12 주에 대한 0.1% 국소시 클로스포린 A의 효과 안구 건조한 눈의 면역 세포에 대한 효과

면역계는 건조한 안구 질환 (DED) 병인에서 중추적 인 역할을합니다. 몇몇 눈물 사이토 카인, 케모카인, HLA -DR 분자의 발현 및 항원 제시 세포 - 수지상 세포 (DCS)의 활성화 및 림프구의 증가 된 수준은 모두 DED 발병에서 중심적인 역할을한다. DED 환자의 안구 표면에서 CD4+ 및 CD8+ T 세포의 증가 된 발현은 DED 만성에서 적응 면역의 잠재적 인 역할을 시사한다. 안구 표면에서 항원-제시 세포의 존재 및 MHC II, IL-2, IL-17, IL-6 및 IFN-γ의 상향 조절 및 DED 환자의 눈물에서 다른 공동-자극 분자의 상향 조절은 국소 적응 적 불인 반응의 가능한 활성화를 나타낸다.

결막은 안구 표면 질환에서 면역 학적 및 조직 화학적 분석을위한 1 차 부위 역할을한다. 연구자들은 인상 세포학, 결막 생검 및 실시간 중합 효소 연쇄 반응, 면역 세포 화학 및 광학 현미경과 같은 안구 표면 면역학을 연구하기 위해 다양한 기술을 사용했습니다. 유세포 분석은 다양한 면역 세포 마커의 세포 외 발현의 면역 표지를 통해 세포의 표현형 분석을 허용하는 강력한 기술입니다. HLA-DR과 같은 활성화 마커 및 T 세포 (CD3+, CD4+및 CD8+), B 세포, 자연 살해 세포 및 단핵구 (CD14+세포)를 포함하는 다양한 면역 세포 집단의 증가 된 발현은 결막 인상 세포학 샘플에 대한 유세포 분석법에서 DED에서 관찰된다.

역사적으로, 인간 안구 표면 면역 세포를 연구하려면 침습적 기술이 필요했습니다. 생체 내 공 초점 현미경 (IVCM)의 출현으로 안구 표면 상피 면역 세포 (EIC) 및 각막 신경의 실시간 비 침습적 시각화를 가능하게했습니다. 지난 20 년 동안 연구원들은 IVCM을 사용하여 다양한 안구 표면 장애의 병리학 적 변화를 조사했습니다. 여러 IVCM 연구에서 각막 EIC가 모든 형태의 DED에서 밀도 증가 및 형태의 변화와 같은 변화를 겪는다는 것이 분명합니다. 기존의 정적 IVCM은 각막 EIC의 단일 시점에서 섹션 이미지를 캡처하며, 분석은 밀도 및 형태로 제한됩니다. IVCM의 생체 내 특성은 직접 면역 세포 표현형을 방지하지만, 관찰 된 세포는 주로 그들의 형태 학적 특성에 기초하여 DC로 여겨진다. 따라서, 저자는 EIC라는 용어를 사용하여 면역 세포 밀도 (EIC 밀도)을 정적 IVCM을 사용하여 정량화했습니다. 면역 세포 유형의 확인을 제한하는이 방법과 달리, 최근에 개척 된 기능적 IVCM (FUN-IVCM)은 형태 역학을 관찰하여 각막에서 면역 세포 유형을 확인할 수 있습니다. 이 방법에는 4-5 분 간격으로 30-40 분 동안 연속 시퀀스 및 볼륨 스캔 이미지를 캡처하는 것이 포함됩니다. 그런 다음 이미지는 각 면역 세포의 동적 거동을 식별하기 위해 시간을 낭비합니다. 그들의 동적 거동 및 형태에 기초하여, 세포는 상피 T 세포 (매우 운동성, 더 작은 신체 크기) 또는 수지상 세포 (DC, 덜 운동성, 수상 돌기가있는 더 큰 신체 크기)로 분화 될 수있다. 전방 각막 간질 대 식세포도 확인 될 수 있습니다. 타임 랩스 이미지는 순간 속도 및 변위 속도와 같은 추가 셀 운동성 매개 변수를 검사 할 수 있습니다.

