Requisitos de proteína após cirurgia bariátrica (PROXY)

O objetivo do estudo é determinar os requisitos de proteína dietética de manutenção para homens adultos que já foram submetidos à cirurgia de Roux-in-Y-Bypass (RYGB), usando o método de oxidação de aminoácidos indicadores minimamente invasivos (IAAO). A hipótese do estudo é que os requisitos de proteína da dieta serão elevados nessa população em comparação com adultos jovens, sem cirurgia bariátrica anterior. A hipótese nula afirma que não há diferença nos requisitos de proteínas da dieta entre adultos com cirurgia anterior de RYGB e adultos sem cirurgia anterior. Os requisitos de proteína serão expressos em relação à massa livre de gordura (FFM) para explicar os aumentos relacionados à obesidade na massa magra.

O endpoint primário do estudo é os requisitos médios estimados de proteína (g/kg FFM/D) e o limite superior do intervalo de confiança de 95%.

O estudo compreende um estudo experimental nutricional usando o método IAAO para determinar os requisitos de proteína. O oxidação do aminoácido indicador é medido em sete níveis incrementais de ingestão de proteínas, cada um em um dia de estudo separado após dois dias de adaptação. Os requisitos de ingestão de proteínas são calculados como o nível de ingestão de proteínas, onde o indicador o oxidação de aminoácidos deixa de diminuir ainda mais, apesar de um aumento adicional na ingestão de proteínas. Isso é chamado de ponto de interrupção. As sequências dos níveis de ingestão de proteínas são randomizadas para cada participante do estudo. Os requisitos de proteína são calculados, não por indivíduo, mas para toda a população do estudo, quando estudos de oxidação suficientes são incluídos em cada nível de ingestão de proteínas. Isso implica que o mesmo indivíduo não precisa concluir todos os estudos de oxidação nos sete momentos.

O estudo consistirá em uma triagem inicial e visita de planejamento e 2 a 7 visitas a estudos metabólicos. Cada participante pode completar pelo menos dois, de preferência mais e até todos os 7 níveis de ingestão de proteínas.

Pacientes que anteriormente consentiram em serem incluídos em um repositório da clínica de obesidade UZ Leuven (ClinicalTrials.gov Identificador NCT04614961; S-62590) será pré-selecionado de acordo com os critérios de estudo. Posteriormente, os pacientes que permanecem elegíveis serão contatados e receberão informações sobre o estudo usando o formulário de consentimento informado. Um convite para participar do estudo também será divulgado através de grupos de apoio ao paciente de obesidade e cirurgia bariátrica usando suas plataformas de rede social (consulte o Adendo A). Os pacientes interessados ​​em participação serão convidados a entrar em contato com o coordenador do estudo. Os pacientes que concluem a avaliação pré-triagem e permanecem elegíveis serão convidados a uma visita de triagem.

Os pacientes que permanecem elegíveis para participar receberão mais informações sobre os procedimentos do estudo e receberão instruções e itens alimentares e utensílios necessários para o primeiro experimento metabólico de três dias. Os pacientes também receberão um suplemento multivitamínico adequado para pacientes após cirurgia bariátrica para consumir durante a duração do estudo. A ingestão alimentar habitual será auto-relatada usando um diário alimentar de 3 dias. Para os pacientes que não atendem a todos os critérios de inclusão, qualquer glicose no sangue elevada recentemente identificada, pressão arterial, função hepática anormal ou função renal diminuída será relatada ao paciente e ao seu clínico geral.

O dia do estudo será repetido 7 vezes, cada um em um nível de ingestão diferente. Os sujeitos receberão aleatoriamente um dos sete níveis de ingestão de proteínas durante cada experimento IAAO (Figura 1.). A randomização simples será realizada usando tabelas RedCap e alocação criadas em r para alocar um nível de proteína diferente durante cada uma das visitas. A alocação será escondida dos participantes. Um investigador não estará cego à alocação, pois precisa calcular e preparar fisicamente as dietas do estudo com base no nível específico de ingestão de proteínas do dia do estudo. Isso não interromperá o viés, pois os resultados do estudo são processos metabólicos medidos por análise bioquímica objetiva.

Os pacientes dos dias de adaptação que os pacientes serão contatados e visitas experimentais agendadas. O protocolo do estudo é baseado no método IAAO estabelecido (26). Em dois dias de adaptação anteriores ao dia dos testes do IAAO, o paciente consumirá uma dieta de manutenção que fornece ingestão de energia ad libitum e ingestão de proteínas a 1,5 g/kg de peso corporal ideal. Essa quantidade de proteína atende ao limite superior atual dos requisitos de proteína para indivíduos após a cirurgia bariátrica (16) e, assim, para evitar um estado catabólico durante o período de adaptação.

