自傷行為の遺伝学

理論的背景 非自殺性自傷行為 (NSSI) の病因はまだ説明されていません。 これまでに実施された研究は、遺伝的要因と環境的要因の両方を示しています。 NSSI は多遺伝子性疾患であることが示唆されています。 セロトニン作動性システムと内因性オピオイド システムの 2 つの神経伝達物質システムは、NSSI の病因における主な候補システムです。

セロトニン システムは、NSSI の併存疾患 (うつ病、不安神経症など) において重要です。 また、NSSI に直接関与することの重要性も高まっています。 セロトニンの前駆体であるトリプトファンの欠乏は、NSSIの頻度の増加と関連しています。 セロトニントランスポーター遺伝子の可変数タンデムリピート多型 - SLC6A4 (VNTR STin2) は、ある研究で、頻繁に NSSI を伴う障害である境界性パーソナリティ障害と関連付けられています。 セロトニンの合成における主要な酵素であるトリプトファンヒドロキシラーゼ酵素の遺伝子には、いくつかの重要な多型があります。 ポリモーフィズム rs1799913 は、うつ病およびパラ自殺行為と関連付けられています。 このポリモーフィズムは、他のいくつかのポリモーフィズム (例: rs4537731、rs7933505)、ハプロタイプの一部。 このハプロタイプは、境界性パーソナリティ障害とのいくつかの関連性をすでに示しています。

内因性オピオイド (EO) の濃度の変化が NSSI に関連している可能性があるという証拠も増えています。 NSSI患者の酒中のβ-エンドルフィンおよびmet-エンケファリン値が有意に低いことが実証されています。 最近の研究では、健常対照者と比較した場合、NSSI の青年の基礎 β-エンドルフィン レベルが有意に低いことが示されています。 Naomi I. Eisenberger は、「感情的な」痛みと関連した内因性オピオイドの多型の研究におけるリーダーです。 身体的な痛みの閾値が低い人は、感情的な痛みにも敏感であると述べています。 μ-オピオイド受容体 OPRM1 (A118G; rs1799971) の遺伝子の多型が、物理的な痛みに対する感受性の変化、痛みの知覚、アヘン鎮痛薬への反応に大きな影響を与えることを示す多数の証拠があります。 G 対立遺伝子保有者は、社会的拒絶 (つまり、「感情的な」痛みのモデル) に対する感受性が大幅に高まることが実証されています。 rs1799971 ポリモーフィズムが渇望と依存症に与える影響について、多くの研究が行われてきました。 NSSI の理論的な中毒性の背景、身体的および感情的な痛みの相互関連性、および rs1799971 ポリモーフィズムの役割を考えると、このポリモーフィズムは NSSI の重要な候補ポリモーフィズムです。 個々の中毒については、異なる、部分的に矛盾する結果が表示されます。 さまざまな研究で、G 対立遺伝子がさまざまな依存症の危険因子であることが確認されていますが、G 対立遺伝子キャリアの影響を実証していないか、依存症のリスクが低下していることを発見した研究もあります。 したがって、2016 年には、白人集団の 9064 人の被験者が含まれる最初の共同分析が実施されました。 この大規模なヨーロッパのサンプルでは、​​G 対立遺伝子は一般的に依存症に対する有意な (OR = 0.90; 信頼区間 95 % (0.83 - 0.97); p = 0.0095) 保護因子であることが証明されました。 渇望と rs1799971 の渇望への影響に関する直接研究はまれであり、矛盾しています。 NSSI の発症に対する潜在的な遺伝的影響に関する研究はほとんどなく、rs1799971 はこの分野では研究されていないようです。

