Genetik af selvskadende adfærd

Teoretisk baggrund Ætiologien af ​​Nonsuicidal Self-Injury (NSSI) er stadig ikke blevet forklaret. Undersøgelser, der er udført indtil nu, viser både genetiske og miljømæssige faktorer. Det er blevet foreslået, at NSSI er en polygen lidelse. To neurotransmittersystemer, det serotonerge system og det endogene opioidsystem, er de vigtigste kandidatsystemer i ætiologien af ​​NSSI.

Serotoninsystemet er vigtigt ved komorbide lidelser af NSSI (depression, angst ...). Der er også stigende betydning af dets direkte involvering i NSSI. Mangel på tryptofan, en forløber for serotonin, er blevet forbundet med stigende hyppighed af NSSI. Variabel-tal tandem gentagelse polymorfi af serotonin transporter genet - SLC6A4 (VNTR STin2) er blevet forbundet med borderline personlighedsforstyrrelse, en lidelse med hyppige NSSI, i en undersøgelse. Det er nogle vigtige polymorfier af genet for tryptophanhydroxylase-enzymet, hovedenzymet i syntesen af ​​serotonin. Polymorfien rs1799913 er blevet forbundet med depression og med parasuicidal adfærd. Denne polymorfi er sammen med nogle andre polymorfismer (f.eks. rs4537731, rs7933505), en del af en haplotype. Denne haplotype har allerede vist nogle forbindelser med borderline personlighedsforstyrrelse.

Der er også voksende bevis for, at ændringerne i koncentrationen af ​​endogene opioider (EO) kan være forbundet med NSSI. Signifikant lavere β-endorfin- og met-enkephalin-værdier i spiritus hos personer med NSSI var blevet påvist. En nylig undersøgelse har vist signifikant lavere basale β-endorfinniveauer hos unge med NSSI sammenlignet med raske kontroller. Naomi I. Eisenberger er førende i at studere polymorfier af endogene opioider i forbindelse med "følelsesmæssig" smerte. Mennesker med en lavere tærskel for fysisk smerte beskrev også en større følsomhed over for følelsesmæssig smerte. Der er talrige beviser for den signifikante effekt af genets polymorfi for mu-opioidreceptoren OPRM1 (A118G; rs1799971) på ændret følsomhed over for fysisk smerte, smerteopfattelse og respons på opiat-analgetika. En signifikant øget følsomhed af G-allelbærere over for social afvisning (dvs. på en model for "emotionel" smerte) er blevet påvist. En række undersøgelser er blevet udført om virkningen af ​​rs1799971 polymorfi på trang og afhængighed. I betragtning af den teoretiske vanedannende baggrund for NSSI og sammenhængen mellem fysisk og følelsesmæssig smerte og rollen af ​​rs1799971 polymorfisme, er denne polymorfi en vigtig kandidatpolymorfi i NSSI. For individuelle afhængigheder viser sig forskellige, til dels modstridende resultater. Forskellige undersøgelser har bekræftet G-allelen som en risikofaktor for forskellige afhængigheder, mens andre ikke har vist nogen påvirkning eller har fundet en reduceret risiko for afhængighed hos G-allelbærere. Således blev den første kollaborative analyse i 2016 udført, hvor 9064 forsøgspersoner fra den kaukasiske befolkning blev inkluderet. I denne store europæiske prøve viste G-allelen sig at være en signifikant (OR = 0,90; konfidensinterval 95 % (0,83 - 0,97); p = 0,0095) beskyttende faktor for afhængighed generelt. Direkte undersøgelser af trang og virkningen af ​​rs1799971 på trang er sjældne og modstridende. Der har været lidt forskning i potentielle genetiske påvirkninger på udviklingen af ​​NSSI, og rs1799971 ser ikke ud til at være blevet undersøgt på dette område.

