Ikke-kirurgisk periodontal behandling og periostinnivåer

Den observasjonelle prospektive studien ble designet for å karakterisere periostinforandringer over tid etter ikke-kirurgisk periodontal behandling i serum og GCF ved Institutt for periodontologi ved Det odontologiske fakultet ved Hatay Mustafa Kemal University, Hatay, Tyrkia. Studieprotokollen ble godkjent av Etikkkomiteen for bruk av mennesker i forskning ved Hatay Mustafa Kemal University (Protokoll nr: 2019/118). Studien ble utført i samsvar med prinsippene i Helsinki-erklæringen og utført i CONSORT-retningslinjer (Schulz, Altman, & Moher, 2010). Dette studieprosjektet ble økonomisk støttet av Hatay Mustafa Kemal University Scientific Research Projects Coordinator (19M051).

Enkeltpersoner ble inkludert i studien fra desember 2019 til august 2021. Skriftlig informert samtykke ble innhentet fra hver deltaker før den kliniske periodontale undersøkelsen.

Studiepopulasjon

Førtiåtte voksne individer ble registrert i studien. Deltakerne ble rekruttert til 2 kjønnsmatchede grupper med 24 deltakere i hver: periodontalt friske (PH) og periodontitt (P) grupper. I samsvar med de demografiske variablene til pasientene inkludert i P-gruppen, ble pasientene i PH-gruppene inkludert.

Periodontale parametre

Periodontale kliniske parametere ble registrert av en enkelt kalibrert undersøker (k = 0,95) (forfatter AS). Intraeksaminatoravtale ble bestemt for CAL. Reproduserbarheten for intra-eksaminator ble bestemt gjennom gjentatte undersøkelser av 10 forsøkspersoner med en times intervall. Kliniske periodontale målinger ble vurdert ved bruk av følgende periodontale målinger for periodontal diagnose i begge grupper og også ved 1. måned, 3. måned etter ikke-kirurgisk periodontal behandling i periodontittgruppen.

Målingene ble utført ved bruk av en Williams periodontal probe (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) og inkluderte sonderingslommedybde (PPD), klinisk festenivå (CAL), plakkindeks (PI) (Silness & Loe, 1964), gingival indeks (GI) (Loe & Silness, 1963), og prosentvis blødning ved sondering (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) på seks steder per tann (mesio-bukkal, bukkal, disto-bukkal, mesio-lingual, lingual og disto -språklig) på hver tann.

Diagnose av periodontale sykdommer og tilstander ble gjort i henhold til de radiografiske og kliniske diagnostiske kriteriene foreslått av 2017 World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions (Caton et al., 2018). Personer med BOP < 10 % uten tilknytningstap og radiografisk bentap ble ansett for å ha periodontal helse (Tonetti & Sanz, 2019). Kriteriene for periodontitt inkluderte pasienter med CAL ≥ 5 mm på to eller flere interproksimale steder og PPD ≥ 6 mm på ett eller flere interproksimale steder. Bare stadium III-IV (alvorlig) periodontitt ble inkludert i denne studien (Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

Periodontal intervensjon

Periodontittpasienter ble behandlet med ett-trinns fullmunnsdesinfeksjon. Full-munns desinfeksjon inkluderte full-munn skalering og rot planlegging prosedyrer innen 24 timer i to økter. Hver økt ble øvd i 60 minutter to påfølgende dager. Subgingival vanning og tungebørsting ble laget med 1 % CHX gel i 1 min. Munnskyll med 0,12 % CHX ble utført i 30 s ved begynnelsen og slutten av hver økt og to ganger daglig i 2 uker (Quirynen et al., 1995).

