Genetik von selbstverletzendem Verhalten

Theoretischer Hintergrund Die Ätiologie der nicht suizidalen Selbstverletzung (NSSI) ist noch immer nicht geklärt. Bisher durchgeführte Studien weisen sowohl auf genetische als auch auf Umweltfaktoren hin. Es wurde vermutet, dass NSSI eine polygene Erkrankung ist. Zwei Neurotransmittersysteme, das serotonerge System und das endogene Opioidsystem, sind die wichtigsten Kandidatensysteme in der Ätiologie von NSSI.

Das Serotonin-System ist wichtig bei komorbiden NSSI-Erkrankungen (Depression, Angst…). Auch seine direkte Beteiligung an NSSI gewinnt zunehmend an Bedeutung. Ein Mangel an Tryptophan, einem Vorläufer von Serotonin, wurde mit einer zunehmenden Häufigkeit von NSSI in Verbindung gebracht. Tandem-Repeat-Polymorphismus mit variabler Anzahl des Serotonin-Transportergens – SLC6A4 (VNTR STin2) wurde in einer Studie mit Borderline-Persönlichkeitsstörung, einer Störung mit häufigem NSSI, in Verbindung gebracht. Das sind einige wichtige Polymorphismen des Gens für das Tryptophan-Hydroxylase-Enzym, das Hauptenzym bei der Synthese von Serotonin. Der Polymorphismus rs1799913 wurde mit Depressionen und parasuizidalem Verhalten in Verbindung gebracht. Dieser Polymorphismus ist zusammen mit einigen anderen Polymorphismen (z. rs4537731, rs7933505), ein Teil eines Haplotyps. Dieser Haplotyp hat bereits einige Verbindungen zur Borderline-Persönlichkeitsstörung gezeigt.

Es gibt auch zunehmend Hinweise darauf, dass die Konzentrationsänderungen von endogenen Opioiden (EO) mit NSSI in Verbindung gebracht werden könnten. Es wurden signifikant niedrigere β-Endorphin- und Met-Enkephalin-Werte im Liquor von Personen mit NSSI nachgewiesen. Eine kürzlich durchgeführte Studie hat signifikant niedrigere basale β-Endorphin-Spiegel bei Jugendlichen mit NSSV im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen gezeigt. Naomi I. Eisenberger ist führend in der Untersuchung von Polymorphismen endogener Opioide in Verbindung mit „emotionalem“ Schmerz. Menschen mit einer niedrigeren Schwelle für körperlichen Schmerz beschrieben auch eine größere Empfindlichkeit gegenüber emotionalem Schmerz. Es gibt zahlreiche Hinweise auf die signifikante Wirkung des Polymorphismus des Gens für den Mu-Opioid-Rezeptor OPRM1 (A118G; rs1799971) auf eine veränderte Empfindlichkeit gegenüber körperlichen Schmerzen, Schmerzwahrnehmung und Ansprechen auf Opiatanalgetika. Eine signifikant erhöhte Empfindlichkeit von G-Allel-Trägern gegenüber sozialer Ablehnung (d. h. an einem Modell für "emotionalen" Schmerz) wurde nachgewiesen. Es wurden eine Reihe von Studien über die Auswirkungen des rs1799971-Polymorphismus auf Verlangen und Sucht durchgeführt. Angesichts des theoretischen Suchthintergrunds von NSSI und der Verbundenheit von körperlichem und emotionalem Schmerz und der Rolle des rs1799971-Polymorphismus ist dieser Polymorphismus ein wichtiger Kandidat für einen Polymorphismus bei NSSI. Für einzelne Suchterkrankungen zeigen sich unterschiedliche, teilweise widersprüchliche Ergebnisse. Verschiedene Studien haben das G-Allel als Risikofaktor für verschiedene Suchterkrankungen bestätigt, während andere keine Wirkung gezeigt haben oder ein reduziertes Suchtrisiko bei G-Allel-Trägern festgestellt haben. So wurde 2016 die erste gemeinsame Analyse durchgeführt, in die 9064 Probanden der kaukasischen Bevölkerung eingeschlossen wurden. In dieser großen, europäischen Stichprobe erwies sich das G-Allel als signifikanter (OR = 0,90; Konfidenzintervall 95 % (0,83 - 0,97); p = 0,0095) Schutzfaktor für Sucht im Allgemeinen. Direkte Studien zum Verlangen und den Auswirkungen von rs1799971 auf das Verlangen sind selten und widersprüchlich. Es wurde wenig über mögliche genetische Einflüsse auf die Entwicklung von NSSI geforscht, und rs1799971 scheint auf diesem Gebiet nicht untersucht worden zu sein.

