Itseään vahingoittavan käyttäytymisen genetiikka

Teoreettinen tausta Nonsuicid Self-Injuryn (NSSI) etiologiaa ei ole vieläkään selvitetty. Tähän mennessä tehdyt tutkimukset osoittavat sekä geneettisiä että ympäristötekijöitä. On esitetty, että NSSI on polygeeninen sairaus. Kaksi välittäjäainejärjestelmää, serotonerginen järjestelmä ja endogeeninen opioidijärjestelmä, ovat tärkeimmät ehdokasjärjestelmät NSSI:n etiologiassa.

Serotoniinijärjestelmä on tärkeä NSSI:n samanaikaisissa sairauksissa (masennus, ahdistuneisuus…). Sen suoran osallistumisen merkitys NSSI:ssä on myös kasvava. Serotoniinin esiasteen tryptofaanin puute on yhdistetty NSSI:n lisääntymiseen. Serotoniinin kuljettajageenin SLC6A4 (VNTR STin2) vaihtuvalukuinen tandem-toistopolymorfismi on yhdistetty persoonallisuushäiriöön, joka on häiriö, johon liittyy usein NSSI, yhdessä tutkimuksessa. Nämä ovat joitakin tärkeitä polymorfismeja tryptofaanihydroksylaasientsyymin geenistä, joka on serotoniinin synteesin pääentsyymi. Polymorfismi rs1799913 on liitetty masennukseen ja parasuisidiseen käyttäytymiseen. Tämä polymorfismi on yhdessä joidenkin muiden polymorfismien kanssa (esim. rs4537731, rs7933505), osa haplotyyppiä. Tämä haplotyyppi on jo osoittanut joitakin yhteyksiä rajallisen persoonallisuushäiriön kanssa.

On myös yhä enemmän näyttöä siitä, että endogeenisten opioidien (EO) pitoisuuden muutokset voivat liittyä NSSI:hen. Merkittävästi alhaisemmat β-endorfiini- ja met-enkefaliiniarvot NSSI-potilaiden liuoksessa oli osoitettu. Äskettäinen tutkimus on osoittanut merkittävästi alhaisempia β-endorfiinin perustasoja NSSI-potilailla verrattuna terveisiin kontrolleihin. Naomi I. Eisenberger on johtava endogeenisten opioidien polymorfismien tutkiminen yhdessä "emotionaalisen" kivun kanssa. Ihmiset, joilla on alempi fyysisen kivun kynnys, kuvailivat myös suurempaa herkkyyttä henkiselle kivulle. On olemassa lukuisia todisteita mu-opioidireseptorin OPRM1 (A118G; rs1799971) geenin polymorfismin merkittävästä vaikutuksesta muuttuneeseen herkkyyteen fyysiselle kivulle, kivun havaitsemiseen ja vasteeseen opiaattikipulääkeille. G-alleelin kantajien merkittävästi lisääntynyt herkkyys sosiaaliselle hylkäämiselle (eli "emotionaalisen" kivun mallilla) on osoitettu. On tehty useita tutkimuksia rs1799971-polymorfismin vaikutuksesta himoon ja riippuvuuteen. Ottaen huomioon NSSI:n teoreettisen riippuvuutta aiheuttavan taustan ja fyysisen ja emotionaalisen kivun välisen yhteyden sekä rs1799971-polymorfismin roolin, tämä polymorfismi on tärkeä ehdokaspolymorfismi NSSI:ssä. Yksittäisten riippuvuuksien kohdalla ilmenee erilaisia, osittain ristiriitaisia ​​tuloksia. Useat tutkimukset ovat vahvistaneet G-alleelin riskitekijäksi erilaisille riippuvuuksille, kun taas toiset eivät ole osoittaneet mitään vaikutusta tai ovat havainneet vähentyneen riippuvuuden riskin G-alleelin kantajilla. Siten vuonna 2016 tehtiin ensimmäinen yhteisanalyysi, jossa oli mukana 9064 valkoihoisesta väestöstä kuuluvaa henkilöä. Tässä suuressa eurooppalaisessa otoksessa G-alleeli osoittautui merkitseväksi (OR = 0,90; luottamusväli 95 % (0,83 - 0,97); p = 0,0095) suojaavaksi tekijäksi riippuvuudelle yleensä. Suorat tutkimukset himosta ja rs1799971:n vaikutuksesta himoon ovat harvinaisia ​​ja ristiriitaisia. Mahdollisia geneettisiä vaikutuksia NSSI:n kehittymiseen on tutkittu vähän, eikä rs1799971:tä näytä olevan tutkittu tällä alalla.