抗精神病薬の主な標的であるドーパミン受容体 D2 は、依存症の研究においても重要です。 ドーパミン受容体 2 遺伝子の最も有名な多型は、Taq1A (TaqIA) (rs1800497) 多型です。 rs1800497 には、A1 と A2 の 2 つの対立遺伝子が知られています。 ある研究では、対立遺伝子 A1 は、典型的な行動依存症である病的ギャンブルと関連付けられています。 また、他のいくつかの研究では、衝動性や中毒性行動とも関連しています。 A1 対立遺伝子は、境界性人格特性とも関連付けられています。 G - タンパク質は、多数の受容体の適切な活性と関連しています。 G タンパク質ベータ 3 遺伝子 (GNbeta3) の多型 C825T (rs5443) は、いくつかの研究でうつ病と関連付けられています。 ある研究では、T アレル保有者は、他のうつ病患者よりも統計的に NSSI のリスクが高かった.

NSSI患者では、痛みの知覚が低下し、痛みの閾値が高いことが示されています。

倫理委員会の承認とプロジェクトの登録 この研究は、スロベニア共和国の医療倫理委員会 (番号 69/06/13) によって承認されています。 これは、2013 年 8 月 1 日に、スロベニアのマリボル大学医療センターの内部科学研究および開発プロジェクトとして選択され、登録されました (プロジェクト番号 IRP-2013/01-07)。

アンケート 臨床サンプルと元の対照グループのすべての青年が、成人の状態特性不安インベントリー (STAI) のスロベニア語版の自己評価アンケートと、スロベニア語に翻訳された以下のアンケートに記入しました: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11)、BPD のマクリーン スクリーニング装置 (MSI-BPD)、早期外傷目録自己報告書 (ETISR-SF)。 STAI は 2 種類の不安を測定します。 「状態不安」は、現在の状態、つまり特定のイベントで個人が感じる不安のレベルを測定します。 「特性不安」とは、個人の長期的な状態を指します。 BIS-11 はおそらく、衝動性の測定に最も頻繁に使用される測定器です。 MSI-BPD は、青年期の境界性パーソナリティ障害を検索するために使用されるスクリーニング アンケートです。 ETISR-SF は、身体的、感情的、性的虐待、および一般的なトラウマ的出来事を含む子供時代のトラウマを測定します。

NSSI を特定するために、研究者は、自傷行為に関する声明の目録 (ISAS) のスロベニア語翻訳と、臨床サンプルの自傷行為への渇望に関する質問票 (SICQ) のスロベニア語翻訳を使用しました。 ISAS は 2 つの部分からなるアンケートです。 前半は自傷行為に関する 12 問、後半は NSSI の 13 の機能に関する問で構成されています。 SICQ には、NSSI への渇望に関する 7 つの質問が含まれています。

DNA 抽出とジェノタイピング NSSI の遺伝学に関する研究はほとんどありません。 この情報の助けを借りて、いくつかの候補遺伝子多型が選択されました。 そのため、主に、この研究で候補となる遺伝子多型は、依存症と併存疾患 (うつ病、境界性人格障害など) の遺伝学に関する情報を利用して選択されています。

ジェノタイピング用の DNA は、TRI 試薬 (Sigma、Steinheim、Germany) を製造元の指示に従って使用して、末梢血単核細胞から抽出されました。 抽出されたDNAの品質と濃度は、アガロースゲル電気泳動とSynergyTM 2（Biotek、Winooski、VT、USA）分光光度計を使用してチェックされました。

多型のジェノタイピングでは、研究者は最初にリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応 (qPCR) を実行し、次に高解像度融解 (HRM) または制限断片長多型 (RFLP) メソッドを実行しました。 qPCRは次のように実行されました:95°Cで10分間の変性、乗算、95°C 10秒、60°C 15秒、72°C 10秒の45サイクル。 HRM は次のプロトコルで作成されています: 95°C で 1 分、40°C で 1 分、0.02 °C/s で 60 ～ 90°C、40°C で 10 秒間冷却。 HRM 反応は LightCycler® 480 (Roche) で行われ、LC480 HRM Master Mix (Roche) が使用されています。 研究者は、融解曲線から遺伝子型を分析しました (表 1)。 RFLP プロトコールでは、qPCR の産物は New England Biolabs の適切な制限酵素と共にインキュベートされています (表 1)。 分析は、アガロースゲル電気泳動 (2% アガロースゲル、トリスホウ酸 EDTA 緩衝液) で行われました。 DNA サンプルは、0.25% キシレンシアノールおよび 40% スクロースと混合されました。 電気泳動は、150 V で 20 分間実行されています。 最後に、アガロース ゲルは、UV 光の下で分析されています。

