Traitement parodontal non chirurgical et niveaux de périostine

L'étude prospective observationnelle a été conçue pour caractériser les changements de périostine au fil du temps après un traitement parodontal non chirurgical dans le sérum et le GCF au Département de parodontologie de la Faculté de médecine dentaire de l'Université Hatay Mustafa Kemal, Hatay, Turquie. Le protocole d'étude a été approuvé par le Comité d'éthique pour l'utilisation de sujets humains dans la recherche de l'Université Hatay Mustafa Kemal (Protocole n° : 2019/118). L'étude a été réalisée conformément aux principes de la Déclaration d'Helsinki et aux directives CONSORT (Schulz, Altman et Moher, 2010). Ce projet d'étude a été soutenu financièrement par le coordinateur des projets de recherche scientifique de l'Université Hatay Mustafa Kemal (19M051).

Les individus ont été inclus dans l'étude de décembre 2019 à août 2021. Un consentement éclairé écrit a été obtenu de chaque participant avant l'examen clinique parodontal.

Population étudiée

Quarante-huit adultes ont participé à l'étude. Les participants ont été recrutés en 2 groupes appariés selon le sexe avec 24 participants dans chacun : groupes parodontalement sains (PH) et parodontite (P). Conformément aux variables démographiques des patients inclus dans le groupe P, les patients des groupes PH ont été inclus.

Paramètres parodontaux

Les paramètres cliniques parodontaux ont été enregistrés par un seul examinateur calibré (k = 0,95) (auteur AS). Un accord intra-examinateur a été déterminé pour la CAL. La reproductibilité intra-examinateur a été déterminée par des examens répétés de 10 sujets avec un intervalle d'une heure. Les mesures parodontales cliniques ont été évaluées à l'aide des mesures parodontales suivantes pour le diagnostic parodontal dans les deux groupes et également au 1er mois, 3ème mois après le traitement parodontal non chirurgical dans le groupe parodontite.

Les mesures ont été effectuées à l'aide d'une sonde parodontale Williams (Hu-Friedy, Chicago, IL, États-Unis) et comprenaient la profondeur de la poche de sondage (PPD), le niveau d'attache clinique (CAL), l'indice de plaque (PI) (Silness & Loe, 1964), la profondeur gingivale index (GI) (Loe & Silness, 1963), et pourcentage de saignement au sondage (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) à six sites par dent (mésio-buccal, buccal, disto-buccal, mésio-lingual, lingual et disto -lingual) sur chaque dent.

Le diagnostic des maladies et affections parodontales a été effectué selon les critères diagnostiques radiographiques et cliniques proposés par l'Atelier mondial de 2017 sur la classification des maladies et affections parodontales et péri-implantaires (Caton et al., 2018). Les personnes ayant une BOP < 10 % sans perte d'attache ni perte osseuse radiographique étaient considérées comme ayant une santé parodontale (Tonetti & Sanz, 2019). Les critères de parodontite comprenaient les patients avec CAL ≥ 5 mm dans deux sites interproximaux ou plus et PPD ≥ 6 mm dans un ou plusieurs sites interproximaux. Seule la parodontite de stade III-IV (sévère) a été incluse dans la présente étude (Tonetti, Greenwell et Kornman, 2018).

Intervention parodontale

Les patients atteints de parodontite ont été traités par une désinfection complète de la bouche en une étape. La désinfection complète de la bouche comprenait des procédures de détartrage et de surfaçage radiculaire dans les 24 h en deux séances. Chaque session a été pratiquée pendant 60 minutes sur deux jours consécutifs. L'irrigation sous-gingivale et le brossage de la langue ont été réalisés avec du gel CHX 1% pendant 1 min. Des bains de bouche avec 0,12 % de CHX ont été effectués pendant 30 secondes au début et à la fin de chaque séance et deux fois par jour pendant 2 semaines (Quirynen et al., 1995).

