prøver forurenet med spyt eller blod var ikke inkluderet. Plak blev forsigtigt fjernet fra prøveudtagningsområdet med den parodontale curette. Prøverne blev opsamlet inden for 30 sekunder med standardiserede papirstrimler (Periopaper; Oraflow Inc., Plainview, NY) ved åbningsmetoden.(Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) Volumenerne blev målt på en præ-kalibreret elektronisk tandkødsvæskemåleanordning (Oraflow Inc., Plainview, NY)|| (Chapple, Landini, Griffiths, Patel, & Ward, 1999). Værdierne af den elektroniske anordning blev refereret til en standardkurve og konverteret til et faktisk volumen (µl). Alle Periopaper-strimlerne blev samlet i Eppendorf-mikrocentrifugerør af plast. De blev opbevaret ved -80 °C indtil den biokemiske analyse.

Alle prøver blev optøet, og 375 μl phosphatbufret saltvand (pH: 7,00, 10 mM Na2PO4, 137 mM NaCl og 2,7 mM KCl) blev tilsat til eppendorf-rørene indeholdende prøvestrimlerne. Efterfølgende blev prøver elueret i 30 minutter ved stuetemperatur og (Chapple et al., 1997) centrifugeret ved 11000 xg i 15 minutter ved 4 °C. Målingen af ​​periostin-, IL-1β- og FGF-niveauer blev analyseret.

Indsamling af serumprøver

Der blev taget perifere venøse blodprøver fra patienterne. Serumet blev separeret fra cellerne ved centrifugering ved 2000 rpm i 10 minutter, hvorefter det blev opbevaret ved -80°C, indtil den biokemiske analyse blev udført.

Laboratorieanalyser

Periostin-, IL-1β- og FGF-niveauer blev målt ved hjælp af enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) under anvendelse af kommercielt tilgængelige kits ved 450 nm bølgelængde i ELISA Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland).

Måling af periostinniveauer i GCF-prøver

Periostinniveauer blev målt ved hjælp af ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2 (Kit Kat.nr.: E-EL-H6113). Analyseområderne for periostin var 3,13-200 ng/ml; følsomhed, 1,88 ng/ml, intra- og inter-assay-varianskoefficienter (CV%) var < 10%.

Måling af IL-1β-niveauer i GCF-prøver

IL-1β-niveauer blev målt ved hjælp af ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Kat.nr.: E-EL-H0149). Analyseområderne for IL-1β var 7,81-500 pg/ml; følsomhed, 4,69 pg/ml, intra- og inter-assay-varianceskoefficienter (CV%) var < 10%.

Måling af FGF-niveauer i GCF-prøver

FGF-niveauer blev målt med ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Kat.nr.: E-EL-H0074). Analyseområderne for FGF var 31.25-2000 pg/ml; følsomhed, 18,75 pg/ml, intra- og inter-assay-varianskoefficienter (CV%) var < 10%.

Statistisk analyse

Normaliteten af ​​fordelingen af ​​kontinuerte variable blev testet ved Shapiro-Wilk-testen. Beskrivende statistik blev præsenteret som middelværdi og standardafvigelse (middel±sd) for parametriske distribuerede variable og median (interkvartilområde) for de ikke-parametriske distribuerede variable.

Chi-kvadrat-testen blev brugt til at analysere sammenhængene mellem kategoriske variabler. Student t-testen for normalfordelte numeriske variable og Mann Whitney u-testen for ikke-normalfordelte numeriske variabler blev udført for at sammenligne 2 uafhængige grupper for numeriske data. Freidman-testen blev udført for forskellige tidspunkter med ikke-parametriske variable. Dunn multiple sammenligningstest blev udført for post hoc parvise multiple sammenligningsanalyser.

Statistisk analyse blev udført med SPSS til Windows version 24.0, og P-værdi <0,05 blev accepteret som statistisk signifikant.