Effect van inname via de voeding van gedroogde volwaardige voedingsconcentraten (Juice Plus) op klinische resultaten na parodontale therapie: een pilotstudie (BHAM-NSA-05-01)

Dit wordt een longitudinaal, gerandomiseerd, gestratificeerd (voor leeftijd), dubbelblind, 3-armig onderzoek naar niet-chirurgische parodontale therapie. De 3 armen zullen zijn:

1. Daily Juice Plus+ met 2 groente- & 2 fruit- & 2 bessencapsules (testgroep 1)
2. Daily Juice Plus+ met 2 groente & 2 fruit & 2 placebo capsules (testgroep 2)
3. Dagelijks Placebo in de vorm van 6 capsules (controlegroep)

Vrijwilligers krijgen standaard niet-chirurgische parodontale therapie door een enkele operator (studiehygiënist) en de uitkomstmaten worden beoordeeld bij baseline, 3, 6 en 9 maanden na de therapie. Capsules worden tweemaal daags met voedsel ingenomen (3 capsules 's ochtends en 3 capsules 's avonds).

60 niet-rokende patiënten met chronische matige/ernstige parodontitis zullen worden gerekruteerd uit parodontale poliklinieken in Birmingham's Dental Hospital. Onderwerpen zullen 30-60 jaar oud zijn, man of vrouw. Chronische parodontitis (CP) wordt gedefinieerd als de aanwezigheid van 2 of meer plaatsen per kwadrant met pocketing of interproximaal aanhechtingsverlies van > 6 mm en 1/3e radiografisch botverlies.

De volgende uitsluitingscriteria zijn van toepassing:

• Patiënten met agressieve ziekte
• Patiënten met een lichamelijke of geestelijke beperking
• Zwangere vrouw
• Patiënten van wie de medische geschiedenis hen een risico op complicaties van parodontale therapie kan geven (bijv. behoefte aan antibioticadekking, door oorlog vergiftigde proefpersonen)
• Patiënten die langdurig antimicrobiële of ontstekingsremmende geneesmiddelen gebruiken
• Patiënten die Juice Plus+ capsules niet kunnen doorslikken
• Patiënten die geen geïnformeerde toestemming kunnen geven
• Huidige rokers
• Patiënten die regelmatig vitaminesuppletie gebruiken

Uitkomstmaten Primaire uitkomstmaten voor genezing zijn een toename van het hechtingsniveau en een afname van de diepte van de sondepocket na 3 maanden. Daarnaast zal vermindering van het percentage plaatsen dat bloedt bij sonderen (BOP - dichotoom gemeten op 4 plaatsen per tand) van de marginale weefsels en tandvleesroodheid visueel beoordeeld (Modified Gingival Index-MGI) worden gebruikt als een primaire uitkomstmaat van weefselontsteking.

Secundaire uitkomstmaten zijn vermindering van het % plaatsen met onthulde plaque (PS - dichotoom gemeten op 4 plaatsen per tand), vermindering van het volume van de gingivale creviculaire vloeistof (GCF), toename van GCF en plasma-TAOC.

Sonderende metingen worden in tweevoud uitgevoerd met een sonde met constante kracht (UNC PC15) en waar verschillen tussen dubbele metingen van meer dan 1 mm optreden, wordt een 3e meting uitgevoerd. Het gemiddelde van de twee dichtstbijzijnde maten wordt geregistreerd. Gemiddelde sondeerbevestiging en pocketdieptemetingen per proefpersoon worden berekend op elk onderzoekspunt (baseline, 3, 6 en 9 maanden na de therapie).

De bloedings- en plaquescores worden uitgedrukt als gemiddelden per proefpersoon op elk onderzoekspunt en MGI-scores als % locaties met codes 0, 1, 2 en 3 per proefpersoon.

