Genética del comportamiento auto agresivo

Antecedentes teóricos La etiología de las autolesiones no suicidas (NSSI) aún no ha sido explicada. Los estudios que se han llevado a cabo hasta ahora indican factores tanto genéticos como ambientales. Se ha sugerido que la NSSI es un trastorno poligénico. Dos sistemas de neurotransmisores, el sistema serotoninérgico y el sistema de opioides endógenos, son los principales sistemas candidatos en la etiología de NSSI.

El sistema serotoninérgico es importante en los trastornos comórbidos de NSSI (depresión, ansiedad…). También hay una creciente importancia de su participación directa en NSSI. La deficiencia de triptófano, un precursor de la serotonina, se ha relacionado con una frecuencia creciente de NSSI. El polimorfismo de repetición en tándem de número variable del gen transportador de serotonina - SLC6A4 (VNTR STin2) se ha asociado con el trastorno límite de la personalidad, un trastorno con NSSI frecuente, en un estudio. Hay algunos polimorfismos importantes del gen de la enzima triptófano hidroxilasa, la enzima principal en la síntesis de la serotonina. El polimorfismo rs1799913 se ha asociado con depresión y comportamiento parasuicida. Este polimorfismo es, junto con algunos otros polimorfismos (p. rs4537731, rs7933505), una parte de un haplotipo. Este haplotipo ya ha mostrado algunas conexiones con el trastorno límite de la personalidad.

También hay evidencia creciente de que los cambios en la concentración de opioides endógenos (EO) podrían estar asociados con NSSI. Se han demostrado valores significativamente más bajos de β-endorfina y met-encefalina en el licor de individuos con NSSI. Un estudio reciente ha mostrado niveles basales de β-endorfina significativamente más bajos en adolescentes con NSSI, en comparación con controles sanos. Naomi I. Eisenberger es líder en el estudio de los polimorfismos de los opioides endógenos junto con el dolor "emocional". Las personas con un umbral más bajo para el dolor físico también describieron una mayor sensibilidad al dolor emocional. Hay numerosas pruebas del efecto significativo del polimorfismo del gen del receptor opioide mu OPRM1 (A118G; rs1799971) sobre la alteración de la sensibilidad al dolor físico, la percepción del dolor y la respuesta a los analgésicos opiáceos. Se ha demostrado una sensibilidad significativamente mayor de los portadores del alelo G al rechazo social (es decir, en un modelo de dolor "emocional"). Se han realizado varios estudios sobre el impacto del polimorfismo rs1799971 en el deseo y la adicción. Dados los antecedentes adictivos teóricos de NSSI y la interconexión del dolor físico y emocional y el papel del polimorfismo rs1799971, este polimorfismo es un polimorfismo candidato importante en NSSI. Para las adicciones individuales, aparecen resultados diferentes, en parte contradictorios. Varios estudios han confirmado que el alelo G es un factor de riesgo para diversas adicciones, mientras que otros no han demostrado ningún impacto o han encontrado una reducción del riesgo de adicción en los portadores del alelo G. Así, en 2016 se realizó el primer análisis colaborativo en el que se incluyeron 9064 sujetos de la población caucásica. En esta gran muestra europea, el alelo G demostró ser un factor protector significativo (OR = 0,90; intervalo de confianza del 95 % (0,83 - 0,97); p = 0,0095) para la adicción en general. Los estudios directos sobre el deseo y el impacto de rs1799971 en el deseo son raros y contradictorios. Ha habido poca investigación sobre las influencias genéticas potenciales en el desarrollo de NSSI y rs1799971 no parece haber sido estudiado en este campo.