Der Hauptangriffspunkt von Antipsychotika, der Dopaminrezeptor D2, ist auch in der Suchtforschung von Bedeutung. Der bekannteste Polymorphismus des Dopaminrezeptor-2-Gens ist der Taq1A (TaqIA) (rs1800497) Polymorphismus. Zwei Allele von rs1800497 sind bekannt – A1 und A2. Das Allel A1 wurde in einer Studie mit pathologischem Glücksspiel, einer typischen Verhaltenssucht, in Verbindung gebracht. In einigen anderen Studien wurde es auch mit Impulsivität und Suchtverhalten in Verbindung gebracht. Das A1-Allel wurde auch mit Borderline-Persönlichkeitsmerkmalen in Verbindung gebracht. G-Proteine ​​wurden mit der richtigen Aktivität zahlreicher Rezeptoren in Verbindung gebracht. Der Polymorphismus C825T (rs5443) des G-Protein-Beta-3-Gens (GNbeta3) wurde in einigen Studien mit Depressionen in Verbindung gebracht. In einer Studie hatten die Träger des T-Allels ein statistisch höheres Risiko für NSSI als andere depressive Patienten.

Es wurde eine verminderte Schmerzwahrnehmung und eine höhere Schmerzschwelle bei Menschen mit NSSI gezeigt.

Genehmigung der Ethikkommission und Projektregistrierung Die Studie wurde von der Ethikkommission für Medizin der Republik Slowenien (Nr. 69/06/13) genehmigt. Es wurde am 1.8.2013 als internes wissenschaftliches Forschungs- und Entwicklungsprojekt des Universitätsklinikums Maribor, Slowenien, ausgewählt und registriert (Projektnummer IRP-2013/01-07).

Fragebögen Alle Jugendlichen aus der klinischen Stichprobe und der ursprünglichen Kontrollgruppe füllten die slowenische Version des Fragebogens zur Selbsteinschätzung des State-Trait Anxiety Inventory for Adults (STAI) und die folgenden Fragebögen, übersetzt ins Slowenische, aus: Barratt Impulsiveness Scale (BIS- 11), MacLean Screening Instrument for BPD (MSI-BPD), Early Trauma Inventory Self Report-Short Form (ETISR-SF). Der STAI misst zwei Formen von Angst. „Zustandsangst“ misst den aktuellen Zustand, d. h. das Maß an Angst, das die Person bei einem bestimmten Ereignis empfindet. "Eigenschaftsangst" bezieht sich auf den langfristigen Zustand des Individuums. BIS-11 ist wahrscheinlich das am häufigsten verwendete Instrument zur Messung der Impulsivität. Der MSI-BPD ist ein Screening-Fragebogen zur Suche nach Borderline-Persönlichkeitsstörungen im Jugendalter. ETISR-SF misst das Kindheitstrauma, einschließlich körperlichem, emotionalem und sexuellem Missbrauch, sowie allgemeine traumatische Ereignisse.

Um NSSI zu identifizieren, verwendeten die Forscher die slowenische Übersetzung des Inventory of Statements about Self-injury (ISAS) und die slowenische Übersetzung des Self-injury Craving Questionnaire (SICQ) für die klinische Probe. Der ISAS ist ein Fragebogen, der aus zwei Teilen besteht. Der erste Teil besteht aus 12 Fragen zu selbstverletzendem Verhalten und der zweite Teil aus Fragen zu 13 Funktionen von NSSV. Der SICQ enthält 7 Fragen zum Verlangen nach NSSI.

