자해 행동의 유전학

이론적 배경 비자살적 자해(NSSI)의 원인은 아직까지 설명되지 않았다. 지금까지 수행된 연구는 유전적 요인과 환경적 요인을 모두 나타냅니다. NSSI는 다유전자성 장애라고 제안되었습니다. 세로토닌성 시스템과 내인성 오피오이드 시스템의 두 가지 신경전달물질 시스템이 NSSI의 병인학에서 주요 후보 시스템입니다.

세로토닌 시스템은 NSSI의 동반이환 장애(우울증, 불안…)에서 중요합니다. 또한 NSSI에 대한 직접적인 참여의 중요성이 커지고 있습니다. 세로토닌의 전구체인 트립토판의 결핍은 NSSI의 빈도 증가와 관련이 있습니다. 세로토닌 수송 유전자 SLC6A4(VNTR STin2)의 가변 수 탠덤 반복 다형성은 한 연구에서 NSSI가 빈번한 장애인 경계선 성격 장애와 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 세로토닌 합성의 주요 효소인 트립토판 하이드록실라제 효소 유전자의 몇 가지 중요한 다형성입니다. 다형성 rs1799913은 우울증 및 자살 행동과 관련이 있습니다. 이 다형성은 다른 다형성(예: rs4537731, rs7933505), 일배체형의 일부. 이 일배체형은 이미 경계선 성격 장애와의 연관성을 일부 보여주었습니다.

내인성 오피오이드(EO)의 농도 변화가 NSSI와 연관될 수 있다는 증거도 증가하고 있습니다. NSSI를 가진 개인의 주류에서 상당히 낮은 β-엔돌핀 및 메트-엔케팔린 값이 입증되었습니다. 최근 연구에 따르면 건강한 대조군과 비교할 때 NSSI가 있는 청소년의 기저 β-엔돌핀 수치가 현저히 낮습니다. 나오미 I. 아이젠버거(Naomi I. Eisenberger)는 "감정적" 통증과 관련하여 내인성 오피오이드의 다형성을 연구하는 리더입니다. 육체적 고통에 대한 역치가 낮은 사람들은 또한 정서적 고통에 더 민감하다고 설명했습니다. 뮤-오피오이드 수용체 OPRM1(A118G; rs1799971)에 대한 유전자의 다형성이 신체적 통증에 대한 변경된 민감도, 통증 인식 및 아편제 진통제에 대한 반응에 상당한 영향을 미친다는 수많은 증거가 있습니다. 사회적 거부(즉, "감정적" 고통에 대한 모델에서)에 대한 G 대립 유전자 보인자의 상당히 증가된 민감도가 입증되었습니다. 갈망과 중독에 대한 rs1799971 다형성의 영향에 대한 많은 연구가 수행되었습니다. NSSI의 이론적 중독성 배경과 신체적, 정서적 고통의 상호 연결성 및 rs1799971 다형성의 역할을 고려할 때, 이 다형성은 NSSI에서 중요한 후보 다형성입니다. 개별 중독의 경우 상이하고 부분적으로 상충되는 결과가 나타납니다. 다양한 연구에서 G 대립 유전자가 다양한 중독의 위험 요소임을 확인한 반면, 다른 연구에서는 G 대립 유전자 보유자에서 중독 위험이 감소하거나 영향을 나타내지 않았습니다. 이에 2016년에는 백인 인구 9064명을 대상으로 1차 공동 분석을 실시했다. 이 큰 유럽 샘플에서 G 대립유전자는 일반적으로 중독에 대한 중요한 보호 요인(OR = 0.90; 신뢰 구간 95%(0.83 - 0.97); p = 0.0095)인 것으로 입증되었습니다. 갈망에 대한 직접적인 연구와 rs1799971이 갈망에 미치는 영향은 드물고 모순적입니다. NSSI의 발달에 대한 잠재적인 유전적 영향에 대한 연구는 거의 없었으며 rs1799971은 이 분야에서 연구된 적이 없는 것으로 보입니다.