A dieta de manutenção será a ingestão habitual de alimentos dos participantes com os suplementos adicionais de proteínas, conforme necessário. Os participantes poderão consumir uma xícara de café ou chá e água adicional, conforme necessário. A ingestão de alimentos durante os 2 dias será registrada para medir a ingestão de proteínas e energia.

Dias de estudo metabólico nos dias de estudo, os pacientes visitarão a unidade de estudo Acronim na UZ Leuven. Os pacientes serão instruídos a chegar para a visita de estudo após um jejum de 12 horas durante a noite. Na chegada, o peso corporal e a composição corporal serão medidos como descrito acima. O paciente receberá oito refeições isocalóricas por hora, cada uma fornecendo 1/12 de seus requisitos de energia diária, assim 67% de sua ingestão diária total.

Os 7 níveis de ingestão de proteínas de teste serão testículos. É importante que haja pelo menos 2 níveis de ingestão abaixo e acima dos requisitos de proteína medidos para identificar um ponto de interrupção da oxidação de aminoácidos. Portanto, selecionamos uma série de níveis de ingestão, que inclui duas entradas abaixo dos requisitos em homens e mulheres saudáveis, que está alinhado a requisitos saudáveis ​​e quatro em níveis mais altos, antecipando que o ponto de interrupção ocorrerá antes dos dois níveis finais de entrada.

O restante da dieta será fornecido como 40% de gordura e 40% de carboidratos para atender aos requisitos diários de energia do Ree X 1,5. A proteína é fornecida como uma mistura de aminoácidos cristalina com um perfil de aminoácidos semelhante à proteína do ovo. O restante da dieta será composto de pó livre de proteínas, aromatizantes, óleo e biscoitos sem proteínas.

A partir da 5ª refeição, o protocolo Tracer começará. Uma dose de primer de 0,176 mg/kg nah13Co3 e 1,86 mg/kg 1-13C fenilalanina receberá a quinta refeição. Com as próximas três refeições, 1,2 mg/kg 1-13C fenilalanina será adicionada.

O traçador de fenilalanina fará parte de uma ingestão total de fenilalanina na dieta se 30,5 mg/kg/dia, aproximadamente três vezes o subsídio diário recomendado (RDA) para garantir suprimento suficiente para síntese de proteínas. O RDA para um aminoácido é a quantidade de aminoácido necessária para a síntese de proteínas, conforme determinado anteriormente pelos estudos da IAAO. A ingestão total de tirosina total será de 40 mg/kg/dia, além dos requisitos, para minimizar a conversão da fenilalanina em tirosina para a deposição de proteínas. Ambos os isótopos estáveis ​​serão adquiridos da Cambridge Isotope Laboratories (Woburn, MA, EUA).

As amostras de respiração e urina serão coletadas para medir a oxidação da fenilalanina e o fluxo de fenilalanina, respectivamente. 3 x12 ml de amostras de respiração serão coletadas em três pontos de tempo e amostras de urina de 15 ml em 2 momentos antes de iniciar o protocolo Tracer. De 2,5 horas após o início do protocolo Tracer até o final do experimento (oito horas). As amostras de respiração serão coletadas 6 vezes (12 ml x 3 de cada vez) e urina duas vezes (15 ml de cada vez). As amostras de respiração serão armazenadas à temperatura ambiente e as amostras de urina serão congeladas e armazenadas a -20 ° C. 13CO2 O enriquecimento do enriquecimento de fenilalanina do ar e urina expirado será medido com o uso de espectrometria de massa de cromatografia gasosa (GC-MS).

O fluxo de fenilalanina de corpo inteiro durante o estado estacionário isotópico será calculado de acordo com o modelo de Matthews et al. como foi descrito anteriormente para estudos da IAAO. O fluxo de fenilalanina é medido como a diluição da fenilalanina marcada ingerida, medida como 13cfenilalanina na urina. A taxa de aparência de 13CO2 no ar expirado (F13CO2) representa a oxidação da fenilalanina ingerida. O F13CO2 é calculado de acordo com o modelo de Matthews et al., Usando um fator de 0,82 na conta de dióxido de carbono retido no pool de bicarbonato (32).