Galectine-3 bij patiënten met endometriose

Endometriose is een goedaardige gynaecologische aandoening met kwaadaardige biologische kenmerken en wordt bepaald door de aanwezigheid van endometriumklieren en stroma buiten de baarmoederholte. Buitenbaarmoederlijke endometriumcellen kunnen zich verspreiden naar bekkenorganen zoals het rectum, de blaas en de eierstokken. De pathofysiologie van endometriose is waarschijnlijk multifactorieel en omvat een wisselwerking tussen verschillende factoren. (Fauser BC, Diedrich K, Bouchard P, Domínguez F, Matzuk M, 2011)

De endometriumcyclus en implantatie zijn complexe processen. Veranderingen in niveaus van sommige regulerende moleculen op het celoppervlak treden op tijdens de streng gecontroleerde proliferatie en differentiatie van de cyclus. De meeste van deze regulerende moleculen en mechanismen zijn nog niet onderzocht. Galectines, een subfamilie van lectines, worden echter afgebakend om vitale celfuncties te reguleren. (Leffler H. et al Inleiding tot galectines. Glycoconj j,2004) Er is aangetoond dat Gal-3 in veel celtypen tot expressie wordt gebracht, waaronder endometriumcellen en trofoblastcellen (Riss D, Naude S 2003). Eerdere studies hebben gemeld dat Gal-3 specifiek tot expressie wordt gebracht in endometriumcellen in de uitscheidingsfase, in placentaweefsel tijdens de vroege zwangerschap en in decidua rond de plaats van implantatie. Een andere studie bevestigde dat Gal-3 een belangrijke rol speelt in het proces van embryonale implantatie (Liu YK, Hum Reprod.2009). Intracellulair Gal-3 bevorderde proliferatie en adhesie in endometriumcellen (Yang H, TaylorHS, 2011).

Het vrouwelijke voortplantingssysteem is kwetsbaar voor de schadelijke effecten van reactieve zuurstofspecies (ROS) die eiwitten, lipiden en de DNA-structuur beschadigen. Oxidatieve stress is een sleutelfactor voor de progressie van endometriose. Er zijn tot nu toe veel theorieën uitgewerkt om de pathogenese van endometriose te verduidelijken en oxidatieve stress, een resultaat van een verhoogde productie van vrije radicalen of uitputting van de endogene antioxidantafweer van het lichaam, is betrokken bij de pathogenese.

Onze studie is een case-control studie die zal worden uitgevoerd in het gezondheidsziekenhuis voor vrouwen en de medische biochemie-afdeling -assiut universiteit. We zullen het weefselniveau van galectine-3 in het endometrium van zowel gezonde vrouwen als vrouwen met endometriose schatten en detecteren of galectine-3 leidt tot of beschermt tegen endometriose. Ook zullen we het niveau van oxidatieve stress markers meten in het endometrium van zowel gezonde als endometriose vrouwen en de correlatie tussen hen en galectine-in endometriose vrouwen onderzoeken.

De steekproefomvang wordt berekend door het computerprogramma Epi Info 2000. Gebaseerd op het verwachte aandeel van galectine-3-deficiëntie onder controles zal 20% zijn en de toename in gevallen met vier keer (Odd Ratio = 4) met 80% vermogen en een betrouwbaarheidsniveau van 95%, is de berekende steekproefomvang 45 gevallen en 45 controles (totaal 90 vrouwen).

De verzamelde gegevens omvatten leeftijd, pariteit, menstruatiegeschiedenis, huidige geschiedenis (inclusief symptomen van pijn, bloeding en onvruchtbaarheid), medicijngeschiedenis, geschiedenis van eerdere ziekten en eventuele onderzoeken die zijn gedaan. Het doel van het onderzoek zal aan elke deelnemer worden uitgelegd voordat het studieblad wordt ingevuld. Er zal schriftelijke toestemming worden verkregen van degenen die welkom zijn om deel te nemen aan het onderzoek, waarna de vrouwen in 2 groepen worden verdeeld.

Groep 1:

45vrouwen die chirurgisch en histolopathologisch bevestigde endometriose bleken te hebben. Endometriummonsters (1-2 gram) zullen worden genomen door laparoscopie, wat de gouden standaard is voor de definitieve diagnose van endometriose.

Groep2:

45 vrouwen vrij van endometriose. Deze vrouwen hadden een normale menstruatiecyclus en hadden binnen 3 maanden voorafgaand aan de monstername geen hormonale therapie gekregen. Endometriummonsters (1-2 gram) zullen van hen worden genomen door middel van een perforatiebiopsie na het inbrengen van het spiraaltje.

Galectine-3 wordt geschat met de ELISA-kit. Endometriummonsters (1-2 gram) worden tijdens de proliferatieve fase (dagen 5-15) van elke vrouw gescheiden en verschillende keren gewassen met een 0,9% steriele zoutoplossing om eventueel bloed uit de weefsels te verwijderen. De weefselmonsters worden gehomogeniseerd door een weefselhomogenisator bij 40.000 tpm. De bovenstaande extracten worden verzameld in Ependorf-buizen en ingevroren bij -80°C tot analyse door ELISA.

De weefselniveaus van NO en TBARS (oxidatieve stressmarkers) werden bepaald met chemische methoden volgens de methoden beschreven door respectievelijk Van Bezooijen et al, (1998) en Buege en Aust (1978). Ook de weefselniveaus van katalase (CAT), glutathion (GSH) en superoxide dismutase (SOD) activiteit (anti-oxidanten) werden bepaald met chemische methoden volgens de methoden beschreven door Clairborne (1985), Beutler et al. (1963) en Marklund (1985).