Studie av LMP1- og LMP2-spesifikke cytotoksiske T-lymfocytter (CTL) (DELLA)

Mens pasienter med nasofaryngealt karsinom (NPC) kan kureres ved kjemoterapi og strålebehandling, er utsiktene for pasienter som er resistente mot denne behandlingen eller som får tilbakefall dårlige. Nesten alle pasienter med udifferensiert nasofaryngealt karsinom har EBV-viruset i svulstene, som kan være et mål for immunterapitilnærminger. Vi har med suksess brukt spesialiserte immunsystemceller dyrket i laboratoriet og trent til å gjenkjenne og drepe EBV-infiserte celler (EBV-spesifikke cytotoksiske T-lymfocytter [EBV-CTL]) for å forebygge og behandle en annen type kreft kalt posttransplantasjonslymfom som oppstår etter Beinmargstransplantasjon. Ved posttransplantasjonslymfom har tumorcellene 9 proteiner laget av EBV på overflaten. Men i nasofaryngealt karsinom som utvikler seg hos pasienter med et normalt immunsystem, uttrykker tumorcellene bare 2 EBV-proteiner som er mye vanskeligere for immunsystemet å gjenkjenne. I en tidligere studie laget vi EBV-CTL som gjenkjente alle 9 proteinene og ga dem til pasienter med NPC. For pasienter uten tegn på aktiv sykdom på behandlingstidspunktet, forblir sykdommen i remisjon. For de pasientene med aktiv sykdom på det tidspunktet de mottok CTL, hadde noen pasienter en delvis respons på denne behandlingen, og bare tre pasienter hadde en fullstendig respons. Vi tror hovedårsaken til dette er at mange av T-cellene reagerte med EBV-proteiner som ikke var på tumorcellene, og den andre er at de infunderte T-cellene ikke har nok plass til å vokse.

De to EBV-proteinene som er tilstede på NPC-tumorceller som er gode mål for T-celleterapier, kalles LMP1 og LMP2. Vi planlegger derfor å generere T-celler spesifikke for LMP1 og LMP2 og infundere disse cellene i NPC-pasienter. For å lage LMP1- og LMP2-CTL har vi hentet blod fra pasientene og dyrket en spesiell celletype kalt en dendritisk celle (DC) og EBV-infiserte lymfoblastoide celler (LCL). Vi har deretter overført en adenovirusvektor som bærer LMP1- og LMP2-genet inn i DC og LCL. Disse DC og LCL blir deretter behandlet med stråling slik at de ikke kan vokse og brukes til å stimulere og utvide LMP1- og LMP2-CTL. Denne stimuleringen trener T-cellene til å drepe kreftceller med LMP1 og LMP2 på overflaten.

For å 'skape plass' for EBV-CTL-vekst etter infusjon hos NPC-pasienter har vi allerede brukt et spesielt protein kalt CD45-antistoff, som i en kort periode fjerner de fleste av pasientens T-celler. De foreløpige resultatene av denne studien er oppmuntrende: bruken av CD45-antistoffet er trygt og vi observerte økt EBV-CTL-vekst etter infusjon. I tillegg hadde alle pasienter som har EBV-CTL-vekst klinisk respons.

Vi og andre har demonstrert gjennomførbarheten av CTL-terapi for EBV-positiv NPC hos immunkompetente pasienter, og gir foreløpige bevis på antitumoraktivitet av EBV-CTL i denne pasientpopulasjonen. Ikke alle pasienter reagerte imidlertid, noe som tyder på behovet for ytterligere forbedring. Vi foreslår at CTL-svikt kan overvinnes ved å øke spesifisiteten til det infunderte CTL-produktet. Det vil si at infusjon av CTL spesifikk for LMP1 og LMP2 vil gi større klinisk fordel enn EBV-spesifikk CTL. Begrunnelsen for denne tilnærmingen er rett frem: EBV-spesifikke CTL-linjer generert ved standardmetoder domineres av T-cellekloner som ikke er reaktive for de subdominante EBV-proteinene LMP1 og LMP2 uttrykt i NPC. Vi foreslår også at svikten av adoptivt overført CTL til å målebart ekspandere i det perifere blodet til NPC-pasienter er en konsekvens både av lymfoid homeostase hos disse lymfefylte pasientene og av det hemmende T-celleinfiltratet på sykdomsstedene. Vi vil derfor bruke monoklonale antistoffer rettet mot CD45-antigenet (CD45 MAbs), for å lymfodepleie NPC-pasienter før infusjon av EBV-spesifikk CTL. Foreløpige resultater indikerer at uttømming av CD45 MAb kan øke CTL-ekspansjonen, og at slik utvidelse er assosiert med en høyere sykdomsresponsrate. Vi vil bekrefte og utvide disse lovende nye dataene i denne fase I kliniske studien.