Effekt av diettinntak av tørkede fullmatkonsentrater (Juice Plus) på kliniske resultater etter periodontal terapi: En pilotstudie (BHAM-NSA-05-01)

Dette vil være en longitudinell, randomisert, stratifisert (for alder), dobbeltblind, 3-armet studie av ikke-kirurgisk periodontal terapi. De 3 armene vil være:

1. Daily Juice Plus+ med 2 grønnsaker og 2 frukt- og 2 bærkapsler (testgruppe 1)
2. Daily Juice Plus+ med 2 grønnsaker og 2 frukter og 2 placebokapsler (testgruppe 2)
3. Daglig placebo i form av 6 kapsler (kontrollgruppe)

Frivillige vil motta standard ikke-kirurgisk periodontal terapi av en enkelt operatør (studiehygieniker) og resultatmål vil bli vurdert ved baseline, 3, 6 og 9 måneder etter terapi. Kapsler tas med mat to ganger daglig (3 kapsler om morgenen og 3 kapsler om kvelden).

60 ikke-røykende pasienter med kronisk moderat/alvorlig periodontitt vil bli rekruttert fra polikliniske periodontale klinikker ved Birmingham's Dental Hospital. Forsøkspersonene vil være i alderen 30-60 år, mann eller kvinne. Kronisk periodontitt (CP) vil bli definert som tilstedeværelsen av 2 eller flere steder per kvadrant med pocketing eller interproksimalt festetap på > 6 mm og 1/3. radiografisk bentap.

Følgende eksklusjonskriterier vil gjelde:

• Pasienter med aggressiv sykdom
• Pasienter med fysisk eller psykisk funksjonshemming
• Gravide kvinner
• Pasienter hvis sykehistorie kan sette dem i fare for komplikasjoner fra periodontal terapi (f. behov for antibiotikadekning, warfariniserte personer)
• Pasienter som tar langsiktige antimikrobielle eller antiinflammatoriske legemidler
• Pasienter som ikke kan svelge Juice Plus+ kapsler
• Pasienter som ikke kan gi informert samtykke
• Nåværende røykere
• Pasienter som tar regelmessig vitamintilskudd

Utfallsmål Primære utfallsmål for helbredelse vil være økninger i tilknytningsnivå og reduksjoner i sonderingslommedybder ved 3 måneder. I tillegg vil reduksjon i prosentvis blødning ved sondering (BOP - målt dikotomisk ved 4 steder per tann) fra marginale vev og gingival rødhet vurdert visuelt (Modified Gingival Index-MGI) bli brukt som et primært utfallsmål for vevsinflammasjon.

Sekundære utfallsmål vil være reduksjon i %-steder med avslørt plakk (PS - målt dikotomt ved 4 steder per tann), reduksjoner i volum av gingival crevicular fluid (GCF), økning i GCF og plasma TAOC.

Sonderingstiltak vil bli utført i duplikat med en konstant kraft (UNC PC15) sonde og der det oppstår forskjeller mellom duplikatmål på større enn 1mm, vil det bli tatt et 3. tiltak. Gjennomsnittet av de to nærmeste målene vil bli registrert. Gjennomsnittlig sonderingsfeste og lommedybdemål per fag vil bli beregnet ved hvert undersøkelsespunkt (grunnlinje, 3, 6 og 9 måneder etter terapi).

Blødnings- og plakk-skårene vil uttrykkes som gjennomsnitt per forsøksperson ved hvert undersøkelsespunkt og MGI-skåre som % steder med kodene 0, 1, 2 og 3 per emne.

Prøver GCF-prøver vil bli samlet inn (30s) ved hjelp av Periopaper-strimler fra de mesio-bukkale aspektene på 3 dype (>6 mm) og 3 grunne (

Blodprøver (2 x 7 ml) vil bli samlet inn i Vacutainer™-rør for plasma. Blodplateutarmet plasma vil bli tilberedt ved sentrifugering ved 1000g i 30 minutter (4C). Plasma vil bli delt opp i kryogene hetteglass, og halvparten vil bli hurtigfryst under flytende nitrogen inntil TOAC-analysen. Den resterende halvparten vil bli delt opp i to 1,5 ml kryogene hetteglass og lagret ved -80C for fremtidig bruk (f.eks. analyse for karotenoidaktivitet). Alle prøver oppbevares mørkt og fri for direkte sollys på alle stadier av håndteringen.

Forbedret kjemiluminescensanalyse (ECL) for total antioksidantkapasitet (TAOC) ECL-analysen for total AO-kapasitet (TAOC) ble utviklet av vår gruppe 12 og er basert på pepperrotperoksidase-katalysert oksidasjon av luminol med hydrogenperoksid. Et BioOrbit 1250 luminometer (Labtech International, Sussex, Storbritannia), koblet til en PC som kjører programvare som tillater samtidig opptak/visning av opptil 5000 datapunkter over en periode på opptil 1 time, brukes til å kvantifisere lyseffekten. Forsterkeren, p-jodfenol, er ikke lenger kommersielt tilgjengelig, men syntetiseres "in house". Antioksidantkapasiteten til testprøver vil bli avledet fra standardkurver produsert ved bruk av den vannløselige vitamin E-analogen, 6-hydroksy-2,5,7,8, tetrametylkroman-2-karboksylsyre (Trolox; analyseområde: 0,0625-1,6 nanomol) som vil bli kjørt før og etter testprøver og resultater uttrykt som en konsentrasjon (µM Trolox-ekvivalenter/L; Teq/L).

