Innkjøp av vevsprøver for cellekulturer og analyser

Bakgrunn: Det er nå tydelig at praktisk talt hvert menneskelig postnatalt vev inneholder en eller annen type stam-/progenitorcellepopulasjon som er ansvarlig for vevsomsetning og reparasjon. Våre tidligere studier har identifisert en undergruppe av humane benmargsstromale celler (BMSCs) som er multi-potente og i stand til å regenerere bein, brusk, myelostøttende stroma og adipocytter, mens stromaceller avledet fra human milt (SpSCs) og thymus (TSCs) bare danner myelostøttende stroma. Nyere studier tyder på at humane fettavledede stromaceller (ASCs) kan ligne BMSCs, mens stromaceller avledet fra human dermis (DSCs) har ingen av disse egenskapene (og fungerer som en negativ kontroll for de fleste eksperimenter in vitro og in vivo) . Hvor like eller forskjellige disse forskjellige stromalcellepopulasjonene er, er ennå ikke bestemt. Molekylær profilering er nødvendig for å sammenligne disse forskjellige populasjonene og for å belyse faktorene som kontrollerer differensiering av stromale celler til en eller annen celletype.

Mål: Kirurgisk avfall (bein med rød marg, dermis, milt, thymus og fettvev) fra menn og kvinner i varierende alder som gjennomgår klinisk indiserte kirurgiske prosedyrer, vil bli brukt til å etablere stromale cellekulturer for å studere den molekylære profilen og differensieringskapasiteten til stromalen. cellepopulasjoner fra forskjellige vev og for å karakterisere reguleringen av genuttrykk og proteinsyntese i disse stam-/stamfadercellene.

Kvalifisering: Enhver pasient som gjennomgår klinisk indisert kirurgi som innebærer fjerning av bein med rød marg, dermis, milt, thymus og fettvev, og som ikke har: 1) en historie med metabolsk bensykdom, 2) noen form for kreft eller har blitt behandlet med kjemoterapi eller bestråling for kreft, og 3) ikke har mottatt midler som er kjent for å påvirke beinmetabolismen.

Utforming: Normalt operasjonsavfall (bein med rød marg, dermis, milt, thymus og fett) fra prosedyrer som utføres på menn og kvinner ved Suburban Hospital vil bli lagt i næringsmedium (levert av NIDCR) og sendt til NIDCR for etablering av cellekulturstammer. Bare alder, kjønn og sted som vevet ble fjernet fra vil bli registrert. Cellekulturene fra de forskjellige vevene vil bli brukt til å bestemme deres fenotypiske karakter og differensieringsegenskaper ved molekylær profilering, og til studier for å belyse reguleringen av genuttrykk og proteinsyntese. På samme måte vil en del av prøvene innhentet ved Suburban Hospital bli brukt til å generere histologiske seksjoner av det normale vevet som vil bli brukt til å screene nyutviklede antistoffer og molekylære prober. I noen tilfeller vil RNA ekstraheres fra vevene for RT-PCR-analyse. Disse prøvene (celler, seksjoner, mRNA) vil også tjene som normale kontroller for studier utført på prøver hentet fra pasienter med ulike sykdommer rekruttert til NIH under gjeldende NIH-protokoller (97-D-0055, 97-D-0145, 01-D- 0184).