Wymagania białkowe po operacji bariatrycznej (PROXY)

Celem badania jest określenie wymagań podtrzymujących białko w diecie dla dorosłych mężczyzn, którzy wcześniej przeszli operację Roux-en-Y-Bypass (RYGB), stosując metodę minimalnie inwazyjnego wskaźnika utleniania aminokwasów (IAAO). Hipoteza badania jest taka, że ​​wymagania dotyczące białka w diecie będą podwyższone w tej populacji w porównaniu do młodych dorosłych bez wcześniejszej operacji bariatrycznej. Hipoteza zerowa stwierdza, że ​​nie ma różnicy w wymaganiach dotyczących białka w diecie między dorosłymi z poprzednią operacją RYGB i dorosłymi bez wcześniejszej operacji. Wymagania białka zostaną wyrażone w stosunku do beztłuszczowej masy (FFM), aby uwzględnić otyłość wzrostu beztłuszczowej.

Głównym punktem końcowym badania są szacowane średnie wymagania białkowe (g/kg ffm/d) i górna granica 95% przedziału ufności.

Badanie obejmuje żywieniowe badanie eksperymentalne z wykorzystaniem metody IAAO w celu określenia wymagań białkowych. Wskaźnik utlenianie aminokwasów mierzy się przy siedmiu przyrostowych poziomach spożycia białka, każdy w oddzielnym badaniu dzień po dwóch dniach adaptacji. Wymagania dotyczące spożycia białka są obliczane jako poziom spożycia białka, w którym wskaźnik aminokwasowy utlenianie aminokwasów przestaje spadać, pomimo dalszego wzrostu spożycia białka. Jest to określane jako punkt przerwania. Sekwencje poziomów spożycia białka są losowe dla każdego uczestnika badania. Wymagania białka są obliczane, nie na osobę, ale dla całej populacji badanej, gdy na każdym poziomie spożycia białka uwzględniono wystarczające badania utleniania. Oznacza to, że ta sama osoba nie musi ukończyć wszystkich badań utleniania w siedmiu punktach czasowych.

Badanie będzie składać się z jednej wstępnej wizyty badań i planowania oraz od 2 do 7 wizyt w badaniu metabolicznym. Każdy uczestnik może ukończyć co najmniej dwa, najlepiej więcej i do wszystkich 7 poziomów spożycia białka.

Pacjenci, którzy wcześniej wyrazili zgodę na udział w repozytorium kliniki otyłości UZ Leuven (ClinicalTrials.gov Identyfikator NCT04614961; S-62590) zostanie wstępnie przeanalizowany zgodnie z kryteriami badania. Następnie skontaktuje się z pacjentami, którzy pozostają kwalifikowani i otrzymają informacje dotyczące badania przy użyciu formularza świadomej zgody. Zaproszenie do udziału w badaniu będzie również rozpowszechnione przez grupy wsparcia pacjentów otyłości i chirurgii bariatrycznej przy użyciu ich platform sieciowych (patrz dodatek A). Pacjenci zainteresowani udziałem zostaną zaproszeni do skontaktowania się z koordynatorem badania. Pacjenci, którzy ukończyli ocenę wstępne i pozostają kwalifikowalni, zaproszą się na wizytę w badaniu przesiewowym.

Pacjenci, którzy pozostają uprawnieni do uczestnictwa, otrzymają dalsze informacje dotyczące procedur badania i otrzymają instrukcje oraz artykuły spożywcze i przyczyny potrzebne do pierwszego 3-dniowego eksperymentu metabolicznego. Pacjenci otrzymają również suplement multiwitaminowo-mineralny odpowiedni dla pacjentów po operacji bariatrycznej, aby spożywać czas trwania badania. Zwykłe spożycie dietetyczne zostanie zgłoszone przez 3-dniowe dziennik żywności. W przypadku pacjentów, którzy nie spełniają wszystkich kryteriów włączenia, każdy nowo zidentyfikowany uniesiony glukoza krwi, ciśnienie krwi, nieprawidłowe czynność wątroby lub zmniejszona funkcja nerek zostanie zgłoszona pacjentowi i ich lekarza ogólnego.

Dzień badania zostanie powtórzony 7 razy, każdy na innym poziomie spożycia. Badani losowo otrzymają jeden z siedmiu poziomów spożycia białka podczas każdego eksperymentu IAAO (ryc. 1.). Prosta randomizacja zostanie przeprowadzona przy użyciu tabel RedCAP i alokacji utworzonych w R w celu przydzielenia innego poziomu białka podczas każdej z wizyt. Przydział zostanie ukryty przed uczestnikami. Jeden badacz zostanie nieoceniony do przydziału, ponieważ musi on obliczyć i fizycznie przygotować diety badań na podstawie określonego poziomu spożycia białka danego dnia badania. Nie będzie to wtrącić stronniczości, ponieważ wyniki badań są procesami metabolicznymi mierzonymi obiektywną analizą biochemiczną.