El objetivo principal de los antipsicóticos, el receptor de dopamina D2, también es importante en la investigación de la adicción. El polimorfismo más famoso del gen del receptor de dopamina 2 es el polimorfismo Taq1A (TaqIA) (rs1800497). Se conocen dos alelos de rs1800497: A1 y A2. El alelo A1 se ha asociado con el juego patológico, una adicción conductual típica, en un estudio. También se ha asociado con la impulsividad y el comportamiento adictivo en algunos otros estudios. El alelo A1 también se ha asociado con rasgos de personalidad borderline. Las proteínas G se han relacionado con la actividad propia de numerosos receptores. El polimorfismo C825T (rs5443) del gen beta 3 de la proteína G (GNbeta3) se ha relacionado en algunas investigaciones con la depresión. En un estudio, los portadores del alelo T tenían un riesgo estadístico más alto de NSSI que otros pacientes depresivos.

Se ha demostrado una percepción disminuida del dolor y un umbral de dolor más alto en personas con NSSI.

Aprobación del comité de ética y registro del proyecto El estudio ha sido aprobado por el Comité de Ética Médica de la República de Eslovenia (número 69/06/13). Ha sido elegido y registrado como un proyecto de investigación y desarrollo científico interno del Centro Médico Universitario de Maribor, Eslovenia, el 1.8.2013 (número de proyecto IRP-2013/01-07).

Cuestionarios Todos los adolescentes de la muestra clínica y del grupo control original cumplimentaron la versión eslovena del cuestionario de autoevaluación del State-Trait Anxiety Inventory for Adults (STAI) y los siguientes cuestionarios, traducidos al esloveno: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11), Instrumento de detección de MacLean para TLP (MSI-BPD), Inventario de trauma temprano, formulario breve (ETISR-SF). El STAI mide dos formas de ansiedad. La "ansiedad de estado" mide el estado actual, es decir, el nivel de ansiedad que siente el individuo ante un evento determinado. El "rasgo de ansiedad" se refiere al estado a largo plazo del individuo. BIS-11 es probablemente el instrumento más utilizado para medir la impulsividad. El MSI-BPD es un cuestionario de cribado utilizado para buscar el trastorno límite de la personalidad en la adolescencia. ETISR-SF mide el trauma infantil, incluido el abuso físico, emocional y sexual, así como los eventos traumáticos generales.

Para identificar NSSI, los investigadores utilizaron la traducción al esloveno del Inventario de declaraciones sobre autolesiones (ISAS) y la traducción al esloveno del Self-Injury Craving Questionnaire (SICQ) para la muestra clínica. El ISAS es un cuestionario que consta de dos partes. La primera parte consta de 12 preguntas sobre comportamiento auto agresivo y la segunda parte de preguntas sobre 13 funciones de NSSI. El SICQ contiene 7 preguntas sobre el deseo de NSSI.

Extracción de ADN y genotipado Hay poca investigación sobre la genética de NSSI. Se habían elegido algunos polimorfismos genéticos candidatos con la ayuda de esta información. Predominantemente, los polimorfismos genéticos candidatos en el estudio se han elegido por lo tanto con la ayuda de información sobre la genética de la adicción y los trastornos comórbidos (depresión, trastorno límite de la personalidad, …).

El ADN para el genotipado se extrajo de células mononucleares de sangre periférica utilizando el reactivo TRI (Sigma, Steinheim, Alemania) según las instrucciones del fabricante. La calidad y la concentración del ADN extraído se verificaron mediante electroforesis en gel de agarosa y espectrofotómetro SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, EE. UU.).

Para el genotipado de los polimorfismos, los investigadores realizaron primero la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCR) y luego el método de fusión de alta resolución (HRM) o polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP). La qPCR se realizó de la siguiente manera: desnaturalización a 95 °C por 10 min, multiplicación, 45 ciclos de 95 °C 10 s, 60 °C 15 s, 72 °C 10 s. La HRM se ha realizado con el siguiente protocolo: 95 °C 1 min, 40 °C 1 min, 60 - 90 °C a 0,02 °C/s y enfriamiento a 40 °C durante 10 s. La reacción HRM se ha realizado con el LightCycler® 480 (Roche) y se ha utilizado el LC480 HRM Master Mix (Roche). Los investigadores han analizado los genotipos a partir de las curvas de fusión (TABLA 1). En el protocolo RFLP, el producto de la qPCR se ha incubado con la enzima de restricción adecuada de New England Biolabs (TABLA 1). El análisis se ha realizado con electroforesis en gel de agarosa (gel de agarosa al 2 %, tampón trisborato EDTA). Las muestras de ADN se mezclaron con xileno cianol al 0,25 % y sacarosa al 40 %. La electroforesis se ha llevado a cabo a 150 V durante 20 minutos. Al final, el gel de agarosa ha sido analizado bajo la luz ultravioleta.

