비만 수술 후 단백질 요구 사항 (PROXY)

연구 목적은 최소 침습적 지표 아미노산 산화 (IAO) 방법을 사용하여 이전에 roux-en-y-bypass (RYGB) 수술을했던 성인 남성의 유지식이 단백질 요구 사항을 결정하는 것입니다. 연구 가설은 이전 비만 수술이없는 청년들에 비해이 인구에서식이 단백질 요구 사항이 높아질 것입니다. 귀무 가설에 따르면 이전 RYGB 수술을받은 성인과 이전 수술이없는 성인 간의식이 단백질 요구 사항에는 차이가 없다고합니다. 단백질 요구 사항은 린 질량의 비만 관련 증가를 설명하기 위해 지방이없는 질량 (FFM)에 비해 표현 될 것이다.

연구의 주요 종점은 추정 평균 단백질 요구 사항 (g/kg ffm/d)과 95% 신뢰 구간의 상한입니다.

이 연구는 단백질 요구 사항을 결정하기 위해 IAAO 방법을 사용한 영양 실험 연구로 구성됩니다. 지표 아미노산 산화는 각각 2 개의 적응 일 후 별도의 연구 일에 7 개의 증분 단백질 섭취 수준에서 측정된다. 단백질 섭취 요구 사항은 단백질 섭취량의 추가 증가에도 불구하고 지표 아미노산 산화가 더욱 감소하는 단백질 섭취 수준으로 계산된다. 이것을 중단 점이라고합니다. 단백질 섭취 수준의 서열은 각 연구 참가자에 대해 무작위 배정된다. 단백질 요구 사항은 개별당이 아니라 전체 연구 집단의 경우 각 단백질 섭취 수준에 충분한 산화 연구가 포함될 때 계산됩니다. 이는 동일한 개인이 7 시점에서 모든 산화 연구를 완료 할 필요가 없음을 의미합니다.

이 연구는 하나의 초기 선별 검사 및 계획 방문과 2 ~ 7 개의 대사 시험 방문으로 구성됩니다. 각 참가자는 최소 2 개, 바람직하게는 7 개의 단백질 섭취 수준을 모두 완료 할 수 있습니다.

이전에 UZ Leuven 비만 클리닉 저장소에 포함되기로 동의 한 환자 (ClinicalTrials.gov 식별자 NCT04614961; S-62590)은 연구 기준에 따라 사전 스크리닝됩니다. 그 후 자격을 유지하는 환자는 연락을 취하고 사전 동의서 양식을 사용하여 연구에 관한 정보를 받게됩니다. 이 연구에 참여하려는 초대는 소셜 네트워크 플랫폼을 사용하여 비만 및 비만 수술의 환자 지원 그룹을 통해 유통됩니다 (부록 A 참조). 참여에 관심이있는 환자는 연구 코디네이터에게 연락하도록 초대됩니다. 사전 스크리닝 평가를 완료하고 자격을 유지하는 환자는 선별 방문에 초대됩니다.

참여할 자격이있는 환자는 연구 절차에 관한 추가 정보를 받게되며 첫 3 일 대사 실험에 필요한 지침 및 식품 및기구가 제공됩니다. 환자는 또한 비만 수술 후 환자에게 적합한 종합 비타민-미네랄 보충제가 제공 될 것이다. 습관적인식이 섭취는 3 일간의 음식 일기를 사용하여 자체보고됩니다. 모든 포함 기준을 충족하지 않는 환자의 경우 새로 확인 된 혈당, 혈압, 비정상적인 간 기능 감소 된 신장 기능이 환자와 일반 개업의에게보고됩니다.

학습 일은 각각 다른 섭취 수준에서 7 번 반복됩니다. 피험자들은 각각의 IAAO 실험 동안 7 개의 단백질 섭취 수준 중 하나를 무작위로 받게됩니다 (그림 1). 간단한 무작위 배정은 REDCAP 및 R로 생성 된 할당 테이블을 사용하여 각 방문 동안 다른 단백질 수준을 할당합니다. 할당은 참가자로부터 숨겨집니다. 한 연구자는 주어진 연구 일의 특정 단백질 섭취 수준에 따라 연구 다이어트를 계산하고 물리적으로 준비해야하므로 할당에 맹렬하지 않을 것입니다. 연구 결과가 객관적인 생화학 적 분석에 의해 측정 된 대사 과정이기 때문에 이것은 편향이 없을 것이다.

적응 일 프로토콜 환자에게 연락하고 실험적 방문이 예정되어 있습니다. 연구 프로토콜은 확립 된 IAAO 방법 (26)을 기반으로합니다. IAAO 테스트 일 전 2 일 전, 환자는 1.5 g/kg 이상적인 체중에서 임의의 에너지 섭취 및 단백질 섭취를 제공하는 유지 보수식이를 섭취합니다. 이 단백질의 양은 비만 수술 후 개인에 대한 현재의 상부 단백질 요구 사항을 충족시켜 (16) 적응 기간 동안 이화 상태를 피합니다.