Skontaktujemy się z pacjentami z protokołami adaptacyjnymi i zaplanowano wizyty eksperymentalne. Protokół badania opiera się na ustalonej metodzie IAAO (26). Na dwa dni adaptacyjne przed dniem testowania IAAO pacjent zużyje dietę podtrzymującą, zapewniając spożycie energii ad libitum i spożycie białka na poziomie 1,5 g/kg idealnej masy ciała. Ta ilość białka spełnia obecne wyższe wymagania dotyczące białka u osób po operacji bariatrycznej (16), a tym samym uniknąć stanu katabolicznego w okresie adaptacji.

Dietą konserwacyjną będzie zwykłe spożycie pokarmu uczestników z dodatkowymi dodatkowymi suplementami białkowymi w razie potrzeby. Uczestnicy będą mogli w razie potrzeby spożywać jedną filiżankę kawy lub herbaty i dodatkową wodę. Spożycie pokarmu w ciągu 2 dni zostanie zarejestrowane w celu pomiaru spożycia białka i energii.

Dni badań metabolicznych W dniach badań pacjenci odwiedzą jednostkę badań Acronim w UZ Leuven. Pacjenci zostaną poinstruowani, aby przybyli na wizytę w badaniu po 12-godzinnym szybkim nocnym noc. Po przybyciu masa ciała i skład ciała zostaną zmierzone jak opisano powyżej. Pacjent otrzyma osiem godzinowych posiłków izokalorycznych, z których każdy zapewnia 1/12 dziennego zapotrzebowania na energię, a zatem 67% całkowitego codziennego spożycia.

7 poziomów spożycia białka testowego będą jąder. Ważne jest, aby istniały co najmniej 2 poziomy spożycia poniżej i powyżej zmierzonych wymagań białkowych w celu zidentyfikowania punktu przerwania utleniania aminokwasów. Dlatego wybraliśmy szereg poziomów spożycia, który obejmuje dwa spożycie poniżej wymagań u zdrowych mężczyzn i kobiet, jeden, który jest dostosowany do zdrowych wymagań, i czterech na wyższych poziomach, przewidując, że punkt przerwania nastąpi przed dwoma ostatnimi poziomami spożycia.

Pozostała część diety zostanie zapewniona jako 40% tłuszczu i 40% węglowodanów, aby spełnić codzienne zapotrzebowanie na energię REE x 1,5. Białko jest dostarczane jako krystaliczna mieszanka aminokwasowa o podobnym profilu aminokwasowym do białka jaja. Pozostała część diety składa się z proszku wolnego od białka, aromatyzowania, oleju i ciasteczek bez białka.

Od 5. posiłku rozpocznie się protokół znacznika. Dawkowanie starterów 0,176 mg/kg NaH13CO3 i 1,86 mg/kg 1-13c fenyloalanina zostanie wyposażona w piąty posiłek. Przy kolejnych trzech posiłkach zostanie dodane 1,2 mg/kg 1-13c fenyloalanina.

Tracer fenyloalaniny będzie częścią całkowitego spożycia fenyloalaniny w diecie, jeśli 30,5 mg/kg/dzień, około trzykrotnie zalecana dzienna zasiłek (RDA), aby zapewnić wystarczającą podaż syntezy białek. RDA dla aminokwasu jest ilością aminokwasu wymaganego do syntezy białek, jak wcześniej określono w badaniach IAAO. Równie całkowite spożycie tyrozyny będzie wynosić 40 mg/kg/dzień, znacznie przekraczającym wymagania, aby zminimalizować konwersję fenyloalaniny do tyrozyny do odkładania białka. Oba stabilne izotopy zostaną zakupione w Cambridge Isotope Laboratories (Woburn, MA, USA).

Próbki oddechu i moczu zostaną pobrane w celu pomiaru odpowiednio utleniania fenyloalaniny i strumienia fenyloalaniny. 3 x12 ml próbki oddechu zostaną pobrane w trzech punktach czasowych i 15 ml próbek moczu w 2 punktach czasowych przed rozpoczęciem protokołu znacznika. Od 2,5 godziny po rozpoczęciu protokołu znacznika do końca eksperymentu (godzina ósmka). Próbki oddechu będą pobierane 6 razy (12 ml x 3 za każdym razem) i moczu dwa razy (15 ml za każdym razem). Próbki oddechu będą przechowywane w temperaturze pokojowej, a próbki moczu zostaną zamrożone i przechowywane w temperaturze -20 ° C. Wzbogacanie 13CO2 wygaśnięte w moczu wzbogacanie fenyloalaniny w moczu 13C będzie mierzone przy zastosowaniu spektrometrii chromatografii gazowej (GC-MS).

Strumień fenyloalaniny całego ciała podczas izotopowego stanu ustalonego zostanie obliczony zgodnie z modelem Matthewsa i in. Jak wcześniej opisano w badaniach IAAO. Strumień fenyloalaniny mierzy się jako rozcieńczenie połkniętej fenyloalaniny, mierzone jako 13C-fenyloalanina w moczu. Szybkość wyglądu 13CO2 w wygasłym powietrzu (F13CO2) reprezentuje utlenianie połkniętej fenyloalaniny. F13CO2 jest obliczany zgodnie z modelem Matthewsa i wsp., Przy użyciu współczynnika 0,82 do rozliczenia dwutlenku węgla zatrzymanego w puli wodorowęglanu (32).