Samling av GCF-prøver

GCF-prøver ble samlet etter 8 timers nattefaste og en uke etter kliniske periodontale målinger ved baseline i to grupper og deretter på 24. time, 48. time, 14. dag 1. måned, 3. måned etter ikke-kirurgisk periodontal behandling (Akalin, Baltacioglu , Alver, & Karabulut, 2007). Prøvene ble tatt fra tannsiden med PPD-er ≥6 mm, og BOP-positive hos pasienter med periodontitt. Det ble tatt seks GCF-prøver per deltaker. Prøver ble samlet fra et mesialt og et distalt sted på hver av tre tenner (fortenner, premolarer og jeksler). Spyttkontaminering ble forhindret ved isolering med bomullsruller og forsiktig lufttørking av prøvetakingsområdet. Prøver forurenset med spytt eller blod ble ikke inkludert. Plakk ble forsiktig fjernet fra prøvetakingsområdet med periodontal curette. Prøvene ble samlet innen 30 sekunder med standardiserte papirstrimler (Periopaper; Oraflow Inc., Plainview, NY) ved åpningsmetoden.(Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) Volumene ble målt på en forhåndskalibrert elektronisk tannkjøttvæskemåler (Oraflow Inc., Plainview, NY)|| (Chapple, Landini, Griffiths, Patel og Ward, 1999). Verdiene til den elektroniske enheten ble referert til en standardkurve og konvertert til et faktisk volum (µl). Alle Periopaper-strimlene ble samlet i Eppendorf mikrosentrifugerør av plast. De ble lagret ved -80 °C frem til den biokjemiske analysen.

Alle prøvene ble tint og 375 μl fosfatbufret saltvann (pH:7,00, 10 mM Na2PO4, 137 mM NaCl og 2,7 mM KCl) ble tilsatt i eppendorf-rørene som inneholdt prøvestrimlene. Deretter ble prøvene eluert i 30 minutter ved romtemperatur og (Chapple et al., 1997) sentrifugert ved 11000×g i 15 minutter ved 4 °C. Målingen av nivåene av periostin, IL-1β og FGF ble analysert.

Samling av serumprøver

Det ble tatt perifere venøse blodprøver fra pasientene. Serumet ble separert fra cellene ved sentrifugering ved 2000 rpm i 10 minutter, hvoretter det ble lagret ved -80°C, inntil den biokjemiske analysen ble utført.

Laboratorieanalyser

Periostin-, IL-1β- og FGF-nivåer ble målt ved den enzymkoblede immunosorbentanalysen (ELISA) ved bruk av kommersielt tilgjengelige sett ved 450 nm bølgelengde i ELISA Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland).

Måling av periostinnivåer i GCF-prøver

Periostinnivåer ble målt med ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2 (Kit Kat.nr.: E-EL-H6113). Analyseområdene for periostinet var 3,13-200 ng/ml; sensitivitet, 1,88 ng/ml, variasjonskoeffisienter for intra- og interanalyse (CV%) var < 10%.

Måling av IL-1β-nivåer i GCF-prøver

IL-1β-nivåer ble målt med ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Kat.nr.: E-EL-H0149). Analyseområdene for IL-1β var 7,81-500 pg/ml; sensitivitet, 4,69 pg/ml, variasjonskoeffisienter for intra- og interanalyse (CV%) var < 10%.

Måling av FGF-nivåer i GCF-prøver

FGF-nivåer ble målt med ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Kat.nr.: E-EL-H0074). Analyseområdene for FGF var 31.25-2000 pg/ml; sensitivitet, 18,75 pg/ml, variasjonskoeffisienter for intra- og interanalyse (CV%) var < 10%.

Statistisk analyse

Normaliteten til fordelingen av kontinuerlige variabler ble testet ved Shapiro-Wilk-testen. Deskriptiv statistikk ble presentert som gjennomsnitt og standardavvik (gjennomsnitt±sd) for parametriske distribuerte variabler og median (interkvartilt område) for de ikke-parametriske distribuerte variablene.

Kjikvadrattesten ble brukt til å analysere assosiasjonene mellom kategoriske variabler. Student t-testen for normalfordelte numeriske variabler og Mann Whitney u-testen for ikke-normalfordelte numeriske variabler ble utført for å sammenligne 2 uavhengige grupper for numeriske data. Freidman-testen ble utført for forskjellige tidspunkter med ikke-parametriske variabler. Dunn multiple sammenligningstester ble utført for post hoc parvise multiple sammenligningsanalyser.

Statistisk analyse ble utført med SPSS for Windows versjon 24.0 og P-verdi <0,05 ble akseptert som statistisk signifikant.