유지 보수 다이어트는 필요에 따라 추가 단백질 보충제의 추가 단백질 보충제를 사용하여 습관적인 음식 섭취량이 될 것입니다. 참가자는 필요에 따라 한 잔의 커피 나 차 및 추가 물을 섭취 할 수 있습니다. 2 일 동안의 음식 섭취는 단백질과 에너지 섭취를 측정하기 위해 기록됩니다.

신진 대사 연구 당일 연구 일에 환자는 UZ Leuven의 Acronim Study Unit을 방문합니다. 환자는 밤새 12 시간 동안 연구 방문을 위해 도착하도록 지시받을 것입니다. 도착하면, 체중 및 체성 성분은 상기 한 바와 같이 측정 될 것이다. 환자는 8 시간마다 동요 식 식사를 받게되며, 각각은 일일 에너지 요구 사항의 1/12를 제공하므로 총 일일 섭취량의 67%가 제공됩니다.

7 개의 테스트 단백질 섭취 수준은 고환이 될 것입니다. 아미노산 산화의 중단 점을 식별하기 위해 측정 된 단백질 요구 사항보다 적어도 2 개의 섭취 수준이있는 것이 중요합니다. 따라서, 우리는 건강한 남성과 여성의 요구 사항 아래 두 가지 섭취량을 포함하는 다양한 섭취 수준을 선택했습니다. 하나는 건강한 요구 사항에 맞게 4 개, 최종 두 섭취 수준 이전에 중단 점이 발생할 것으로 예상합니다.

식이의 나머지는 Ree x 1.5의 일일 에너지 요구 사항을 충족시키기 위해 40% 지방 및 40% 탄수화물로 제공 될 것입니다. 단백질은 난 단백질과 유사한 아미노산 프로파일을 갖는 결정질 아미노산 혼합물로서 제공된다. 식이의 나머지 부분은 단백질이없는 분말, 향료, 오일 및 단백질이없는 쿠키로 구성됩니다.

5 번째 식사에서 트레이서 프로토콜이 시작됩니다. 0.176 mg/kg NAH13CO3 및 1.86 mg/kg 1-13C 페닐알라닌의 프라이머 용량에 다섯 번째 식사가 제공 될 것입니다. 다음 세 식사로 1.2 mg/kg 1-13c 페닐알라닌이 첨가 될 것이다.

페닐알라닌 트레이서는 단백질 합성에 충분한 공급을 보장하기 위해 권장 일일 허용량 (RDA)의 약 3 배인 30.5 mg/kg/일인 경우 총식이 페닐알라닌 섭취의 일부를 형성합니다. 아미노산에 대한 RDA는 이전에 IAAO 연구에 의해 결정된 바와 같이 단백질 합성에 필요한 아미노산의 양이다. 마찬가지로 총 티로신 섭취량은 단백질 침착을 위해 페닐알라닌의 전환을 티로신으로 전환하는 것을 최소화하기 위해 40 mg/kg/일이며, 요건이 초과됩니다. 두 가지 안정적인 동위 원소는 Cambridge 동위 원소 연구소 (Woburn, MA, USA)에서 구입할 것입니다.

호흡 및 소변 샘플은 각각 페닐알라닌 산화 및 페닐알라닌 플럭스를 측정하기 위해 수집 될 것이다. 3 x12ml 호흡 샘플은 트레이서 프로토콜을 시작하기 전에 2 시점에서 3 개의 시간표 및 15mL 소변 샘플로 수집됩니다. 추적자 프로토콜이 시작된 후 2.5 시간에서 실험 종료 (8 시간)까지. 호흡 샘플은 6 회 (매번 12ml x 3)와 소변 (매번 15ml)을 수집합니다. 호흡 샘플은 실온에서 저장되며 소변 샘플은 동결되고 -20 ° C로 저장됩니다. 13CO2 만료 된 공기 및 소변의 농축은 가스 크로마토 그래피-질병 분광법 (GC-MS)의 사용으로 측정 될 것이다.

동위 원소 정상 상태 동안 전신 페닐알라닌 플럭스는 Matthews et al.의 모델에 따라 계산 될 것이다. IAAO 연구에 대해 이전에 설명 된 바와 같이. 페닐알라닌 플럭스는 소변에서 13c- 페닐알라닌으로 측정 된 섭취 된 표지 된 페닐알라닌의 희석으로 측정된다. 만료 된 공기 (F13CO2)에서 13CO2의 외관 속도는 섭취 된 페닐알라닌의 산화를 나타낸다. F13CO2는 중탄산염 풀에 유지 된 이산화탄소에 대해 0.82 인자를 사용하여 Matthews et al.의 모델에 따라 계산됩니다 (32).