DED에 대한 첫 번째 치료는 인공적인 눈물입니다. 그러나, 질병의 만성적 특성과 반복적 인 급성 악화로 인해 항염증제 요법이 크게 구현되었습니다. 결과적으로, 많은 현재의 치료 접근법은 DED의 악순환주기를 깨는 것을 목표로 다양한 염증 경로를 표적으로한다. 국소 코르티코 스테로이드와 면역 억제제는 모두 DED의 염증을 효과적으로 감소시킵니다. 국소 코르티코 스테로이드는 안구 표면의 염증의 급성 악화를 조절하기 위해 DED에 사용되지만, 장기적인 사용은 이질성 안구 측면 효과에 의해 제한된다. 이를 대조하기 위해, Ciclosporin A (CSA)와 같은 면역 억제제는 최소한의 국소 부작용으로 잠재적 인 항 염증 효과를 갖는다. 만성 DED에서 CSA를 사용하면 안구 표면 염색, 발적, 염증 마커가 크게 감소하고 안구 증상을 개선 할 수 있습니다. 간단히 말해서, CSA는 포스파타제 칼시 뉴린을 억제함으로써 T 세포 증식을 약화시킨다. CSA는 항원 제시 및 DC-T 세포 상호 작용 동안 면역 반응의 상이한 단계에서 기능한다. 선천성 면역 세포는 이제 CSA의 잠재적으로 중요한 표적으로 여겨지며 수지상 세포, 대 식세포 및 호중구의 동시 표적화를 반영 할 수 있습니다. 안구 표면 예비 증거에서 CSA는 HLA-DR, CD11C, 특정 아 pop 토 시스 마커 및 결막 T 림프구와 같은 활성화 마커 및 CSA- 처리 된 DED 환자의 임상 개선을 동반 할 수 있음을 시사한다.

소수의 임상 시험은 염증 감소 및 DED의 증상을 개선시키는 데있어 CSA의 효능을 입증했지만, 안구 표면 면역 세포에 대한 CSA의 직접적인 효과는 정적 및 FUN-IVCM을 사용하여 상세하게 연구되지 않았다. 타고난 면역 세포 모두에 대한 CSA의 영향을 고려할 때, 저자는 0.1% CSA의 사용이 차량과 비교하여 DED의 징후 및 증상의 개선과 함께 안구 표면 면역 반응에 억제 효과를 가질 것이라는 가설을 세웁니다. 이 논문은 DED의 안구 표면 및 적응성 면역계에 대한 CSA의 효과를 포괄적으로 연구하기위한 무작위 임상 시험 프로토콜을 강조합니다. 이 연구는 림프구 마커 (CD45, CD3, CD4) 및 관련 사이토 카인 (TH1 경로 사이토 카인), 특히 IL-2, IFN-oom 및 IL-17의 DCS (CD11C+ DC, HLA-DR), T 헬퍼 세포 집단 (CD4+ T 세포)에 대한 CSA의 영향을 조사 할 것이다.

1.2. 연구 목표 및 가설 목표 1 : 정적 -IVCM 및 FUN-IVCM (면역 세포 밀도, 형태학 및 형태 역학적 행동), 영양학 및 유성 세포 측정법을 사용한 면제 세포 계약 및 세포 측정법을 사용한 면역 세포 계약을 사용한 12 주 국소 0.1% CSA 요법의 효과를 조사하고 비교합니다. (IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IL-17, IL-23, IFN-γ)의 눈물 농도를 평가하는 다중 비드 분석 : CSA는 DEV에서 선천적 및 적응성 면역 세포 밀도, 형태 및 세포 사이토 카인에 억제 효과를 가질 것이다.

AIM 2 : DED 가설에서 DED 징후, 증상 및 면역 세포 특성과 눈물 사이토 카인 사이의 연관성을 평가하기 위해 : 면역 세포 특성, 유틸리티 사이토 카인 및 DED 징후 사이의 직접적인 관계, 증상이 존재합니다.

AIM 3 : 면역 세포 변화와 임상 개선 가설 사이의 시간적 관계를 조사하기 위해 : 면역 세포 특성 (밀도 및 역학) 및 염증 마커의 변화는 CSA 치료 후 DED의 징후 및 증상의 임상 개선보다 우선합니다.