Collecte d'échantillons du GCF

Des échantillons de GCF ont été prélevés après 8 heures de jeûne nocturne et une semaine après les mesures cliniques parodontales au départ dans deux groupes, puis à la 24e h, 48e h, 14e jour 1er mois, 3e mois après traitement parodontal non chirurgical (Akalin, Baltacioglu , Alver et Karabulut, 2007). Les échantillons ont été prélevés du côté des dents avec des PPD ≥ 6 mm et un BOP positif chez les patients atteints de parodontite. Six échantillons de GCF ont été prélevés par participant. Des échantillons ont été prélevés sur un site mésial et un site distal sur chacune des trois dents (incisives, prémolaires et molaires). La contamination par la salive a été évitée par isolement avec des rouleaux de coton et séchage à l'air doux de la zone d'échantillonnage. Les échantillons contaminés par de la salive ou du sang n'ont pas été inclus. La plaque a été délicatement retirée de la zone d'échantillonnage par la curette parodontale. Les échantillons ont été prélevés en 30 secondes avec des bandes de papier standardisées (Periopaper ; Oraflow Inc., Plainview, NY) par la méthode de l'orifice. (Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) Les volumes ont été mesurés sur un appareil de mesure de liquide gingival électronique pré-calibré (Oraflow Inc., Plainview, NY) || (Chapple, Landini, Griffiths, Patel et Ward, 1999). Les valeurs de l'appareil électronique ont été référencées à une courbe standard et converties en un volume réel (µl). Toutes les bandes Periopaper ont été regroupées dans des tubes de microcentrifugeuse Eppendorf en plastique. Ils ont été conservés à -80 °C jusqu'à l'analyse biochimique.

Tous les échantillons ont été décongelés et 375 ul de solution saline tamponnée au phosphate (pH : 7,00, Na2PO4 10 mM, NaCl 137 mM et KCl 2,7 mM) ont été ajoutés dans les tubes Eppendorf contenant les bandelettes d'échantillon. Par la suite, les échantillons ont été élués pendant 30 minutes à température ambiante et (Chapple et al., 1997) centrifugés à 11000 xg pendant 15 minutes à 4 °C. La mesure des taux de périostine, d'IL-1β et de FGF a été dosée.

Prélèvement d'échantillons de sérum

Des échantillons de sang veineux périphérique ont été prélevés sur les patients. Le sérum a été séparé des cellules par centrifugation à 2000 tr/min pendant 10 min, après quoi il a été stocké à -80°C, jusqu'à ce que l'analyse biochimique soit effectuée.

Analyses de laboratoire

Les niveaux de périostine, d'IL-1β et de FGF ont été mesurés par le dosage immuno-enzymatique (ELISA) à l'aide de kits disponibles dans le commerce à une longueur d'onde de 450 nm dans ELISA Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland).

Mesure des niveaux de périostine dans les échantillons de GCF

Les niveaux de périostine ont été mesurés par ELABSCIENCE Human POSTN/OSF-2 (Kit Cat No: E-EL-H6113). Les plages de dosage pour la périostine étaient de 3,13 à 200 ng/ml ; la sensibilité, 1,88 ng/ml, les coefficients de variance intra et inter dosage (CV%) étaient < 10 %.

Mesure des niveaux d'IL-1β dans les échantillons de GCF

Les niveaux d'IL-1β ont été mesurés par ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Cat No: E-EL-H0149). Les gammes de dosage pour l'IL-1β étaient de 7,81 à 500 pg/ml ; la sensibilité, 4,69 pg/ml, les coefficients de variance intra et inter dosage (CV%) étaient < 10 %.

Mesure des niveaux de FGF dans les échantillons de GCF

Les niveaux de FGF ont été mesurés par ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Cat No: E-EL-H0074). Les plages de dosage pour le FGF étaient de 31,25 à 2000 pg/ml; la sensibilité, 18,75 pg/ml, les coefficients de variance intra et inter dosage (CV%) étaient < 10 %.

Analyses statistiques

La normalité de la distribution des variables continues a été testée par le test de Shapiro-Wilk. Les statistiques descriptives ont été présentées sous forme de moyenne et d'écart type (moyenne ± écart type) pour les variables distribuées paramétriques et médiane (écart interquartile) pour les variables distribuées non paramétriques.

Le test du chi carré a été utilisé pour analyser les associations entre les variables catégorielles. Le test t de Student pour les variables numériques à distribution normale et le test u de Mann Whitney pour les variables numériques à distribution non normale ont été effectués pour comparer 2 groupes indépendants pour les données numériques. Le test de Freidman a été réalisé à différents moments avec des variables non paramétriques. Des tests de comparaison multiple de Dunn ont été effectués pour des analyses de comparaison multiple post hoc par paires.

L'analyse statistique a été effectuée avec SPSS pour Windows version 24.0 et la valeur P <0,05 a été acceptée comme statistiquement significative.