Alle prøver fra hvert individ gjennom hele studien (n=12: 8 GCF-er - bestående av 1 samlet fra dype steder og 1 samlet fra grunne steder @ hvert av 4 besøk og 4 plasmaprøver) vil bli analysert på samme dag og under samme laboratorium forhold, i duplikat (totalt = 24 per fag). Hver dag vil det bli kjørt prøver fra en testgruppe 1-person, en testgruppe 2-person og en kontrollperson. Alle analyser vil bli fullført i løpet av 10-12 timers laboratorietid per dag og over 20 laboratoriedager (72 analyser per dag og 36 standarder = 108 analyser per dag).

GCF-prøver vil bli tint, eluert i kjørebuffer i 30 minutter før analysen, når 100 ul alikvoter vil bli analysert i duplikat. Plasmaprøver vil bli fortynnet 1:10 i PBS/BSA-løpebuffer og analysert som 20 ul alikvoter i duplikat.

Kalibreringer vil bli kjørt på begynnelsen, midtpunktet og slutten av hver dag.

Statistisk analyse Dette vil bli utført av en uavhengig statistiker utnevnt av National Safety Associates Inc. Alle tre studiehypotesene antar at to forsøkspersoner med samme innledende tilknytningsnivå og lommedybde ville ha samme forventede endelige tilknytningsnivå og lommedybde, bortsett fra effekten av deres respektive behandlinger. Derfor vil de to første hypotesene undersøkes ved å bruke Analyse av kovarians, med 3 måneders verdi av tilknytningsnivå eller lommedybde som respons, startverdi som kovariant og behandling som studiefaktor. Hypotese 3 vil bli undersøkt på lignende måte, bortsett fra at responsen vil være 9-månedersmålingen.

For å teste hypotese 1 og 3 vil placebogruppen bli sammenlignet med de to aktive behandlingsgruppene kombinert. For å teste hypotese 2 vil de to aktive behandlingsgruppene sammenlignes.

Grafiske visninger og regresjonsmodeller vil bli brukt for å undersøke om respons på de aktive behandlingene er relatert til et individs frukt- og grønnsaksinntak målt ved hjelp av Visual Analogue Scale-data.

Sekundære utfall vil bli analysert på lignende måte.

Både Intention-To-Treat (ITT) analyser og Per Protocol (PP) analyser vil bli utført. I ITT-analysene vil data fra alle forsøkspersoner bli brukt, uavhengig av etterlevelse av behandling. I PP-analysene vil de statistiske modellene inkludere mål på etterlevelse.

Alle statistiske tester vil være tosidige og utføres på signifikansnivået 0,05. Analysene vil bli utført ved bruk av SAS for Windows, versjon 8.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA), og SYSTAT, versjon 10.2.01 (SYSTAT Software Inc., Point Richmond, CA, USA).

Manglende data: De primære utfallsmålene tas som en del av standardbehandling under forsøkspersonenes 9 måneders gjennomgang. Det er ingen grunn til at manglende data skal være relatert til behandling eller utfall. Vi vil sjekke om det å ha manglende data er relatert til behandlingsoppdrag, men forventer ellers å kunne se bort fra manglende verdier i analysene fordi de vil «mangle helt tilfeldig».

Kodebrudd Kodene vil bli holdt forseglet og låst på kontoret til PI og vil ikke bli brutt før etter at den statistiske analysen er fullført.

Effektberegning Siden dette er en pilotstudie er det ikke mulig å utføre en effektberegning basert på antioksidantresultater. Ved å bruke det primære utfallsmålet på reduksjon i sonderingslommedybde og anta at vi kan oppnå ytterligere PPD-reduksjoner på 0,5 mm (eller 0,4 mm) i forhold til ikke-kirurgisk terapi alene gjennom tilskudd med Juice Plus+ kapsler, for så å ha 80 % sjanse for finne en betydelig forskjell på s

Pasientoverholdelse Overholdelse med å ta tilskudd vil bli kontrollert ved hvert besøk under aktiv terapi og igjen ved 3, 6 og 9-måneders besøk. Forsøkspersonene vil få et datablad for å logge dager når de har gått glipp av å ta kosttilskudd. I tillegg vil en kryogen hetteglass inneholdende minimum 500 ul plasma bli arkivert ved baseline, 3, 6 og 9 måneder etter terapi for hvert forsøksperson og kan brukes til karotenoidanalyse for biokjemisk verifisering av adherens.

GCP-erklæring Denne studien vil bli utført i samsvar med International Good Clinical Practice (GCP)-standarder.

Dokumentasjon og journalføring Utforskeren vil oppbevare og arkivere alle dokumenter og kildedata (rå) som gjelder studien i en minimumsperiode på 10 år.

Klinisk studierapport Tolkningen av dataene vil være det felles ansvaret for etterforskeren og studieteamet. En sluttrapport vil bli laget skriftlig og er den samme gruppens ansvar og vil inneholde:-

• passende statistiske prosedyrer,
• ethvert avvik fra protokollen;
• konklusjoner om effektiviteten av behandlingene og betydningen av eventuelle forskjeller mellom dem.