Myös antipsykoottien pääkohde, dopamiinireseptori D2, on tärkeä riippuvuustutkimuksessa. Dopamiinireseptori 2 -geenin tunnetuin polymorfismi on Taq1A (TaqIA) (rs1800497) polymorfismi. Kaksi rs1800497:n alleelia tunnetaan - A1 ja A2. Yhdessä tutkimuksessa alleeli A1 on yhdistetty patologiseen uhkapelaamiseen, tyypilliseen käyttäytymisriippuvuuteen. Se on myös yhdistetty impulsiivisuuteen ja riippuvuutta aiheuttavaan käyttäytymiseen joissakin muissa tutkimuksissa. A1-alleeli on yhdistetty myös raja-arvoisiin persoonallisuuden piirteisiin. G-proteiinit on yhdistetty lukuisten reseptorien oikeaan toimintaan. G-proteiinin beeta 3 -geenin (GNbeta3) polymorfismi C825T (rs5443) on joissain tutkimuksissa yhdistetty masennukseen. Yhdessä tutkimuksessa T-alleelin kantajilla oli tilastollisesti suurempi NSSI:n riski kuin muilla masennuspotilailla.

NSSI-potilailla on havaittu heikentynyttä kivun havaitsemista ja korkeampaa kipukynnystä.

Eettisen komitean hyväksyntä ja projektin rekisteröinti Tutkimus on hyväksytty Slovenian tasavallan lääketieteellisen eettisen komitean toimesta (numero 69/06/13). Se on valittu ja rekisteröity Slovenian yliopistollisen lääketieteellisen keskuksen Mariborin sisäiseksi tieteelliseksi tutkimus- ja kehitysprojektiksi 1.8.2013 (projektinumero IRP-2013/01-07).

Kyselylomakkeet Kaikki nuoret kliinisestä otoksesta ja alkuperäisestä kontrolliryhmästä täyttivät sloveniankielisen version State-Trait Anxiety Inventory for Adults (STAI) itsearviointikyselystä ja seuraavat kyselyt käännettynä sloveeniksi: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11), MacLean-seulontainstrumentti BPD:tä varten (MSI-BPD), varhaisen trauman inventaarioselvitys-lyhytlomake (ETISR-SF). STAI mittaa kahta ahdistuksen muotoa. "Tila-ahdistus" mittaa nykyistä tilaa eli ahdistustasoa, jonka yksilö tuntee tietyssä tapahtumassa. "Ominaisuusahdistus" viittaa yksilön pitkäaikaiseen tilaan. BIS-11 on luultavasti eniten käytetty instrumentti impulsiivisuuden mittaamiseen. MSI-BPD on seulontakysely, jota käytetään murrosiän rajamaisen persoonallisuushäiriön etsimiseen. ETISR-SF mittaa lapsuuden traumaa, mukaan lukien fyysistä, henkistä ja seksuaalista väkivaltaa, sekä yleisiä traumaattisia tapahtumia.

NSSI:n tunnistamiseksi tutkijat käyttivät kliinisen näytteen Inventory of Statements about Self-Injury (ISAS) sloveniankielistä käännöstä ja Self-Injury Craving Questionnairen (SICQ) sloveniankielistä käännöstä. ISAS on kyselylomake, joka koostuu kahdesta osasta. Ensimmäinen osa koostuu 12 kysymyksestä itsensä vahingoittamisesta ja toinen osa 13 NSSI:n toiminnasta. SICQ sisältää 7 kysymystä NSSI-himosta.

DNA:n erottaminen ja genotyypitys NSSI:n genetiikasta on vähän tutkittu. Tämän tiedon avulla oli valittu joitain ehdokasgeneettisiä polymorfismeja. Pääsääntöisesti tutkimukseen osallistuvat geneettiset polymorfismiehdokkaat on siksi valittu riippuvuus- ja rinnakkaissairauksien (masennus, rajapersoonallisuushäiriö jne.) genetiikkaa koskevan tiedon avulla.

DNA genotyypitystä varten uutettiin perifeerisen veren mononukleaarisoluista käyttämällä TRI-reagenssia (Sigma, Steinheim, Saksa) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Uutetun DNA:n laatu ja konsentraatio tarkistettiin agaroosigeelielektroforeesilla ja SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, USA) spektrofotometrillä.

Polymorfismien genotyypitystä varten tutkijat suorittivat ensin reaaliaikaisen polymeraasiketjureaktion (qPCR) ja sitten korkearesoluutioisen sulamismenetelmän (HRM) tai restriktiofragmentin pituuspolymorfismin (RFLP) menetelmän. qPCR suoritettiin seuraavasti: denaturointi 95 °C:ssa 10 minuuttia, kertominen, 45 sykliä 95 °C 10 s, 60 °C 15 s, 72 °C 10 s. HRM on tehty seuraavalla protokollalla: 95 °C 1 min, 40 °C 1 min, 60 - 90 °C 0,02 °C/s ja jäähdytys 40 °C:ssa 10 s. HRM-reaktio on tehty LightCycler® 480:lla (Roche) ja LC480 HRM Master Mixiä (Roche) on käytetty. Tutkijat ovat analysoineet genotyypit sulamiskäyristä (TAULUKKO 1). RFLP-protokollassa qPCR:n tuotetta on inkuboitu oikean New England Biolabsin restriktioentsyymin kanssa (TAULUKKO 1). Analyysi on tehty agaroosigeelielektroforeesilla (2 % agaroosigeeli, trisboraatti-EDTA-puskuri). DNA-näytteet sekoitettiin 0,25 % ksyleenisyanoliin ja 40 % sakkaroosiin. Elektroforeesia on ajettu 150 V jännitteellä 20 minuuttia. Lopuksi agaroosigeeli on analysoitu UV-valossa.