Gene; polimorfismo genético; secuencia del cebador; temperatura; método de genotipado; enzima restrictiva:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60°C; gestión de recursos humanos; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60°C; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC, AAGCGGGACATGACCTAAGA; 60°C; gestión de recursos humanos; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65°C; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65°C; RFLP; TaqI.
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60°C; gestión de recursos humanos; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5°C; PCR; /.

Análisis estadístico Los datos se analizaron utilizando el paquete de programas IBM SPSS Statistics (IMB Inc., Armonk, Nueva York). P ≤ 0,05 se consideró estadísticamente significativo.

La comparación de la proporción de adolescentes traumatizados y maltratados en la muestra clínica y en el grupo de control original se ha realizado con la prueba exacta de Fisher. En primer lugar, se evaluó la normalidad de todas las variables continuas mediante la prueba de normalidad de Kolmogorov-Smirnov. La correlación entre la edad de inicio de NSSI y el número total de NSSI en la vida se determinó utilizando la correlación de Spearman. La relación entre el número total de autolesiones (NSSI) en la vida y el valor en el cuestionario SICQ también se ha evaluado mediante el análisis de correlación de Spearman. La relación del valor del cuestionario SICQ y el tiempo que pasa desde el pensamiento de NSSI a NSSI y también el genotipo y el número total de NSSI en la vida se han evaluado mediante la prueba H de Kruskal-Wallis. Se había utilizado la prueba U de Mann-Whitney para determinar la relación entre el genotipo y la edad de inicio de la NSSI. Se han realizado diferentes modelos de regresión logística con parámetros del cuestionario ETISR-SF / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT y los genotipos candidatos como variables independientes y NSSI como variable dependiente. Los análisis no ajustados del propio genotipo rs1799971/rs1800497 y la variable ansia se llevaron a cabo mediante la prueba U de Mann-Whitney. Se estudió la contribución del genotipo rs1799971/rs1800497 al nivel de craving por NSSI (SICQ) mediante modelos lineales generalizados y se ajustó a STAI STATE y STAI TRAIT/ETISR - SF. Se han realizado modelos de regresión logística con genotipos candidatos como variables independientes y la percepción del dolor durante la NSSI como variable dependiente. La contribución del genotipo rs1799971 / rs1800497 a la percepción del dolor se ha estudiado mediante modelos de regresión logística que se ajustaron a STAI STATE / STAI TRAIT / MSI - BPD/ ETISR - SF. La relación entre la percepción del dolor durante el NSSI y el craving (SICQ) se evaluó mediante la prueba U de Mann-Whitney.

Objetivo del estudio e hipótesis El objetivo de la investigación fue realizar el primer estudio G x E sobre la etiología de NSSI, diagnosticado con los criterios de investigación propuestos por el DSM-5, en adolescentes eslovenos. Los investigadores querían hacer el primer estudio de asociación de rs1799971 en adolescentes con NSSI y estudiar la conexión del gen OPRM1 con las propiedades adictivas de NSSI y el ansia por NSSI. El objetivo también fue replicar los resultados de Joyce y sus colegas (asociación de rs5443 y NSSI en pacientes depresivos) en una muestra de adolescentes con NSSI.

Los investigadores han planteado la hipótesis de que el NSSI podría estar asociado con uno de los polimorfismos candidatos o con una combinación de polimorfismos candidatos. Además, los investigadores han planteado la hipótesis de que los polimorfismos genéticos asociados con NSSI son los más conectados con NSSI en individuos traumatizados y que NSSI está asociado con una mayor impulsividad.