항정신병 약물의 주요 표적인 도파민 수용체 D2는 중독 연구에서도 중요합니다. 도파민 수용체 2 유전자의 가장 유명한 다형성은 Taq1A(TaqIA)(rs1800497) 다형성입니다. rs1800497의 두 대립유전자는 A1과 A2로 알려져 있습니다. 대립유전자 A1은 한 연구에서 전형적인 행동 중독인 병적 도박과 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 또한 일부 다른 연구에서는 충동성 및 중독성 행동과 관련이 있습니다. A1 대립유전자는 경계성 성격 특성과도 연관되어 있습니다. G-단백질은 수많은 수용체의 적절한 활성과 연결되어 있습니다. G 단백질 베타 3 유전자(GNbeta3)의 다형성 C825T(rs5443)는 일부 연구에서 우울증과 관련이 있습니다. 한 연구에서 T 대립형질 보유자는 다른 우울 환자보다 통계적으로 NSSI 위험이 더 높았습니다.

NSSI 환자의 통증 인식 감소 및 통증 역치가 더 높은 것으로 나타났습니다.

윤리 위원회 승인 및 프로젝트 등록 이 연구는 슬로베니아 공화국 의료 윤리 위원회(번호 69/06/13)의 승인을 받았습니다. 2013년 8월 1일에 슬로베니아 마리보르 대학 의료 센터의 내부 과학 연구 및 개발 프로젝트로 선택 및 등록되었습니다(프로젝트 번호 IRP-2013/01-07).

설문지 임상 샘플 및 원래 대조군의 모든 청소년은 STAI(State-Trait Anxiety Inventory for Adults)의 슬로베니아어 버전의 자기 평가 설문지와 슬로베니아어로 번역된 다음 설문지를 작성했습니다. Barratt Impulsiveness Scale(BIS- 11), BPD(MSI-BPD)용 MacLean 스크리닝 도구, 조기 외상 인벤토리 자가 보고서-간단한 양식(ETISR-SF). STAI는 두 가지 형태의 불안을 측정합니다. "상태 불안"은 현재 상태, 즉 주어진 사건에서 개인이 느끼는 불안의 수준을 측정합니다. "특성 불안"은 개인의 장기적인 상태를 의미합니다. BIS-11은 아마도 충동 측정에 가장 자주 사용되는 도구일 것입니다. MSI-BPD는 청소년기에 경계선 인격 장애를 찾기 위해 사용되는 선별 설문지입니다. ETISR-SF는 일반적인 외상 사건뿐만 아니라 신체적, 정서적, 성적 학대를 포함한 어린 시절의 외상을 측정합니다.

NSSI를 식별하기 위해 조사관은 임상 샘플에 대해 ISAS(Inventory of Statements about Self-Injury)의 슬로베니아어 번역과 SICQ(Self-Injury Craving Questionnaire)의 슬로베니아어 번역을 사용했습니다. ISAS는 두 부분으로 구성된 설문지입니다. 1부는 자해행위에 대한 12문항, 2부는 NSSI의 13가지 기능에 대한 문항으로 구성되어 있다. SICQ에는 NSSI에 대한 갈망에 대한 7가지 질문이 포함되어 있습니다.

DNA 추출 및 유전자형 NSSI의 유전학에 대한 연구는 거의 없습니다. 이 정보의 도움으로 일부 후보 유전자 다형성이 선택되었습니다. 따라서 연구의 후보 유전적 다형성은 중독 및 동반 질환(우울증, 경계선 성격 장애 등)의 유전학에 대한 정보의 도움으로 선택되었습니다.

유전자형 분석을 위한 DNA는 TRI-시약(Sigma, Steinheim, Germany)을 사용하여 제조업체의 지침에 따라 말초 혈액 단핵 세포에서 추출했습니다. 추출된 DNA의 품질과 농도는 agarose gel 전기영동과 SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, USA) spectrophotometer를 이용하여 확인하였다.

다형성의 유전자형 분석을 위해 연구자들은 먼저 실시간 중합효소 연쇄 반응(qPCR)을 수행한 다음 고해상도 용융(HRM) 또는 제한 단편 길이 다형성(RFLP) 방법을 수행했습니다. qPCR은 다음과 같이 수행되었다: 95°C에서 10분 동안 변성, 곱셈, 95°C 10초, 60°C 15초, 72°C 10초의 45주기. HRM은 다음 프로토콜에서 만들어졌습니다: 95°C 1분, 40°C 1분, 60 - 90°C, 0,02°C/s 및 40°C에서 10초 동안 냉각. HRM 반응은 LightCycler® 480(Roche)으로 이루어졌으며 LC480 HRM Master Mix(Roche)가 사용되었습니다. 연구자들은 용융 곡선에서 유전자형을 분석했습니다(표 1). RFLP 프로토콜에서 qPCR의 산물은 New England Biolabs의 올바른 제한 효소와 함께 배양되었습니다(표 1). 분석은 아가로스 겔 전기영동(2% 아가로스 겔, 트리스 보레이트 EDTA 완충액)으로 수행되었습니다. DNA 샘플은 0.25% xylene cyanol과 40% sucrose와 혼합하였다. 전기영동은 150V에서 20분 동안 수행되었습니다. 마지막으로 아가로스 겔을 UV 조명 아래에서 분석했습니다.

