Požadavky na proteiny po bariatrické chirurgii (PROXY)

Cílem studie je stanovit údržbu požadavků na proteiny v potravě u dospělých mužů, kteří již dříve podstoupili chirurgii Roux-en-Y-Bypass (RYGB), pomocí metody minimálně invazivního indikátoru oxidace aminokyselin (IAAO). Hypotéza studie je, že v této populaci budou zvýšeny požadavky na proteiny v potravě ve srovnání s mladými dospělými bez předchozí bariatrické chirurgie. Nulová hypotéza uvádí, že neexistuje žádný rozdíl v požadavcích na proteiny v potravě mezi dospělými s předchozí chirurgií RYGB a dospělými bez předchozí chirurgické zákroky. Požadavky na proteiny budou exprimovány ve srovnání s Maskou bez tuků (FFM), aby se zohlednily zvýšení štíhlé hmoty související s obezitou.

Primárním koncovým bodem studie jsou odhadované průměrné požadavky proteinu (G/kg FFM/D) a horní hranice intervalu spolehlivosti 95%.

Studie zahrnuje nutriční experimentální studii s použitím metody IAAO k stanovení požadavků na proteiny. Indikátory oxidace aminokyselin se měří při sedmi hladinách přírůstkového proteinu, každý v samostatném dni studie po dvou adaptačních dnech. Požadavky na příjem proteinu se počítají jako úroveň příjmu proteinu, kde indikátor oxidace aminokyselin přestává snižovat i přes další zvýšení příjmu proteinu. Toto je označováno jako bod zlomu. Sekvence úrovní příjmu proteinu jsou randomizovány pro každého účastníka studie. Požadavky na proteiny se počítají, nikoli na jednotlivce, ale pro celou populaci studie, kdy jsou do každé úrovně příjmu proteinu zahrnuty dostatečné studie oxidace. To znamená, že stejný jedinec nemusí dokončit všechny oxidační studie v sedmi časových bodech.

Studie se bude skládat z jedné počáteční kontroly a návštěvy plánování a 2 až 7 metabolických pokusů. Každý účastník může dokončit alespoň dva, nejlépe více a až do všech 7 úrovní příjmu proteinů.

Pacienti, kteří dříve souhlasili, aby byli zahrnuti do úložiště kliniky Obezity UZ Leuven (ClinicalTrials.gov Identifikátor NCT04614961; S-62590) bude předběžně prověřen podle kritérií studie. Poté budou pacienti, kteří zůstávají způsobilí, budou kontaktováni a obdrží informace o studii pomocí formuláře informovaného souhlasu. Pozvánka k účasti na studii bude také rozesílána prostřednictvím skupin podpůrné podpory pacientů a bariatrické chirurgie pomocí svých platforem sociálních sítí (viz dodatek A). Pacienti, kteří mají zájem o účast, budou vyzváni, aby kontaktovali koordinátora studie. Pacienti, kteří dokončí hodnocení předběžného screeningu a zůstávají způsobilí, budou pozváni na screeningovou návštěvu.

Pacienti, kteří se zůstávají způsobilí k účasti, obdrží další informace týkající se studijních postupů a budou jim poskytnuty pokyny a potraviny a nádobí potřebné pro první 3denní metabolický experiment. Pacienti budou také poskytnut multivitamin-minerální doplněk vhodný pro pacienty po bariatrické chirurgii, aby se konzumovali po celou dobu studie. Obvyklý příjem stravy bude hlášen samostatně pomocí třídenního potravinového deníku. U pacientů, kteří nesplňují všechna kritéria pro zařazení, bude u pacienta a jejich praktickým lékařem hlášena jakákoli nově identifikovaná zvýšená glukóza v krvi, krevní tlak, abnormální funkce jater nebo snížená funkce ledvin.

Den studie se bude opakovat 7krát, každý na jiné úrovni saje. Subjekty během každého experimentu IAAO náhodně obdrží jednu ze sedmi úrovní příjmu proteinů (obrázek 1.). Jednoduchá randomizace bude provedena pomocí tabulek RedCap a alokace vytvořených v R k přidělení jiné úrovně proteinu během každé návštěvy. Alokace bude skryto od účastníků. Jeden vyšetřovatel bude bez stisknutí přidělení, protože potřebuje vypočítat a fyzicky připravit studijní stravu založenou na specifické úrovni příjmu proteinu v daném dni studie. To nebude ovlivňovat zkreslení, protože výsledky studie jsou metabolické procesy měřené objektivní biochemickou analýzou.

