Genetica del comportamento autolesionistico

Contesto teorico L'eziologia dell'autolesionismo non suicidario (NSSI) non è stata ancora spiegata. Gli studi che sono stati condotti finora indicano sia fattori genetici che ambientali. È stato suggerito che l'ANS sia un disturbo poligenico. Due sistemi di neurotrasmettitori, il sistema serotoninergico e il sistema endogeno degli oppioidi, sono i principali sistemi candidati nell'eziologia dell'ANS.

Il sistema della serotonina è importante nei disturbi in comorbidità dell'ANS (depressione, ansia...). C'è anche un'importanza crescente del suo coinvolgimento diretto in NSSI. La carenza di triptofano, un precursore della serotonina, è stata collegata all'aumento della frequenza di NSSI. Il polimorfismo a ripetizione tandem a numero variabile del gene del trasportatore della serotonina - SLC6A4 (VNTR STin2) è stato associato a disturbo borderline di personalità, un disturbo con frequente NSSI, in uno studio. Sono presenti alcuni importanti polimorfismi del gene per l'enzima triptofano idrossilasi, il principale enzima nella sintesi della serotonina. Il polimorfismo rs1799913 è stato associato alla depressione e al comportamento parasuicida. Questo polimorfismo è, insieme ad altri polimorfismi (ad es. rs4537731, rs7933505), una parte di un aplotipo. Questo aplotipo ha già mostrato alcune connessioni con il disturbo borderline di personalità.

C'è anche una crescente evidenza che i cambiamenti nella concentrazione di oppioidi endogeni (EO) potrebbero essere associati a NSSI. Sono stati dimostrati valori significativamente più bassi di β-endorfina e met-encefalina nel liquor di individui con NSSI. Uno studio recente ha mostrato livelli basali di β-endorfina significativamente più bassi negli adolescenti con NSSI, rispetto ai controlli sani. Naomi I. Eisenberger è leader nello studio dei polimorfismi degli oppioidi endogeni in combinazione con il dolore "emotivo". Le persone con una soglia più bassa per il dolore fisico hanno anche descritto una maggiore sensibilità al dolore emotivo. Esistono numerose prove dell'effetto significativo del polimorfismo del gene per il recettore mu-oppioide OPRM1 (A118G; rs1799971) sull'alterata sensibilità al dolore fisico, percezione del dolore e risposta agli analgesici oppiacei. È stata dimostrata una sensibilità significativamente maggiore dei portatori dell'allele G al rifiuto sociale (cioè su un modello per il dolore "emotivo"). Sono stati condotti numerosi studi sull'impatto del polimorfismo rs1799971 sul desiderio e sulla dipendenza. Dato il background teorico di dipendenza della NSSI e l'interconnessione del dolore fisico ed emotivo e il ruolo del polimorfismo rs1799971, questo polimorfismo è un importante polimorfismo candidato nella NSSI. Per le dipendenze individuali compaiono risultati diversi, in parte contrastanti. Vari studi hanno confermato l'allele G come fattore di rischio per varie dipendenze, mentre altri non hanno dimostrato alcun impatto o hanno riscontrato un ridotto rischio di dipendenza nei portatori dell'allele G. Così, nel 2016, è stata effettuata la prima analisi collaborativa in cui sono stati inclusi 9064 soggetti della popolazione caucasica. In questo ampio campione europeo, l'allele G si è rivelato un fattore protettivo significativo (OR = 0,90; intervallo di confidenza 95% (0,83 - 0,97); p = 0,0095) per la dipendenza in generale. Gli studi diretti sul craving e sull'impatto di rs1799971 sul craving sono rari e contraddittori. C'è stata poca ricerca sulle potenziali influenze genetiche sullo sviluppo di NSSI e rs1799971 non sembra essere stato studiato in questo campo.