유전자; 유전적 다형성; 프라이머의 서열; 온도; 유전자형 분석법; 제한 효소:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60℃; HRM; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAGTAAGAGCAC; 60℃; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC, AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60℃; HRM; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65℃; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65℃; RFLP; TaqI.
6. GNB3; RS5443; CATCATCTGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60℃; HRM; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5 °C; PCR; /.

통계 분석 데이터는 IBM SPSS Statistics 프로그램 패키지(IMB Inc., Armonk, New York)를 사용하여 분석되었습니다. P ≤ 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.

임상 샘플과 원래 대조군에서 충격을 받고 학대받는 청소년의 비율을 Fisher의 정확 테스트로 비교했습니다. 모든 연속 변수는 정규성에 대한 Kolmogorov-Smirnov 테스트를 사용하여 먼저 정규성에 대해 평가되었습니다. NSSI 발병 연령과 평생 NSSI의 총 수 사이의 상관관계는 Spearman's correlation을 사용하여 결정되었습니다. 삶의 총 자해 횟수(NSSI)와 SICQ 설문지의 값 사이의 관계도 Spearman의 상관 분석을 사용하여 평가되었습니다. SICQ 설문지의 가치와 NSSI의 생각에서 NSSI까지의 시간, 유전자형과 삶의 총 NSSI 수의 관계는 모두 Kruskal-Wallis H-test를 사용하여 평가되었습니다. Mann-Whitney U-test는 유전자형과 NSSI 발병 연령 사이의 관계를 결정하는 데 사용되었습니다. ETISR-SF 설문지 / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT의 매개 변수와 후보 유전자형을 독립 변수로, NSSI를 종속 변수로 사용하여 다양한 로지스틱 회귀 모델이 만들어졌습니다. rs1799971/rs1800497 유전자형 자체 및 갈망 변수의 조정되지 않은 분석은 Mann-Whitney U-test를 사용하여 수행되었습니다. NSSI(SICQ)에 대한 갈망 수준에 대한 rs1799971/rs1800497 유전자형의 기여도는 일반화된 선형 모델을 사용하여 연구되었고 STAI STATE 및 STAI TRAIT/ETISR - SF로 조정되었습니다. 후보 유전자형을 독립 변수로 하고 NSSI 동안 통증 지각을 종속 변수로 하는 로지스틱 회귀 모델이 만들어졌습니다. 통증 지각에 대한 rs1799971/rs1800497 유전자형의 기여도는 STAI STATE/STAI TRAIT/MSI - BPD/ ETISR - SF로 조정된 로지스틱 회귀 모델을 사용하여 연구되었습니다. NSSI 동안 통증 인식과 갈망(SICQ) 사이의 관계는 Mann-Whitney U-test를 사용하여 평가되었습니다.

연구의 목적 및 가설 연구의 목적은 슬로베니아 청소년에서 DSM-5에서 제안된 연구 기준으로 진단된 NSSI의 병인에 대한 첫 번째 G x E 연구를 수행하는 것이었습니다. 연구자들은 NSSI가 있는 청소년에서 rs1799971의 첫 번째 연관 연구를 수행하고 NSSI의 중독성 특성 및 NSSI에 대한 갈망과 OPRM1 유전자의 연결을 연구하기를 원했습니다. 목표는 또한 NSSI를 가진 청소년 샘플에서 Joyce와 그의 대학(우울증 환자에서 rs5443과 NSSI의 연관)의 결과를 복제하는 것이었습니다.

연구자들은 NSSI가 후보 다형성 중 하나 또는 후보 다형성의 조합과 연관될 수 있다는 가설을 세웠습니다. 또한 연구자들은 NSSI와 관련된 유전적 다형성이 외상을 입은 개인의 NSSI와 가장 관련이 있고 NSSI가 더 높은 충동성과 관련이 있다는 가설을 세웠습니다.