Hovedmålet for antipsykotika, dopaminreceptoren D2, er også vigtigt i forskningen i afhængighed. Den mest berømte polymorfi af dopaminreceptor 2-genet er Taq1A (TaqIA) (rs1800497) polymorfi. To alleler af rs1800497 er kendt - A1 og A2. Allel A1 er blevet forbundet med patologisk gambling, en typisk adfærdsafhængig afhængighed, i en undersøgelse. Det er også blevet forbundet med impulsivitet og vanedannende adfærd i nogle andre undersøgelser. A1-allelen er også blevet forbundet med borderline personlighedstræk. G-proteiner er blevet forbundet med den korrekte aktivitet af adskillige receptorer. Polymorfi C825T (rs5443) af G-protein beta 3-genet (GNbeta3) har i nogle undersøgelser været forbundet med depression. I en undersøgelse havde T-allelbærerne en statistisk højere risiko for NSSI som andre depressive patienter.

Nedsat smerteopfattelse og en højere smertetærskel hos personer med NSSI er blevet vist.

Godkendelse af etisk udvalg og projektregistrering Undersøgelsen er godkendt af den medicinske etiske komité i Republikken Slovenien (nummer 69/06/13). Det er blevet valgt og registreret som et internt videnskabeligt forsknings- og udviklingsprojekt af University Medical Center Maribor, Slovenien, den 1.8.2013 (projektnummer IRP-2013/01-07).

Spørgeskemaer Alle unge fra den kliniske prøve og den oprindelige kontrolgruppe udfyldte den slovenske version af selvevalueringsspørgeskemaet fra State-Trait Anxiety Inventory for Adults (STAI) og følgende spørgeskemaer, oversat til slovensk: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11), MacLean Screening Instrument for BPD (MSI-BPD), Early Trauma Inventory Self Report-Short Form (ETISR-SF). STAI måler to former for angst. "Statsangst" måler den aktuelle tilstand, det vil sige niveauet af angst, som individet føler ved en given begivenhed. "Trætsangst" refererer til individets langsigtede tilstand. BIS-11 er nok det mest anvendte instrument til måling af impulsivitet. MSI-BPD er et screeningsspørgeskema, der bruges til at søge efter borderline personlighedsforstyrrelser i teenageårene. ETISR-SF måler barndomstraumer, herunder fysiske, følelsesmæssige og seksuelle overgreb, samt generelle traumatiske hændelser.

For at identificere NSSI brugte efterforskerne den slovenske oversættelse af Inventory of Statements about Self-Injury (ISAS) og den slovenske oversættelse af Self-Injury Craving Questionnaire (SICQ) til den kliniske prøve. ISAS er et spørgeskema bestående af to dele. Den første del består af 12 spørgsmål om selvskadende adfærd og den anden del af spørgsmål om 13 funktioner i NSSI. SICQ'en indeholder 7 spørgsmål om trangen til NSSI.

DNA-ekstraktion og genotypebestemmelse Der er lidt forskning om genetik af NSSI. Nogle genetiske kandidatpolymorfier var blevet valgt ved hjælp af denne information. Overvejende er de genetiske kandidatpolymorfismer i undersøgelsen derfor valgt ved hjælp af information om genetik af afhængighed og komorbide lidelser (depression, borderline personlighedsforstyrrelse, …).

DNA til genotypebestemmelse blev ekstraheret fra mononukleære celler fra perifert blod under anvendelse af TRI-reagens (Sigma, Steinheim, Tyskland) ifølge producentens instruktioner. Kvalitet og koncentration af ekstraheret DNA blev kontrolleret ved hjælp af agarosegelelektroforese og SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, USA) spektrofotometer.

Til genotypning af polymorfismer udførte efterforskerne først real-time polymerase-kædereaktionen (qPCR) og derefter højopløsningssmeltning (HRM) eller restriktionsfragmentlængde polymorfi (RFLP) metoden. qPCR blev udført som følger: denaturering ved 95 °C i 10 minutter, multiplikation, 45 cyklusser af 95 °C 10 s, 60 °C 15 s, 72 °C 10 s. HRM er lavet efter følgende protokol: 95°C 1 min, 40°C 1 min, 60 - 90°C ved 0,02°C/s og afkøling ved 40°C i 10 s. HRM-reaktionen er lavet med LightCycler® 480 (Roche), og LC480 HRM Master Mix (Roche) er blevet brugt. Forskerne har analyseret genotyperne fra smeltekurverne (TABEL 1). I RFLP-protokollen er produktet af qPCR'en blevet inkuberet med det rigtige restriktionsenzym fra New England Biolabs (TABEL 1). Analyse er blevet udført med agarosegelelektroforese (2 % agarosegel, trisborat EDTA-buffer). DNA-prøverne blev blandet med 0,25% xylencyanol og 40% saccharose. Elektroforese er blevet kørt ved 150 V i 20 minutter. Til sidst er agarosegelen blevet analyseret under UV-lys.