Monsters GCF-monsters zullen worden verzameld (30 seconden) met Periopaper-strips van de mesiobuccale aspecten van 3 diepe (>6 mm) en 3 ondiepe (

Bloedmonsters (2 x 7 ml) worden verzameld in Vacutainer™-buisjes voor plasma. Bloedplaatjes-verarmd plasma wordt bereid door centrifugatie bij 1000 g gedurende 30 minuten (4C). Plasma wordt verdeeld in cryogene flesjes en de helft wordt snel ingevroren onder vloeibare stikstof tot TOAC-assay. De resterende helft wordt verdeeld in twee cryogene flesjes van 1,5 ml en bewaard bij -80°C voor toekomstig gebruik (bijv. assay voor carotenoïde-activiteit). Alle monsters worden in het donker bewaard en worden in alle stadia van de behandeling vrij van direct zonlicht gehouden.

Verbeterde chemiluminescentietest (ECL) voor totale antioxidantcapaciteit (TAOC) De ECL-test voor totale AO-capaciteit (TAOC) is ontwikkeld door onze groep 12 en is gebaseerd op de door mierikswortelperoxidase gekatalyseerde oxidatie van luminol door waterstofperoxide. Een BioOrbit 1250 luminometer (Labtech International, Sussex, VK), gekoppeld aan een pc met software die gelijktijdige opname / weergave van maximaal 5000 datapunten over een periode van maximaal 1 uur mogelijk maakt, wordt gebruikt om de lichtopbrengst te kwantificeren. De versterker, p-joodfenol, is niet langer in de handel verkrijgbaar, maar wordt "in huis" gesynthetiseerd. Antioxidant-capaciteiten van testmonsters zullen worden afgeleid van standaardcurven geproduceerd met behulp van de in water oplosbare vitamine E-analoog, 6-hydroxy-2,5,7,8, tetramethylchroman-2-carbonzuur (Trolox; testbereik: 0,0625-1,6 nanomol) die zal worden uitgevoerd voor en na testmonsters en resultaten uitgedrukt als een concentratie (μM Trolox-equivalenten/L; Teq/L).

Alle monsters van elke proefpersoon tijdens het onderzoek (n=12: 8 GCF's - waarvan 1 gepoold van diepe locaties & 1 gepoold van ondiepe locaties @ elk van 4 bezoeken & 4 plasmamonsters) zullen op dezelfde dag en in hetzelfde laboratorium worden getest voorwaarden, in tweevoud (totaal = 24 per proefpersoon). Elke dag worden er monsters genomen van een testgroep 1 proefpersoon, een testgroep 2 proefpersoon en een controleproefpersoon. Alle assays worden voltooid in 10-12 uur laboratoriumtijd per dag en gedurende 20 laboratoriumdagen (72 assays per dag & 36 standaarden = 108 assays per dag).

GCF-monsters worden ontdooid, geëlueerd in loopbuffer gedurende 30 minuten voorafgaand aan de assay, wanneer aliquots van 100 µl in duplo worden getest. Plasmamonsters worden 1:10 verdund in PBS/BSA-loopbuffer en in tweevoud getest als aliquots van 20 µl.

Kalibraties worden aan het begin, halverwege en aan het einde van elke dag uitgevoerd.

Statistische analyse Dit wordt uitgevoerd door een onafhankelijke statisticus die is aangesteld door National Safety Associates Inc. Alle drie de onderzoekshypothesen gaan ervan uit dat twee proefpersonen met hetzelfde initiële hechtingsniveau en dezelfde pocketdiepte hetzelfde verwachte uiteindelijke hechtingsniveau en dezelfde pocketdiepte zouden hebben, met uitzondering van het effect van hun respectieve behandelingen. Daarom zullen de eerste twee hypothesen worden onderzocht met behulp van analyse van covariantie, met de 3-maandswaarde van gehechtheidsniveau of pocketdiepte als respons, initiële waarde als covariabele en behandeling als studiefactor. Hypothese 3 zal op vergelijkbare wijze worden onderzocht, behalve dat de respons de 9-maandenmeting zal zijn.

