Niet-chirurgische parodontale behandeling en periostinespiegels

De observationele prospectieve studie was opgezet om periostineveranderingen in de loop van de tijd te karakteriseren na niet-chirurgische parodontale behandeling in serum en GCF in de afdeling Parodontologie van de Faculteit der Tandheelkunde aan de Hatay Mustafa Kemal University, Hatay, Turkije. Het onderzoeksprotocol is goedgekeurd door de ethische commissie voor het gebruik van menselijke proefpersonen in onderzoek van Hatay Mustafa Kemal University (protocol nr.: 2019/118). De studie werd uitgevoerd in overeenstemming met de principes van de Verklaring van Helsinki en uitgevoerd in CONSORT-richtlijnen (Schulz, Altman, & Moher, 2010). Dit studieproject werd financieel ondersteund door Hatay Mustafa Kemal University Scientific Research Projects Coordinator (19M051).

Individuen werden van december 2019 tot en met augustus 2021 in het onderzoek opgenomen. Schriftelijke geïnformeerde toestemming werd verkregen van elke deelnemer vóór het klinisch parodontaal onderzoek.

Studie Bevolking

Achtenveertig volwassen personen namen deel aan het onderzoek. Deelnemers werden gerekruteerd in 2 op geslacht afgestemde groepen met elk 24 deelnemers: parodontaal gezonde (PH) en parodontitis (P) groepen. In overeenstemming met de demografische variabelen van de patiënten in de P-groep, werden de patiënten in de PH-groepen opgenomen.

Parodontale parameters

Parodontale klinische parameters werden geregistreerd door een enkele gekalibreerde onderzoeker (k = 0,95) (auteur AS). Intra-examinatorovereenkomst werd bepaald voor CAL. De reproduceerbaarheid binnen de onderzoeker werd bepaald door middel van herhaalde onderzoeken van 10 proefpersonen met een interval van een uur. Klinische parodontale metingen werden beoordeeld met behulp van de volgende parodontale metingen voor parodontale diagnose in beide groepen en ook in de 1e maand, 3e maand na niet-chirurgische parodontale behandeling in de parodontitisgroep.

De metingen werden uitgevoerd met behulp van een Williams parodontale sonde (Hu-Friedy, Chicago, IL, VS) en omvatten sondeerpocketdiepte (PPD), klinisch hechtingsniveau (CAL), plaque-index (PI) (Silness & Loe, 1964), gingivale index (GI) (Loe & Silness, 1963), en percentage bloeding bij sonderen (BOP) (Ainamo & Bay, 1975) op zes plaatsen per tand (mesio-buccaal, buccaal, disto-buccaal, mesio-linguaal, linguaal en disto -linguaal) op elke tand.

Diagnose van parodontale ziekten en aandoeningen werd gemaakt volgens de radiografische en klinische diagnostische criteria voorgesteld door de 2017 World Workshop on Classification of Periodontal and Peri-implant Diseases and Conditions (Caton et al., 2018). Personen met BOP < 10% zonder aanhechtingsverlies en radiologisch botverlies werden beschouwd als personen met parodontale gezondheid (Tonetti & Sanz, 2019). De criteria voor parodontitis omvatten patiënten met CAL ≥ 5 mm op twee of meer interproximale plaatsen en PPD ≥ 6 mm op één of meer interproximale plaatsen. Alleen stadium III-IV (ernstige) parodontitis werd opgenomen in de huidige studie (Tonetti, Greenwell, & Kornman, 2018).

Parodontale interventie

Patiënten met parodontitis werden behandeld met volledige desinfectie van de mond in één fase. Desinfectie van de volledige mond omvatte schalen van de volledige mond en procedures voor wortelplanning binnen 24 uur in twee sessies. Elke sessie werd op twee opeenvolgende dagen gedurende 60 minuten geoefend. Subgingivale irrigatie en tongpoetsen werden gedurende 1 minuut uitgevoerd met 1% CHX-gel. Mondspoelingen met 0,12% CHX werden uitgevoerd gedurende 30 seconden aan het begin en aan het einde van elke sessie en twee keer per dag gedurende 2 weken (Quirynen et al., 1995).