L'obiettivo principale degli antipsicotici, il recettore della dopamina D2, è importante anche nella ricerca sulla dipendenza. Il polimorfismo più famoso del gene del recettore della dopamina 2 è il polimorfismo Taq1A (TaqIA) (rs1800497). Sono noti due alleli di rs1800497: A1 e A2. L'allele A1 è stato associato al gioco d'azzardo patologico, una tipica dipendenza comportamentale, in uno studio. È stato anche associato all'impulsività e al comportamento di dipendenza in alcuni altri studi. L'allele A1 è stato anche associato a tratti di personalità borderline. Le proteine ​​G sono state collegate alla corretta attività di numerosi recettori. Il polimorfismo C825T (rs5443) del gene beta 3 della proteina G (GNbeta3) in alcune ricerche è stato collegato alla depressione. In uno studio, i portatori dell'allele T avevano un rischio statisticamente più elevato di NSSI rispetto ad altri pazienti depressi.

È stata dimostrata una ridotta percezione del dolore e una soglia del dolore più elevata nelle persone con NSSI.

Approvazione del Comitato Etico e registrazione del progetto Lo studio è stato approvato dal Comitato Etico Medico della Repubblica di Slovenia (numero 69/06/13). È stato scelto e registrato come progetto interno di ricerca scientifica e sviluppo del Centro Medico Universitario di Maribor, Slovenia, il 1.8.2013 (numero progetto IRP-2013/01-07).

Questionari Tutti gli adolescenti del campione clinico e del gruppo di controllo originale hanno compilato la versione slovena del questionario di autovalutazione dello State-Trait Anxiety Inventory for Adults (STAI) e i seguenti questionari, tradotti in sloveno: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11), MacLean Screening Instrument for BPD (MSI-BPD), Early Trauma Inventory Self Report-Short Form (ETISR-SF). Lo STAI misura due forme di ansia. L'"ansia di stato" misura lo stato attuale, cioè il livello di ansia che l'individuo prova davanti a un dato evento. "L'ansia di tratto" si riferisce allo stato a lungo termine dell'individuo. BIS-11 è probabilmente lo strumento più utilizzato per la misurazione dell'impulsività. Il MSI-BPD è un questionario di screening utilizzato per la ricerca del disturbo borderline di personalità nell'adolescenza. ETISR-SF misura il trauma infantile, compresi gli abusi fisici, emotivi e sessuali, nonché gli eventi traumatici generali.

Al fine di identificare la NSSI, i ricercatori hanno utilizzato la traduzione slovena dell'Inventario delle dichiarazioni sull'autolesionismo (ISAS) e la traduzione slovena del Self-Injury Craving Questionnaire (SICQ) per il campione clinico. L'ISAS è un questionario composto da due parti. La prima parte è composta da 12 domande sul comportamento autolesionistico e la seconda parte da domande su 13 funzioni dell'ANS. Il SICQ contiene 7 domande sul desiderio di NSSI.

Estrazione del DNA e genotipizzazione C'è poca ricerca sulla genetica dell'ANS. Alcuni polimorfismi genetici candidati erano stati scelti con l'aiuto di queste informazioni. Prevalentemente, i polimorfismi genetici candidati nello studio sono stati quindi scelti con l'aiuto di informazioni sulla genetica della dipendenza e dei disturbi comorbidi (depressione, disturbo borderline di personalità, ...).

Il DNA per la genotipizzazione è stato estratto dalle cellule mononucleate del sangue periferico utilizzando il reagente TRI (Sigma, Steinheim, Germania) secondo le istruzioni del produttore. La qualità e la concentrazione del DNA estratto sono state controllate utilizzando l'elettroforesi su gel di agarosio e lo spettrofotometro SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, USA).

Per la genotipizzazione dei polimorfismi, i ricercatori hanno prima eseguito la reazione a catena della polimerasi in tempo reale (qPCR) e poi la fusione ad alta risoluzione (HRM) o il metodo del polimorfismo della lunghezza del frammento di restrizione (RFLP). La qPCR è stata eseguita come segue: denaturazione a 95 °C per 10 min, moltiplicazione, 45 cicli di 95°C 10 s, 60°C 15 s, 72°C 10 s. L'HRM è stato eseguito con il seguente protocollo: 95°C 1 min, 40°C 1 min, 60 - 90°C a 0,02 °C/s e raffreddamento a 40°C per 10 s. La reazione HRM è stata effettuata con il LightCycler® 480 (Roche) ed è stato utilizzato il Master Mix LC480 HRM (Roche). I ricercatori hanno analizzato i genotipi dalle curve di fusione (TABELLA 1). Nel protocollo RFLP, il prodotto della qPCR è stato incubato con il giusto enzima di restrizione del New England Biolabs (TABELLA 1). L'analisi è stata effettuata con elettroforesi su gel di agarosio (gel di agarosio al 2%, tampone tris borato EDTA). I campioni di DNA sono stati miscelati con lo 0,25% di xilene cianolo e il 40% di saccarosio. L'elettroforesi è stata eseguita a 150 V per 20 minuti. Al termine, il gel di agarosio è stato analizzato alla luce UV.