遺伝子;遺伝子多型;プライマーの配列;温度;ジェノタイピング法;制限酵素:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT、GATCGTGATGGCCGTGAT; 60℃;人事管理; /。
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG、TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60℃; RFLP; Sau3AI。
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC、AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60℃;人事管理; /。
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC、CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65℃; RFLP; NlaIII。
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT、ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65℃; RFLP; TaqI。
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGCGGCATCACG、ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60℃;人事管理; /。
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA、TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65.5℃; PCR; /。

統計分析 データは、IBM SPSS Statistics プログラム パッケージ (IMB Inc.、アーモンク、ニューヨーク) を使用して分析されました。 P ≤ 0.05 は、統計的に有意であると見なされました。

臨床サンプルと元の対照群におけるトラウマと虐待を受けた青年の割合の比較は、フィッシャーの正確確率検定で行われました。 すべての連続変数は、正規性のコルモゴロフ-スミルノフ検定を使用して、正規性について最初に評価されました。 NSSI の発症年齢と生涯の NSSI の総数との相関関係は、Spearman の相関関係を使用して決定されました。 人生における自傷行為の総数 (NSSI) と SICQ アンケートの値との関係も、Spearman の相関分析を使用して評価されています。 SICQ アンケートの値と NSSI の考えから NSSI までの時間との関係、および遺伝子型と生涯の NSSI の総数の両方が、Kruskal-Wallis H 検定を使用して評価されています。 Mann-Whitney U 検定は、遺伝子型と NSSI の発症年齢との関係を決定するために使用されていました。 ETISR-SF アンケート / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT のパラメーターと、候補遺伝子型を独立変数、NSSI を従属変数とするさまざまなロジスティック回帰モデルが作成されました。 rs1799971 / rs1800497 遺伝子型自体と渇望変数の未調整分析は、Mann-Whitney U 検定を使用して実行されました。 rs1799971 / rs1800497 遺伝子型の NSSI (SICQ) に対する渇望のレベルへの寄与は、一般化された線形モデルを使用して研究され、STAI STATE および STAI TRAIT / ETISR - SF に調整されました。候補遺伝子型を独立変数とし、NSSI 中の疼痛知覚を従属変数とするロジスティック回帰モデルが作成されました。 rs1799971 / rs1800497 遺伝子型の疼痛知覚への寄与は、STAI STATE / STAI TRAIT / MSI - BPD / ETISR - SF に調整されたロジスティック回帰モデルを使用して研究されています。 NSSI 中の痛みの知覚と渇望 (SICQ) との関係は、Mann-Whitney U 検定を使用して評価されました。

研究の目的と仮説 研究の目的は、DSM-5 から提案された研究基準で診断された、スロベニアの青年における NSSI の病因に関する最初の G x E 研究を実施することでした。 研究者は、NSSI を持つ青年における rs1799971 の最初の関連研究を行い、OPRM1 遺伝子と NSSI の中毒性および NSSI への渇望との関係を研究したいと考えました。 目標は、ジョイスと彼の大学 (うつ病患者における rs5443 と NSSI の関連) の結果を、NSSI の青年のサンプルで再現することでもありました。

研究者らは、NSSI が候補多型の 1 つまたは候補多型の組み合わせと関連している可能性があるという仮説を立てました。 さらに、研究者は、NSSI に関連する遺伝子多型がトラウマを負った個人の NSSI に最も関連しており、NSSI はより高い衝動性と関連しているという仮説を立てました。