Om hypothese 1 en 3 te testen, zal de placebogroep worden vergeleken met de twee actieve behandelingsgroepen samen. Om hypothese 2 te testen, zullen de twee actieve behandelingsgroepen worden vergeleken.

Grafische weergaven en regressiemodellen zullen worden gebruikt om te onderzoeken of de respons op de actieve behandelingen verband houdt met de inname van fruit en groente door een proefpersoon, zoals gemeten door de Visual Analogue Scale-gegevens.

Secundaire uitkomsten zullen op een vergelijkbare manier worden geanalyseerd.

Er worden zowel Intention-To-Treat (ITT) analyses als Per Protocol (PP) analyses uitgevoerd. In de ITT-analyses worden de gegevens van alle proefpersonen gebruikt, ongeacht therapietrouw. In de PP-analyses zullen de statistische modellen metingen van therapietrouw bevatten.

Alle statistische tests zijn tweezijdig en worden uitgevoerd op het significantieniveau van 0,05. De analyses zullen worden uitgevoerd met behulp van SAS voor Windows, versie 8.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC, VS) en SYSTAT, versie 10.2.01 (SYSTAT Software Inc., Point Richmond, CA, VS).

Ontbrekende gegevens: de primaire uitkomstmaten worden genomen als onderdeel van de standaardzorg tijdens de 9 maanden durende evaluatie van de proefpersonen. Er is geen reden om ontbrekende gegevens te relateren aan behandeling of resultaat. We zullen nagaan of het hebben van ontbrekende gegevens verband houdt met de behandelingstoewijzing, maar verwachten verder ontbrekende waarden in de analyses te kunnen negeren omdat ze "volledig willekeurig ontbreken".

Codebreuk De codes worden verzegeld en op slot bewaard in het kantoor van de PI en worden pas gekraakt nadat de statistische analyse is voltooid.

Vermogensberekening Aangezien dit een pilotstudie is, is het niet mogelijk om een ​​vermogensberekening uit te voeren op basis van de resultaten van antioxidanten. Als we echter de primaire uitkomstmaat gebruiken van vermindering van de diepte van de sondeerpocket en ervan uitgaande dat we aanvullende PPD-reducties van 0,5 mm (of 0,4 mm) kunnen verkrijgen ten opzichte van niet-chirurgische therapie alleen door suppletie met Juice Plus+ capsules, dan hebben we 80% kans op het vinden van een significant verschil op de p

Patiënttherapietrouw De therapietrouw bij het nemen van suppletie zal worden gecontroleerd bij elk bezoek tijdens actieve therapie en opnieuw bij de bezoeken van 3, 6 en 9 maanden. Proefpersonen krijgen een gegevensblad om dagen bij te houden waarop ze supplementen hebben gemist. Bovendien wordt één cryogene injectieflacon met minimaal 500 µl plasma gearchiveerd bij baseline, 3, 6 en 9 maanden na de therapie voor elke proefpersoon en kan worden gebruikt voor carotenoïde-assay voor biochemische verificatie van therapietrouw.

GCP-verklaring Dit onderzoek zal worden uitgevoerd in overeenstemming met de International Good Clinical Practice (GCP)-normen.

Documentatie en archivering De onderzoeker bewaart en archiveert alle documenten en (ruwe) brongegevens met betrekking tot het onderzoek gedurende een periode van minimaal 10 jaar.

Klinisch onderzoeksrapport De interpretatie van de gegevens is de gezamenlijke verantwoordelijkheid van de onderzoeker en het onderzoeksteam. Een eindrapport zal schriftelijk worden opgesteld en valt onder de verantwoordelijkheid van dezelfde groep en omvat:-

• passende statistische procedures,
• elke afwijking van het protocol;
• conclusies over de werkzaamheid van de behandelingen en de betekenis van eventuele verschillen daartussen.