Budou kontaktováni pacienti s adaptačními dny a budou naplánovány experimentální návštěvy. Protokol studie je založen na zavedené metodě IAAO (26). Ve dvou adaptačních dnech před dnem testování IAAO bude pacient konzumovat údržbářskou stravu, která poskytuje příjem energie ad libitum a příjem bílkovin při 1,5 g/kg ideální tělesné hmotnosti. Toto množství proteinu splňuje současné horní limit proteinových požadavků na jednotlivce po bariatrické chirurgii (16), a proto se během adaptačního období zabrání katabolickému stavu.

Údržbářská strava bude účastníky obvyklým příjmem potravy s dalšími dalšími doplňky proteinů podle potřeby. Účastníci budou mít povoleno konzumovat jeden šálek kávy nebo čaje a podle potřeby další vodu. Příjem potravy během 2 dnů bude zaznamenán pro měření příjmu bílkovin a energie.

Metabolické studijní dny Ve studijních dnech pacienti navštíví studijní jednotku Acronim v UZ Leuven. Pacienti budou instruováni, aby dorazili na studijní návštěvu po 12hodinovém rychlém přes noc. Po příjezdu se tělesná hmotnost a složení těla měří, jak je popsáno výše. Pacient obdrží osm hodinových izokalorických jídel, z nichž každá poskytuje 1/12 jejich denní energetické požadavky, tedy 67% jejich celkového denního příjmu.

Hladiny příjmu testovacích proteinů budou varlata. Je důležité, aby pod a nad měřenými proteinovými požadavky existovaly nejméně 2 úrovně příjmu k identifikaci bodu oxidace aminokyselin. Proto jsme vybrali řadu úrovní sací, která zahrnuje dva přívody pod požadavky u zdravých mužů a žen, jeden, který je v souladu se zdravými požadavky, a čtyři na vyšších úrovních, což očekávalo, že bod zlomu dojde před posledními dvěma úrovními příjmu.

Zbytek stravy bude poskytován jako 40% tuku a 40% uhlohydrátů, aby splňoval denní energetické požadavky REE x 1,5. Protein je poskytován jako směs krystalické aminokyseliny s podobným aminokyselinovým profilem jako vaječný protein. Zbytek stravy bude tvořen práškem bez bílkovin, aroma, olej a bez bílkovin.

Z pátého jídla začne protokol Tracer. Dávkování primeru 0,176 mg/kg NAH13CO3 a 1,86 mg/kg 1-13C fenylalanin bude zajištěno pátým jídlem. Při dalších třech jídlech bude přidáno 1,2 mg/kg 1-13c fenylalanin.

Fenylalaninový indikátor bude součástí celkového příjmu fenylalaninu v potravě, pokud 30,5 mg/kg/den, přibližně trojnásobek doporučeného denního příspěvku (RDA,), aby se zajistila dostatečná dodávka pro syntézu proteinů. RDA pro aminokyselinu je množství aminokyseliny potřebné pro syntézu proteinů, jak bylo dříve stanoveno studiemi IAAO. Stejně tak celkový příjem tyrosinu bude 40 mg/kg/den, dobře přesahující požadavky, aby se minimalizoval přeměnu fenylalaninu na tyrosin pro ukládání proteinu. Obě stabilní izotopy budou zakoupeny od Cambridge Isotope Laboratories (Woburn, MA, USA).

Vzorky dechu a moči budou odebrány pro měření oxidace fenylalaninu a toku fenylalaninu. 3 x12 ml dechové vzorky budou odebrány ve třech časových bodech a 15 ml vzorků moči ve 2 časových bodech před zahájením protokolu Tracer. Od 2,5 hodiny po zahájení protokolu Tracer do konce experimentu (osm hodin). Vzorky dechu budou odebrány 6krát (12 ml x 3 pokaždé) a moč dvakrát (pokaždé 15 ml). Vzorky dechu budou skladovány při teplotě místnosti a vzorky moči budou zmrazeny a uloženy při -20 ° C. 13CO2 obohacení vypršeného vzduchu a moči 13C Fenylalanin bude měřeno pomocí spektrometrie plynové chromatografické hmoty (GC-MS).

Tok fenylalaninu celého těla během izotopového ustáleného stavu se vypočítá podle modelu Matthews et al. jak bylo dříve popsáno pro studie IAAO. Fenylalaninový tok se měří jako ředění požitého značeného fenylalaninu, měřeno jako 13c-fenylalanin v moči. Rychlost vzhledu 13CO2 ve vzduchu vypršela (F13CO2) představuje oxidaci požitého fenylalaninu. F13CO2 se vypočítá podle modelu Matthews et al., S použitím faktoru 0,82 k účtu oxidu uhličitého zadrženého v bazénu hydrogenuhličitanu (32).