geeni; geneettinen polymorfismi; alukkeen sekvenssi; lämpötila; genotyypitysmenetelmä; restriktioentsyymi:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60 °C; HRM; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60 °C; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC, AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60 °C; HRM; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65 °C; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65 °C; RFLP; TaqI.
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60 °C; HRM; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5 °C; PCR; /.

Tilastollinen analyysi Tiedot analysoitiin käyttämällä IBM SPSS Statistics -ohjelmapakettia (IMB Inc., Armonk, New York). P ≤ 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitseväksi.

Traumatoituneiden ja pahoinpideltyjen nuorten osuuden vertailu kliinisessä otoksessa ja alkuperäisessä kontrolliryhmässä on tehty Fisherin eksaktitestillä. Kaikkien jatkuvien muuttujien normaaliarvo arvioitiin ensin Kolmogorov-Smirnov-normaalisuustestillä. Korrelaatio NSSI:n alkamisajan iän ja NSSI:n kokonaismäärän välillä elämässä määritettiin Spearmanin korrelaatiolla. Elämässä tapahtuneiden itsevammojen kokonaismäärän (NSSI) ja SICQ-kyselyn arvon välistä suhdetta on myös arvioitu Spearmanin korrelaatioanalyysillä. SICQ-kyselylomakkeen arvon ja NSSI:n ajattelusta NSSI:hen kuluvan ajan sekä genotyypin ja NSSI:n kokonaismäärän suhdetta elämässä on arvioitu Kruskal-Wallis H-testillä. Mann-Whitneyn U-testiä käytettiin määrittämään genotyypin ja iän välistä suhdetta NSSI:n alkaessa. Erilaisia ​​logistisia regressiomalleja ETISR-SF-kyselyn parametreillä / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT ja ehdokasgenotyypit riippumattomina muuttujina ja NSSI riippuvaisena muuttujana on tehty. Itse genotyypin rs1799971 / rs1800497 ja himomuuttujan säätämättömät analyysit suoritettiin Mann-Whitneyn U-testillä. Genotyypin rs1799971 / rs1800497 osuutta NSSI-himoon (SICQ) tutkittiin käyttämällä yleistettyjä lineaarisia malleja, ja se säädettiin STAI STATE- ja STAI TRAIT / ETISR -SF -arvoihin. On tehty logistisia regressiomalleja, joissa ehdokasgenotyypit ovat riippumattomia muuttujia ja kivun havaitseminen NSSI:n aikana riippuvaisena muuttujana. Genotyypin rs1799971 / rs1800497 osuutta kivun havaitsemiseen on tutkittu käyttämällä logistisia regressiomalleja, jotka on sovitettu arvoon STAI STATE / STAI TRAIT / MSI - BPD / ETISR - SF. Kivun havaitsemisen NSSI:n aikana ja himon (SICQ) välinen suhde arvioitiin Mann-Whitneyn U-testillä.

Tutkimuksen tarkoitus ja hypoteesit Tutkimuksen tavoitteena oli tehdä ensimmäinen G x E -tutkimus NSSI:n etiologiasta, diagnosoidun DSM-5:n ehdotetuilla tutkimuskriteereillä, slovenialaisilla nuorilla. Tutkijat halusivat tehdä ensimmäisen assosiaatiotutkimuksen rs1799971:stä NSSI:tä sairastavilla nuorilla ja tutkia OPRM1-geenin yhteyttä NSSI:n riippuvuutta aiheuttaviin ominaisuuksiin ja NSSI-himoon. Tavoitteena oli myös toistaa Joycen ja hänen korkeakoulujen (rs5443:n ja NSSI:n yhdistelmä masennuspotilailla) tulokset NSSI-potilaiden otoksessa.

Tutkijat ovat olettaneet, että NSSI voisi liittyä johonkin ehdokaspolymorfismiin tai ehdokaspolymorfismien yhdistelmään. Lisäksi tutkijat ovat olettaneet, että NSSI:hen liittyvät geneettiset polymorfismit ovat eniten yhteydessä NSSI:hen traumatisoituneilla yksilöillä ja että NSSI liittyy korkeampaan impulsiivisuuteen.