Gen; genetisk polymorfi; sekvens af primeren; temperatur; genotypemetode; restriktionsenzym:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60°C; HRM; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60°C; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAGCACTGCAGCGTGAC, AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60°C; HRM; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65 °C; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65 °C; RFLP; TaqI.
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60°C; HRM; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5 °C; PCR; /.

Statistisk analyse Dataene blev analyseret under anvendelse af IBM SPSS Statistics programpakke (IMB Inc., Armonk, New York). P ≤ 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

Sammenligningen af ​​andelen af ​​traumatiserede og misbrugte unge i den kliniske prøve og i den oprindelige kontrolgruppe er foretaget med Fishers eksakte test. Alle kontinuerte variabler blev først vurderet for normaliteten ved hjælp af Kolmogorov-Smirnov normalitetstest. Korrelation mellem alderen ved begyndelsen af ​​NSSI og det samlede antal NSSI i livet blev bestemt ved hjælp af Spearmans korrelation. Sammenhængen mellem det samlede antal selvskader (NSSI) i livet og værdien på SICQ-spørgeskemaet er også blevet vurderet ved hjælp af Spearmans korrelationsanalyse. Forholdet mellem værdien af ​​SICQ-spørgeskemaet og den tid, der går fra tanken om NSSI til NSSI og også genotype og det samlede antal NSSI i livet, er begge blevet vurderet ved hjælp af Kruskal-Wallis H-test. Mann-Whitney U-testen var blevet brugt til at bestemme forholdet mellem genotype og alderen ved begyndelsen af ​​NSSI. Der er lavet forskellige logistiske regressionsmodeller med parametre for ETISR-SF spørgeskemaet / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT og kandidatgenotyperne som uafhængige variable og NSSI som afhængig variabel. Ujusterede analyser af selve rs1799971 / rs1800497 genotypen og craving-variablen blev udført ved hjælp af Mann-Whitney U-test. Bidraget af rs1799971 / rs1800497 genotypen til niveauet af trang til NSSI (SICQ) blev undersøgt ved hjælp af generaliserede lineære modeller og blev justeret til STAI STATE og STAI TRAIT / ETISR - SF. Der er lavet logistiske regressionsmodeller med kandidatgenotyper som uafhængige variable og smerteopfattelse under NSSI som afhængig variabel. Bidraget af rs1799971 / rs1800497 genotypen til smerteopfattelse er blevet undersøgt ved hjælp af logistiske regressionsmodeller, der blev justeret til STAI STATE / STAI TRAIT / MSI - BPD/ETISR - SF. Forholdet mellem smerteopfattelse under NSSI og trang (SICQ) blev vurderet ved hjælp af Mann-Whitney U-test.

Formålet med undersøgelsen og hypoteserne Formålet med forskningen var at udføre det første G x E-studie af ætiologien af ​​NSSI, diagnosticeret med de foreslåede forskningskriterier fra DSM-5, hos slovenske unge. Efterforskerne ønskede at lave den første associationsundersøgelse af rs1799971 hos unge med NSSI og studere forbindelsen mellem OPRM1-genet med vanedannende egenskaber ved NSSI og trang til NSSI. Målet var også at replikere resultaterne af Joyce og hans colleges (associering af rs5443 og NSSI hos depressive patienter) i en prøve af unge med NSSI.

Efterforskerne har antaget, at NSSI kunne være forbundet med en af ​​kandidatpolymorfismer eller en kombination af kandidatpolymorfismer. Yderligere har efterforskerne antaget, at de genetiske polymorfier forbundet med NSSI er de mest forbundet med NSSI hos traumatiserede individer, og at NSSI er forbundet med højere impulsivitet.