Verzameling van GCF-monsters

GCF-monsters werden verzameld na 8 uur nachtvasten en één week na klinische parodontale metingen bij aanvang in twee groepen en vervolgens op de 24e uur, 48e uur, 14e dag, 1e maand, 3e maand na niet-chirurgische parodontale behandeling (Akalin, Baltacioglu , Alver, & Karabulut, 2007). De monsters werden verzameld vanaf de tandzijde met PPD's ≥6 mm en BOP-positief bij patiënten met parodontitis. Per deelnemer werden zes GCF-monsters genomen. Monsters werden verzameld van een mesiale en een distale plaats op elk van de drie tanden (snijtanden, premolaren en kiezen). Verontreiniging met speeksel werd voorkomen door isolatie met wattenrollen en het voorzichtig aan de lucht drogen van het bemonsteringsgebied. Monsters verontreinigd met speeksel of bloed waren niet inbegrepen. Tandplak werd voorzichtig verwijderd uit het bemonsteringsgebied door de parodontale curette. De monsters werden binnen 30 seconden verzameld met gestandaardiseerde papieren stroken (Periopaper; Oraflow Inc., Plainview, NY) volgens de orifice-methode (Rudin, Overdiek, & Rateitschak, 1970) De volumes werden gemeten op een vooraf gekalibreerd elektronisch meetinstrument voor tandvleesvloeistof (Oraflow Inc., Plainview, NY)|| (Chapple, Landini, Griffiths, Patel, & Ward, 1999). De waarden van het elektronische apparaat werden gerefereerd aan een standaardcurve en omgezet in een werkelijk volume (µl). Alle Periopaper-strips werden samengevoegd in plastic Eppendorf-microcentrifugebuisjes. Ze werden bewaard bij -80 °C tot de biochemische analyse.

Alle monsters werden ontdooid en 375 μl fosfaatgebufferde zoutoplossing (pH: 7,00, 10 mM Na2P04, 137 mM NaCl en 2,7 mM KCl) werd toegevoegd aan de eppendorfbuisjes die de monsterstrips bevatten. Vervolgens werden de monsters gedurende 30 minuten bij kamertemperatuur geëlueerd en (Chapple et al., 1997) gedurende 15 minuten bij 4°C bij 11.000 x g gecentrifugeerd. De meting van periostine-, IL-1β- en FGF-niveaus werd getest.

Verzameling van serummonsters

Bij de patiënten werden perifere veneuze bloedmonsters genomen. Het serum werd van de cellen gescheiden door centrifugatie bij 2000 rpm gedurende 10 min, waarna het werd bewaard bij -80°C, totdat de biochemische analyse was uitgevoerd.

Laboratoriumanalyses

Periostin-, IL-1β- en FGF-niveaus werden gemeten met de enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA) met behulp van in de handel verkrijgbare kits bij een golflengte van 450 nm in ELISA Reader (Thermo Fisher Scientific Multiscan Go-Finland).

Meting van periostineniveaus in GCF-monsters

Periostin-niveaus werden gemeten door ELABSCIENCE Human POSTN / OSF-2 (Kit Cat No: E-EL-H6113). De testbereiken voor periostine waren 3,13-200 ng/ml; gevoeligheid, 1,88 ng/ml, intra- en inter-assay variantiecoëfficiënten (CV%) waren < 10%.

Meting van IL-1β-niveaus in GCF-monsters

IL-1β-niveaus werden gemeten met ELABSCIENCE Human IL-1β (Kit Cat No: E-EL-H0149). De testbereiken voor de IL-1β waren 7,81-500 pg/ml; gevoeligheid, 4,69 pg/ml, intra- en inter-assay variantiecoëfficiënten (CV%) waren < 10%.

Meting van FGF-niveaus in GCF-monsters

FGF-niveaus werden gemeten door ELABSCIENCE Human FGF21 (Kit Cat No: E-EL-H0074). De testbereiken voor de FGF waren 31,25-2000 pg/ml; gevoeligheid, 18,75 pg/ml, intra- en inter-assay variantiecoëfficiënten (CV%) waren < 10%.

Statistische analyse

De normaliteit van de verdeling van continue variabelen werd getest met de Shapiro-Wilk-test. Beschrijvende statistieken werden gepresenteerd als gemiddelde en standaarddeviatie (gemiddelde ± sd) voor parametrische verdeelde variabelen en mediaan (interkwartielbereik) voor de niet-parametrische verdeelde variabelen.

De chikwadraattoets werd gebruikt om de associaties tussen categorische variabelen te analyseren. De Student t-toets voor normaal verdeelde numerieke variabelen en de Mann Whitney u-toets voor niet-normaal verdeelde numerieke variabelen werden uitgevoerd om 2 onafhankelijke groepen voor numerieke gegevens te vergelijken. Freidman-test werd uitgevoerd voor verschillende tijdstippen met niet-parametrische variabelen. Dunn meervoudige vergelijkingstests werden uitgevoerd voor post hoc paarsgewijze meervoudige vergelijkingsanalyses.

Statistische analyse werd uitgevoerd met SPSS voor Windows versie 24.0 en P-waarde <0,05 werd geaccepteerd als statistisch significant.