DNA-Extraktion und Genotypisierung Es gibt wenig Forschung über die Genetik von NSSI. Mit Hilfe dieser Informationen wurden einige Kandidaten für genetische Polymorphismen ausgewählt. Die in der Studie in Frage kommenden genetischen Polymorphismen wurden daher überwiegend mit Hilfe von Informationen zur Genetik von Suchterkrankungen und komorbiden Erkrankungen (Depression, Borderline-Persönlichkeitsstörung, …) ausgewählt.

DNA für die Genotypisierung wurde aus peripheren mononukleären Blutzellen unter Verwendung von TRI-Reagenz (Sigma, Steinheim, Deutschland) gemäß den Anweisungen des Herstellers extrahiert. Qualität und Konzentration der extrahierten DNA wurden mittels Agarose-Gelelektrophorese und Spektrophotometer SynergyTM 2 (Biotek, Winooski, VT, USA) überprüft.

Für die Genotypisierung der Polymorphismen führten die Forscher zunächst die Real-Time-Polymerase-Kettenreaktion (qPCR) und dann die Methode des hochauflösenden Schmelzens (HRM) oder des Restriktionsfragmentlängen-Polymorphismus (RFLP) durch. Die qPCR wurde wie folgt durchgeführt: Denaturierung bei 95 °C für 10 min, Multiplikation, 45 Zyklen von 95 °C 10 s, 60 °C 15 s, 72 °C 10 s. Der HRM wurde nach folgendem Protokoll durchgeführt: 95 °C 1 min, 40 °C 1 min, 60–90 °C mit 0,02 °C/s und Abkühlung bei 40 °C für 10 s. Die HRM-Reaktion wurde mit dem LightCycler® 480 (Roche) durchgeführt und der LC480 HRM Master Mix (Roche) wurde verwendet. Die Forscher haben die Genotypen aus den Schmelzkurven analysiert (TABELLE 1). Im RFLP-Protokoll wurde das Produkt der qPCR mit dem richtigen Restriktionsenzym von New England Biolabs inkubiert (TABELLE 1). Die Analyse wurde mit Agarosegelelektrophorese (2 % Agarosegel, Trisborat-EDTA-Puffer) durchgeführt. Die DNA-Proben wurden mit 0,25 % Xylencyanol und 40 % Saccharose gemischt. Die Elektrophorese wurde 20 Minuten lang bei 150 V durchgeführt. Am Ende wurde das Agarosegel unter dem UV-Licht analysiert.

Gen; genetischer Polymorphismus; Sequenz des Primers; Temperatur; Genotypisierungsmethode; Restriktionsenzym:

1. OPRM1; rs1799971; CGGTTCCTGGGTCAACTTGT, GATCGTGATGGCCGTGAT; 60 °C; HRM; /.
2. TPH1; rs4537731; GTTTCATGCAGGTATTAGTG, TGGCATTGAAGTAAGAGCAC; 60 °C; RFLP; Sau3AI.
3. TPH1; rs1799913; GTTAAGCACTGCAGCGTGAC, AACGGGGACATGACCTAAGA; 60 °C; HRM; /.
4. TPH1; rs7933505; AAACTGAGAGGAAAATGCTTGC, CATTGCCGTTGAACTTTTGA; 65 °C; RFLP; NlaIII.
5. DRD2; rs1800497; CTTGCCCTCTAGGAAGGACAT, ACCTTCCTGAGTGTCATCAACC; 65 °C; RFLP; TaqI.
6. GNB3; rs5443; CATCATCTGCGGCATCACG, ACGCTCAGACTTCATGGAGT; 60 °C; HRM; /.
7. SLC6A4; VNTR; GGGCAATGTCTGGCGCTTCCCCTACATA, TTCTGGCCTCTCAAGAGGACCTACAGC; 65,5 °C; PCR; /.