Gene; polimorfismo genetico; sequenza del primer; temperatura; metodo di genotipizzazione; enzima di restrizione:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60 °C; gestione delle risorse umane; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60 °C; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC, AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60 °C; gestione delle risorse umane; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTTGA; 65 °C; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65 °C; RFLP; TaqI.
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60 °C; gestione delle risorse umane; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5 °C; PCR; /.

Analisi statistica I dati sono stati analizzati utilizzando il pacchetto di programmi IBM SPSS Statistics (IMB Inc., Armonk, New York). P ≤ 0,05 è stato considerato statisticamente significativo.

Il confronto della quota di adolescenti traumatizzati e abusati nel campione clinico e nel gruppo di controllo originario è stato effettuato con il test esatto di Fisher. Tutte le variabili continue sono state prima valutate per la normalità utilizzando il test di normalità di Kolmogorov-Smirnov. La correlazione tra l'età di insorgenza della NSSI e il numero totale di NSSI nella vita è stata determinata utilizzando la correlazione di Spearman. Anche la relazione tra il numero totale di autolesioni (NSSI) nella vita e il valore del questionario SICQ è stata valutata utilizzando l'analisi di correlazione di Spearman. La relazione tra il valore del questionario SICQ e il tempo che passa dal pensiero di NSSI a NSSI e anche il genotipo e il numero totale di NSSI nella vita sono stati entrambi valutati utilizzando il test H di Kruskal-Wallis. Il Mann-Whitney U-test era stato utilizzato per determinare la relazione tra genotipo ed età all'esordio della NSSI. Sono stati realizzati diversi modelli di regressione logistica con i parametri del questionario ETISR-SF / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT e i genotipi candidati come variabili indipendenti e NSSI come variabile dipendente. Le analisi non aggiustate del genotipo rs1799971 / rs1800497 stesso e della variabile craving sono state effettuate utilizzando il test U di Mann-Whitney. Il contributo del genotipo rs1799971 / rs1800497 al livello di craving per NSSI (SICQ) è stato studiato utilizzando modelli lineari generalizzati ed è stato adattato a STAI STATE e STAI TRAIT / ETISR - SF. Sono stati realizzati modelli di regressione logistica con genotipi candidati come variabili indipendenti e percezione del dolore durante NSSI come variabile dipendente. Il contributo del genotipo rs1799971 / rs1800497 alla percezione del dolore è stato studiato utilizzando modelli di regressione logistica adattati a STAI STATE / STAI TRAIT / MSI - BPD/ ETISR - SF. La relazione tra la percezione del dolore durante NSSI e il craving (SICQ) è stata valutata utilizzando il test U di Mann-Whitney.

Scopo dello studio e ipotesi Lo scopo della ricerca è stato quello di realizzare il primo studio G x E sull'eziologia della NSSI, diagnosticata con i criteri di ricerca proposti dal DSM-5, negli adolescenti sloveni. I ricercatori volevano realizzare il primo studio di associazione di rs1799971 negli adolescenti con NSSI e studiare la connessione del gene OPRM1 con le proprietà di dipendenza di NSSI e il desiderio di NSSI. L'obiettivo era anche quello di replicare i risultati di Joyce e dei suoi college (associazione di rs5443 e NSSI nei pazienti depressi) in un campione di adolescenti con NSSI.

I ricercatori hanno ipotizzato che NSSI potrebbe essere associato a uno dei polimorfismi candidati oa una combinazione di polimorfismi candidati. Inoltre i ricercatori hanno ipotizzato che i polimorfismi genetici associati alla NSSI siano i più connessi alla NSSI negli individui traumatizzati e che la NSSI sia associata a una maggiore impulsività.