Statistische Analyse Die Daten wurden unter Verwendung des Programmpakets IBM SPSS Statistics (IMB Inc., Armonk, New York) analysiert. P ≤ 0,05 wurde als statistisch signifikant angesehen.

Der Vergleich des Anteils traumatisierter und missbrauchter Jugendlicher in der klinischen Stichprobe und in der ursprünglichen Kontrollgruppe wurde mit dem exakten Test nach Fisher durchgeführt. Alle kontinuierlichen Variablen wurden zunächst unter Verwendung des Kolmogorov-Smirnov-Normalitätstests auf Normalität bewertet. Die Korrelation zwischen dem Alter beim Einsetzen von NSSV und der Gesamtzahl von NSSV im Leben wurde unter Verwendung der Spearman-Korrelation bestimmt. Die Beziehung zwischen der Gesamtzahl der Selbstverletzungen (NSSI) im Leben und dem Wert auf dem SICQ-Fragebogen wurde ebenfalls mit der Korrelationsanalyse von Spearman bewertet. Die Beziehung zwischen dem Wert des SICQ-Fragebogens und der Zeit, die von dem Gedanken an NSSV zu NSSV vergeht, sowie der Genotyp und die Gesamtzahl von NSSV im Leben wurden beide mit dem Kruskal-Wallis-H-Test bewertet. Der Mann-Whitney-U-Test wurde verwendet, um die Beziehung zwischen dem Genotyp und dem Alter zu Beginn des NSSI zu bestimmen. Es wurden verschiedene logistische Regressionsmodelle mit Parametern des ETISR-SF-Fragebogens / BIS-11 / MSI - BPD / STAI STETE / STAI TRAIT und den Kandidaten-Genotypen als unabhängige Variablen und NSSI als abhängige Variable erstellt. Unbereinigte Analysen des rs1799971/rs1800497-Genotyps selbst und der Craving-Variablen wurden unter Verwendung des Mann-Whitney-U-Tests durchgeführt. Der Beitrag des Genotyps rs1799971 / rs1800497 zum Grad des Verlangens nach NSSI (SICQ) wurde unter Verwendung verallgemeinerter linearer Modelle untersucht und an STAI STATE und STAI TRAIT / ETISR - SF angepasst. Logistische Regressionsmodelle mit Kandidaten-Genotypen als unabhängige Variablen und Schmerzwahrnehmung während NSSI als abhängige Variable wurden erstellt. Der Beitrag des rs1799971/rs1800497-Genotyps zur Schmerzwahrnehmung wurde mit logistischen Regressionsmodellen untersucht, die an STAI STATE/STAI TRAIT/MSI - BPD/ ETISR - SF angepasst wurden. Die Beziehung zwischen Schmerzwahrnehmung während NSSI und Craving (SICQ) wurde mit dem Mann-Whitney-U-Test bewertet.

Ziel der Studie und Hypothesen Das Ziel der Forschung war die Durchführung der ersten G x E-Studie zur Ätiologie von NSSI, diagnostiziert mit den vorgeschlagenen Forschungskriterien von DSM-5, bei slowenischen Jugendlichen. Die Forscher wollten die erste Assoziationsstudie des rs1799971 bei Jugendlichen mit NSSI durchführen und die Verbindung des OPRM1-Gens mit suchterzeugenden Eigenschaften von NSSI und dem Verlangen nach NSSI untersuchen. Das Ziel war auch, die Ergebnisse von Joyce und seinen Kollegen (Assoziation von rs5443 und NSSI bei depressiven Patienten) in einer Stichprobe von Jugendlichen mit NSSI zu replizieren.

Die Forscher haben die Hypothese aufgestellt, dass NSSI mit einem der Kandidaten-Polymorphismen oder einer Kombination von Kandidaten-Polymorphismen assoziiert sein könnte. Darüber hinaus haben die Forscher die Hypothese aufgestellt, dass die mit NSSI assoziierten genetischen Polymorphismen bei traumatisierten Personen am stärksten mit NSSI verbunden sind und dass NSSI mit einer höheren Impulsivität assoziiert ist.